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反义磷脂酶Dγ基因与几丁质酶基因转化美洲黑杨G2
被引量：
12
1
作者
邹维华
赵强
+1 位作者
崔德才
王斌
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期37-42,共6页
建立美洲黑杨G2组培再生体系,确立美洲黑杨G2分化最适宜培养基和生根培养基。然后分别进行卡那霉素和潮霉素敏感性试验,利用叶盘法依次将反义磷脂酶Dγ(Anti_PLDγ)基因和几丁质酶(CH5B)基因转入美洲黑杨G2中。首先转入反义磷脂酶Dγ基...
建立美洲黑杨G2组培再生体系,确立美洲黑杨G2分化最适宜培养基和生根培养基。然后分别进行卡那霉素和潮霉素敏感性试验,利用叶盘法依次将反义磷脂酶Dγ(Anti_PLDγ)基因和几丁质酶(CH5B)基因转入美洲黑杨G2中。首先转入反义磷脂酶Dγ基因,经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素(选择性抗生素)连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株。抗性植株经PCR及PCR_Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti_PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中。耐盐性试验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照都有不同程度提高。选择4号株系继续转入几丁质酶基因,通过潮霉素(选择性抗生素)筛选不定芽及诱导生根获6株潮霉素抗性植株,经PCR及PCR_Southern杂交检测,6株均呈阳性,证明CH5B基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中。由于CH5B基因与报告基因GUS处于同一开放阅读框(ORF)内,因此通过GUS基因的组织化学染色分析,证明了6株转化植株几丁质酶基因均获得正常表达。
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关键词
美洲黑杨
反义磷脂酶dγ基因
几丁质酶
基因
耐盐
抗病
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职称材料
Dip法获得转反义磷脂酶Dγ(PLDγ)基因拟南芥植株
被引量：
11
2
作者
韩红岩
崔德才
+1 位作者
张岳民
刘天臻
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2003年第1期19-23,共5页
在含反义PLDγ基因的质粒根癌农杆菌的介导下 ,以生长到初果期的健壮拟南芥植株为转基因材料 ,用Dip法进行转基因实验 ,对影响转化率的浸染条件进行了比较研究。适宜的转化条件是将拟南芥的整个花序浸泡于农杆菌悬浮液中 (含 5 %蔗糖 ,0...
在含反义PLDγ基因的质粒根癌农杆菌的介导下 ,以生长到初果期的健壮拟南芥植株为转基因材料 ,用Dip法进行转基因实验 ,对影响转化率的浸染条件进行了比较研究。适宜的转化条件是将拟南芥的整个花序浸泡于农杆菌悬浮液中 (含 5 %蔗糖 ,0 .0 4 %吐温 - 80 ) ,每次浸染 10min ,间隔 3天浸染一次 ,共浸染 3次。每次浸染后将植株横放于暗箱中 2 4h ,再置于 2 2～ 2 4℃的光照下正常生长。待种子收获后在含有卡那霉素 70mg L的选择培养基中选择转化植株。PCR及PCR -Southernblot分析检测 ,该方法的转化率每 10 0粒种子可高达 2 %。
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关键词
拟南芥
转
基因
反义磷脂酶dγ基因
d
iP法
卡那霉素
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职称材料
反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因转化美洲黑杨G2的研究
被引量：
5
3
作者
邹维华
李红双
+1 位作者
崔德才
王斌
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2004年第11期2002-2006,共5页
通过农杆菌介导法将反义磷脂酶Dγ Anti-PLDγ 基因转入美洲黑杨G2中以提高其耐盐性.本研究建立了美洲黑杨G2组培再生体系,确立了美洲黑杨G2叶片分化最适宜培养基和生根培养基,进行了卡那霉素 选择性抗生素 敏感性试验,改良了传统的农...
通过农杆菌介导法将反义磷脂酶Dγ Anti-PLDγ 基因转入美洲黑杨G2中以提高其耐盐性.本研究建立了美洲黑杨G2组培再生体系,确立了美洲黑杨G2叶片分化最适宜培养基和生根培养基,进行了卡那霉素 选择性抗生素 敏感性试验,改良了传统的农杆菌介导转化法.经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素 选择性抗生素 连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株,抗性植株经PCR及PCR-Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti-PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中.耐盐性实验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照有不同程度提高.
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关键词
美洲黑杨
反义磷脂酶dγ基因
耐盐
整合位点
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职称材料
题名
反义磷脂酶Dγ基因与几丁质酶基因转化美洲黑杨G2
被引量：
12
1
作者
邹维华
赵强
崔德才
王斌
机构
山东农业大学生命科学学院
中国科学院遗传与发育生物学研究所
出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期37-42,共6页
文摘
建立美洲黑杨G2组培再生体系,确立美洲黑杨G2分化最适宜培养基和生根培养基。然后分别进行卡那霉素和潮霉素敏感性试验,利用叶盘法依次将反义磷脂酶Dγ(Anti_PLDγ)基因和几丁质酶(CH5B)基因转入美洲黑杨G2中。首先转入反义磷脂酶Dγ基因,经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素(选择性抗生素)连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株。抗性植株经PCR及PCR_Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti_PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中。耐盐性试验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照都有不同程度提高。选择4号株系继续转入几丁质酶基因,通过潮霉素(选择性抗生素)筛选不定芽及诱导生根获6株潮霉素抗性植株,经PCR及PCR_Southern杂交检测,6株均呈阳性,证明CH5B基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中。由于CH5B基因与报告基因GUS处于同一开放阅读框(ORF)内,因此通过GUS基因的组织化学染色分析,证明了6株转化植株几丁质酶基因均获得正常表达。
关键词
美洲黑杨
反义磷脂酶dγ基因
几丁质酶
基因
耐盐
抗病
Keywords
Populus
d
eltoi
d
es
antisense phospholipase
d
＇y gene （Anti-PL
d
＇y）
chitinase gene （CH5B）
salt-tolerance
d
isease resistance
分类号
S718.46 [农业科学—林学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
Dip法获得转反义磷脂酶Dγ(PLDγ)基因拟南芥植株
被引量：
11
2
作者
韩红岩
崔德才
张岳民
刘天臻
机构
山东农业大学生命科学院
出处
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2003年第1期19-23,共5页
基金
山东省教委资助
文摘
在含反义PLDγ基因的质粒根癌农杆菌的介导下 ,以生长到初果期的健壮拟南芥植株为转基因材料 ,用Dip法进行转基因实验 ,对影响转化率的浸染条件进行了比较研究。适宜的转化条件是将拟南芥的整个花序浸泡于农杆菌悬浮液中 (含 5 %蔗糖 ,0 .0 4 %吐温 - 80 ) ,每次浸染 10min ,间隔 3天浸染一次 ,共浸染 3次。每次浸染后将植株横放于暗箱中 2 4h ,再置于 2 2～ 2 4℃的光照下正常生长。待种子收获后在含有卡那霉素 70mg L的选择培养基中选择转化植株。PCR及PCR -Southernblot分析检测 ,该方法的转化率每 10 0粒种子可高达 2 %。
关键词
拟南芥
转
基因
反义磷脂酶dγ基因
d
iP法
卡那霉素
Keywords
d
ip metho
d
,PL
dγ
gene,arabi
d
opsis
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因转化美洲黑杨G2的研究
被引量：
5
3
作者
邹维华
李红双
崔德才
王斌
机构
山东农业大学生命科学学院
中国科学院遗传与发育生物学研究所
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2004年第11期2002-2006,共5页
文摘
通过农杆菌介导法将反义磷脂酶Dγ Anti-PLDγ 基因转入美洲黑杨G2中以提高其耐盐性.本研究建立了美洲黑杨G2组培再生体系,确立了美洲黑杨G2叶片分化最适宜培养基和生根培养基,进行了卡那霉素 选择性抗生素 敏感性试验,改良了传统的农杆菌介导转化法.经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素 选择性抗生素 连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株,抗性植株经PCR及PCR-Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti-PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中.耐盐性实验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照有不同程度提高.
关键词
美洲黑杨
反义磷脂酶dγ基因
耐盐
整合位点
Keywords
Populus
d
eltoi
d
es
antisense phospholipase
dγ
gene
salt-tolerance
integration site
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
S792.11 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反义磷脂酶Dγ基因与几丁质酶基因转化美洲黑杨G2
邹维华
赵强
崔德才
王斌
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006
12
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Dip法获得转反义磷脂酶Dγ(PLDγ)基因拟南芥植株
韩红岩
崔德才
张岳民
刘天臻
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2003
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因转化美洲黑杨G2的研究
邹维华
李红双
崔德才
王斌
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2004
5
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职称材料
已选择
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统计分析
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