反义bcl-2硫代磷酸寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的抑制作用及诱导细胞凋亡的研究 被引量：5

1

作者 陈鑫基 胡建达 +1 位作者 战榕 吕联煌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期374-378,共5页

目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫... 目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Bcl- 2蛋白表达 ;通过克隆形成率、细胞计数、流式细胞仪DNA倍体分析、TUNEL等指标观察bcl- 2AS -PS -ODN对细胞增殖、活力和凋亡的影响。结果 :①bcl- 2AS -PS -ODN能特异性地降低NCI-H44 6细胞bcl- 2mRNA和Bcl- 2蛋白的表达。 1μmol/LAS -PS-ODN作用 2 4h后bcl- 2mRNA表达量下降 69 5 % ,48h后Bcl- 2蛋白下降 62 7%。②bcl- 2AS -PS -ODN能够抑制细胞增殖和活力 ,诱导细胞凋亡 ,1μmol/LAS -PS -ODN作用 2 4h后 ,细胞凋亡率约为 2 2 3 % - 3 2 7%。 结论 :bcl- 2AS -PS -ODN能够特异性降低bcl- 2mRNA、蛋白表达 ,抑制NCI-H44 6细胞的增殖和活力 。 展开更多

关键词 硫代磷酸寡脱氧核苷酸 小细胞 肺癌细胞株 NCI-H446 BCL-2 细胞凋亡

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反义寡聚硫代磷酸脱氧核糖核苷酸的抗巨细胞病毒作用

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作者 周天戟 张雪怡 +2 位作者 张灏 王立军 任中原 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期451-454,共4页

目的　研究互补于CMV主要即刻早期 (MIE)mRNA的起始密码子位点和MIEmRNA前体内含子 1/外显子 2拼接位点的 2个 19个碱基的ASS ODN (AS1和AS2 )对CMV复制的抑制作用。方法　采用原位ELISA法测定 2BS细胞上CMV抗原量。结果　 2个S ODN均有... 目的　研究互补于CMV主要即刻早期 (MIE)mRNA的起始密码子位点和MIEmRNA前体内含子 1/外显子 2拼接位点的 2个 19个碱基的ASS ODN (AS1和AS2 )对CMV复制的抑制作用。方法　采用原位ELISA法测定 2BS细胞上CMV抗原量。结果　 2个S ODN均有抗CMV作用 ,半数有效浓度 (EC50 )分别为 4 5 3和 10 2 μmol·L-1。 8 0 μmol·L-1的AS1使CMV抗原分泌推迟 3～ 4d。感染后立即加药效果最好 ,12h后加药效果大大下降 (P <0 0 5 ) ,感染后 36h再添加同一剂量及与DHPG联合使用效果明显增强 (P <0 0 5 )。 2种ASS ODN 6 4 0 μmol·L-1时仅有轻微的细胞毒性 ,16 0 μmol·L-1以下浓度无明显毒副作用。采用 5mg·L-1的脂质体使 2种S ODN的EC50 分别降低了 111 0和 15 1 7倍。 2种正义序列对照也显示出抑制效应 ,EC50 分别为 2 6 2和 30 1μmol·L-1。NorthernBlot分析提示激活RNA酶H降解杂交双链中的mRNA分子为重要的特异性作用机制 ,而干扰CMV对细胞的吸附与侵入为重要的非特异性作用机制。结论　作用于MIE基因的ASS ODN可有效地抑制CMV复制 。 展开更多

关键词 反义寡聚硫代磷酸脱氧核糖核苷酸 巨细胞病毒 抗病毒剂

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IGF-IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡的病理学研究 被引量：6

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作者 牛朝诗 罗其中 +1 位作者 徐纪文 沈建康 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2001年第5期422-426,共5页

目的 :探讨IGF IR基因的反义硫代磷酸型寡核苷酸对胶质瘤细胞的形态学影响。方法 :根据IGF IRcDNA序列设计正义、反义寡核苷酸片段 ,并对其部分碱基进行硫代磷酸修饰。体外培养的胶质瘤细胞分别经正义寡核苷酸和反义寡核苷酸处理 ,应用... 目的 :探讨IGF IR基因的反义硫代磷酸型寡核苷酸对胶质瘤细胞的形态学影响。方法 :根据IGF IRcDNA序列设计正义、反义寡核苷酸片段 ,并对其部分碱基进行硫代磷酸修饰。体外培养的胶质瘤细胞分别经正义寡核苷酸和反义寡核苷酸处理 ,应用倒置显微镜活细胞观察、HE染色光镜观察、透射电镜及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法研究IGF IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡作用。结果 :经反义寡核苷酸转染的胶质瘤细胞中 ,呈现典型的凋亡形态学改变。凋亡细胞最早期表现为细胞体积、容量减少 ,染色质凝聚 ,继之染色质集聚于核膜下成新月状或块状 ;细胞核内染色质可完全固缩成团呈“黑洞”样或萎缩的核破裂形成一些较小的膜包绕的球体位于胞质内 ,最后出泡形成凋亡小体。DNA琼脂糖凝胶电泳分析经反义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞DNA降解片段 ,可见有明显的小分子量DNA梯状条带 ,而野生型和正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞未见DNA梯状条带。结论 :IGF IR所介导的分泌环路IGF I/IGF IR ,在胶质瘤细胞增殖和维持恶性表型中起重要作用 ;IGF IR反义硫代磷酸型寡核苷酸能诱导胶质瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 受体 胰岛素样生长因子Ⅰ 神经胶质瘤 凋良心 反义寡脱氧核糖核苷酸类

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bcl-2、IL-6、IL-6R反义寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞作用的比较 被引量：1

4

作者 祝亮方 陈鑫基 +3 位作者 胡建达 林振兴 陈英玉 黄绿叶 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期232-237,共6页

目的:比较bcl-2、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(antisense phosphorothiate oligodeoxynucleotide,AS-PS-ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖及诱导凋亡的... 目的:比较bcl-2、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(antisense phosphorothiate oligodeoxynucleotide,AS-PS-ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖及诱导凋亡的作用,初步探讨反义核苷酸技术治疗中靶基因的选择策略。方法:合成反义寡脱氧核苷酸bcl-2AS-PS-ODN、IL-6AS-PS-ODN、IL-6RAS-PS-ODN,分别作用于NCI-H446细胞株,通过细胞克隆形成实验检测细胞增殖活性的变化,细胞凋亡线粒体流式检测及DNA倍体分析检测细胞凋亡,半定量RT-PCR检测相关基因表达水平的变化。结果:(1)bcl-2AS-PS-ODN、IL-6AS-PS-ODN、IL-6RAS-PS-ODN均能够抑制肺癌细胞增殖活性和诱导细胞凋亡,其中以IL-6AS-PS-ODN抑制作用最强,bcl-2AS-PS-ODN次之,IL-6RAS-PS-ODN作用最弱。(2)3种反义寡脱氧核苷酸均能下调肺癌细胞相应基因的表达水平,其中以IL-6下调幅度最大,达(84.1±5.01)%;bcl-2和IL-6R基因下调幅度相近,分别为(62.6±3.42)%和(60.3±4.45)%。(3)反义核苷酸作用后除了引起自身基因表达下调外,还伴对其他基因表达的调节作用,如IL-6AS-PS-ODN作用使bcl-2基因表达下调(32.2±0.20)%;而bcl-2AS-PS-ODN作用使IL-6基因表达上调(74.3±4.13)%。结论:IL-6AS-PS-ODN较bcl-2AS-PS-ODN和IL-6RAS-PS-ODN能更有效地诱导小细胞肺癌细胞凋亡,IL-6是NCI-H446小细胞肺癌反义核苷酸治疗较为合适的靶基因。 展开更多

关键词 小细胞肺癌 反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 IL-6 BCL-2 IL-6R 凋亡

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超顺磁性氧化铁标记反义寡脱氧核苷酸探针在转染细胞磁共振成像中的应用 被引量：4

5

作者 文明 李必波 +3 位作者 欧阳羽 蒋明东 罗弋 李少林 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期554-558,I0001,共6页

目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检... 目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检测联接率和生物活性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测稳定性。将ASODN探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br3肿瘤细胞株,普鲁士蓝染色后于光学显微镜下观察细胞内铁分布,原子吸收光谱法测定细胞内铁含量,MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果制备的ASODN探针近似球形,粒径在25～40nm间,分散均匀,联接率为100%,仍保持原有生物活性,稳定性好。转染ASODN探针后的SK-Br3细胞胞浆内可见多少不等的蓝色铁颗粒,细胞内铁含量明显高于未转染ASODN探针的其他各组细胞(P均<0.01);MR扫描显示其信号强度最弱,信噪比值明显低于其他各组细胞(P均<0.05)。结论成功制备SPIO标记ASODN探针,该探针能有效进入SK-Br3细胞内,明显降低MR扫描下的转染细胞信号强度。 展开更多

关键词 磁共振成像 超顺磁氧化铁 反义寡脱氧核苷酸 靶向对比剂

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血管内皮生长因子反义寡脱氧核苷酸联合血管生成素-1对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜血管渗漏及新生血管生成的影响 被引量：8

6

作者 曾莉 常以力 邵毅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第10期905-908,共4页

目的观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)联合血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠视网膜血管渗漏及新生血管生成的影响。方法选取健... 目的观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)联合血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠视网膜血管渗漏及新生血管生成的影响。方法选取健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组(A组)5只和糖尿病组55只,糖尿病组通过链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型成功后再饲养3个月行眼底荧光血管造影检查,确定DR大鼠模型且视网膜病变程度相仿的大鼠,随机抽取45只分为DR对照组(B组,5只)、PBS缓冲液对照组(C组,10只)、VEGFASODN干预组(D组,10只)、Ang-1干预组(E组,10只)、联合干预组(F组,10只)。C组玻璃体内注射PBS缓冲液5μL;D组玻璃体内注射浓度为100μmol·L-1VEGFASODN5μL;E组玻璃体内注射浓度为160mg·L-1Ang-15μL;F组玻璃体内注射100μmol·L-1VEGFASODN及160mg·L-1Ang-1各5μL;3d后再次行上述操作。各组大鼠行眼底荧光血管造影检查,对比观察不同组别大鼠视网膜血管渗漏情况,病理组织切片光学显微镜下突破内界膜的观察视网膜新生血管芽细胞核数。结果 A、B、C、D、E和F组视网膜新生血管渗漏面积分别为0、(20.98±1.14)mm2、(21.47±1.65)mm2、(14.60±1.55)mm2、(13.80±1.19)mm2、(10.81±1.35)mm2;D、E、F组新生血管渗漏面积低于B、C组,差异有统计学意义(F=103.99,P<0.05);F组渗漏面积低于D、E组,差异有统计学意义(F=190.94,P<0.05);B组与C组之间差异无统计学意义(t=0.22,P>0.05)。A、B、C、D、E和F组突破内界膜的新生血管芽细胞核数分别为(1.13±0.31)个、(80.31±5.21)个、(81.08±2.57)个、(37.37±3.41)个、(41.07±2.09)个、(14.41±1.23)个;D、E、F组突破内界膜的血管芽细胞核数均低于B、C组,差异有统计学意义(F=1339.41,P<0.05);F组突破内界膜的血管芽细胞核数低于D、E组,差异有统计学意义(F=714.91,P<0.05);B组与C组之间差异无统计学意义(t=0.35,P>0.05)。结论 VEGF ASODN联合Ang-1玻璃体内注射能明显抑DR大鼠视网膜新生血管的生成,减少视网膜血管渗漏。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 血管内皮生长因子 反义寡脱氧核苷酸 血管生成素-1

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PCNA反义寡脱氧核苷酸对牛晶状体上皮细胞体外增殖活性的影响 被引量：5

7

作者 翁景宁 博士生 张惠蓉 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期199-201,共3页

目的使用增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸（ＰＣＮＡ ＡＳＯＤＮ）作用于牛晶状体上皮细胞，观察其对细胞增殖活性的影响，以探讨ＰＣＮＡ ＡＳＯＤＮ技术防治后发性白内障形成的新途径。方法应用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测细胞增殖活性，... 目的使用增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸（ＰＣＮＡ ＡＳＯＤＮ）作用于牛晶状体上皮细胞，观察其对细胞增殖活性的影响，以探讨ＰＣＮＡ ＡＳＯＤＮ技术防治后发性白内障形成的新途径。方法应用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测细胞增殖活性，用流式细胞仪检测晶状体上皮细胞 ＰＣＮＡ蛋白的表达。结果 ＰＣＮＡ ＡＳＯＤＮ ３０～５０ μｍｏｌ／Ｌ可使细胞增殖显著受抑制，其 ＣＰＭ值分别从对照组的 ６ ６９９． ６７下降为 ５ ９８６． ３３，５ ５２５． ３３和 ５ １５４． ６７，ＰＣＮＡ蛋白在晶状体上皮细胞的表达阳性率下调至１２．３２％，与对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＰＣＮＡ ＳＯＤＮ组则作用不明显，与对照组比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而ＰＣＮＡ　ＡＳＯＤＮ组与ＰＣＮＡ　ＳＯＤＮ组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。结论ＰＣＮＡ　ＡＳＯＤＮ可以显著抑制牛晶状体上皮细胞体外增殖活性，其抑制作用可能通过阻断ＰＣＮＡ ｍＲＮＡ的翻译过程而影响 ＰＣＮＡ蛋白表达。 展开更多

关键词 晶状体上皮细胞 增殖细胞核抗原 反义寡脱氧核苷酸

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纳米微粒介导反义寡脱氧核苷酸逆转乳腺癌细胞多药耐药的实验研究 被引量：1

8

作者 彭志平 李少林 +3 位作者 文明 蒋明东 段红 王树斌 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期498-501,共4页

目的探讨纳米微粒介导耐药基因mdr-1、mrp反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)转染对多药耐药乳腺癌MCF-7/ADR细胞的影响。方法采用纳米微粒介导mdr-1、mrp-ASODN转染耐药细胞株MCF-7/ADR,RT-PCR、Western blot检... 目的探讨纳米微粒介导耐药基因mdr-1、mrp反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)转染对多药耐药乳腺癌MCF-7/ADR细胞的影响。方法采用纳米微粒介导mdr-1、mrp-ASODN转染耐药细胞株MCF-7/ADR,RT-PCR、Western blot检测转染48h后细胞耐药基因mdr-1、mrp的表达;MTT法检测经转染后MCF-7/ADR细胞对阿霉素(ADR)、表柔比星(epirubicin)、5-氟脲嘧啶(5-FU)和紫杉醇(paclitaxel)的敏感性。结果纳米微粒介导mdr-1、mrpASODN转染48h后,MCF-7/ADR细胞的mdr-1、mrp在mRNA和蛋白质表达水平上均显著降低(P<0.05);细胞对ADR、表柔比星、5-氟脲嘧啶和紫杉醇的耐药指数均显著降低(P<0.05)。结论耐药基因反义寡脱氧核苷酸能在体外抑制耐药基因的表达,从而提高细胞的药物敏感性;纳米微粒具有较好的体外介导反义寡脱氧核苷酸转染效果。 展开更多

关键词 乳腺癌 多药耐药 反义寡脱氧核苷酸 纳米微粒

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K-ras基因点突变的反义寡脱氧核苷酸对人胰腺癌靶基因表达的抑制作用 被引量：1

9

作者 陈熹 王永向 +2 位作者 纪宗正 高亮 南克俊 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期147-149,共3页

目的　观察针对于胰腺癌K ras基因点突变的反义寡核苷酸对靶基因表达的抑制作用。方法　脂质体将人工合成的针对于K ras基因第 12位密码子点突变的反义寡核苷酸转染体外培养的人胰腺癌细胞株PC 2 ,用免疫组化和原位杂交技术检测靶基因... 目的　观察针对于胰腺癌K ras基因点突变的反义寡核苷酸对靶基因表达的抑制作用。方法　脂质体将人工合成的针对于K ras基因第 12位密码子点突变的反义寡核苷酸转染体外培养的人胰腺癌细胞株PC 2 ,用免疫组化和原位杂交技术检测靶基因的表达。结果　转染 4 8h后 ,反义寡核苷酸作用组胰腺癌细胞株PC 2的ras蛋白和K rasmRNA的表达程度较正义组和对照组均明显降低 (P <0 .0 5 )。结论　针对于K ras基因点突变的反义寡核苷酸作用于体外培养的胰腺癌细胞 。 展开更多

关键词 K—ras基因 反义寡脱氧核苷酸 胰腺癌 靶基因表达 抑制作用 基因突变

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反义寡脱氧核苷酸及卵泡刺激素对卵巢黏液性囊腺癌细胞增殖细胞核抗原表达的影响 被引量：1

10

作者 李双 王林 +1 位作者 刘合芳 朱长虹 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期68-70,共3页

目的观察卵泡刺激素受体(FSHR)反义寡脱氧核苷酸(antisense ODN)及卵泡刺激素(FSH)对体外培养人卵巢黏液性囊腺癌(OMC)细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法OMC细胞与不同浓度的FSH、antisenseODN和无义ODN(nonsense ODN)共培育48... 目的观察卵泡刺激素受体(FSHR)反义寡脱氧核苷酸(antisense ODN)及卵泡刺激素(FSH)对体外培养人卵巢黏液性囊腺癌(OMC)细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法OMC细胞与不同浓度的FSH、antisenseODN和无义ODN(nonsense ODN)共培育48、72 h后,采用免疫细胞化学SP法检测细胞核内PCNA的表达。结果FSH明显增强PCNA的表达,而antisense ODN则显著降低PCNA的表达,与对照组比较,差异均有显著性意义(均P<0.05或P<0.01);应用nonsense ODN未观察到其对PCNA表达的影响。同时,antisense ODN可明显拮抗FSH促PCNA表达增加的作用,差异有极显著性意义(P<0.01)。结论在OMC发展过程中,FSH具有一定的促进作用,anti-sense ODN可有效抑制癌细胞的增殖以及FSH的促增殖作用。 展开更多

关键词 卵泡刺激素 卵泡刺激素受体 反义寡脱氧核苷酸 卵巢肿瘤 增殖细胞核抗原

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c-myc反义寡脱氧核苷酸诱导人髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡 被引量：7

11

作者 刘庭波 吕联煌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期34-38,共5页

为研究c myc硫代反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系HL 60诱导细胞凋亡的作用 ,将人工合成的长度分别为 18mer和 15mer的硫代反义寡脱氧核苷酸 (AspoⅠ和AspoⅡ )转染HL 60细胞 ,用流式细胞术检测c Myc蛋白及DNA倍体分析 ,RT PCR检测c mycm... 为研究c myc硫代反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系HL 60诱导细胞凋亡的作用 ,将人工合成的长度分别为 18mer和 15mer的硫代反义寡脱氧核苷酸 (AspoⅠ和AspoⅡ )转染HL 60细胞 ,用流式细胞术检测c Myc蛋白及DNA倍体分析 ,RT PCR检测c mycmRNA水平 ,电镜观察凋亡细胞的超微结构 ,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA降解片段。研究结果发现 ,经AspoⅠ 5 μmol L和 10 μmol L作用后c Myc蛋白分别降低 2 3.8%和 4 5 .4 % ,经AspoⅡ 10 μmol L作用后下降38.4 % ,RT PCR显示AspoⅠ和AspoⅡ组c mycmRNA表达明显减少。DNA倍体分析AspoⅠ 10μmol L作用 4 8和 72小时细胞凋亡率分别为 2 3.97%和 5 2 .6% ;AspoⅡ 10 μmol L作用 4 8和 72小时后细胞凋亡率分别为 2 8.8%和 4 5 .19% ;而空白对照和正义寡脱氧核苷酸组均未出现凋亡细胞。电镜观察两个反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用后均出现细胞固缩 ,染色质边集 ,胞浆浓缩等凋亡细胞的改变。反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用 4 8小时后均出现典型的DNA降解片段。本研究结果说明 ,c myc反义寡脱氧核苷酸是高特异性的基因药物 ,对HL 60细胞抑制c mycmRNA的表达 ,减少c Myc蛋白合成 ,并诱导HL 展开更多

关键词 反义寡脱氧核苷酸 C-MYC 癌基因 细胞凋亡 HL-60细胞 人髓系白血病细胞系

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针对c-myc mRNA两个不同位点的c-myc反义寡脱氧核苷酸抑制类风湿滑膜细胞增殖的比较

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作者 赵欣欣 赵丽娟 肖卫国 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期451-453,共3页

目的:研究针对c-myc mRNA不同位点的两种反义寡脱氧核苷酸序列(AS-ODN):myc-AUG AS-ODN,myc-CRD AS-ODN,对类风湿滑膜细胞增殖的抑制作用。方法:培养人类风湿滑膜B型细胞,合成反义寡脱氧核苷酸序列并进行硫代磷酸化修饰,以脂质体L ipofe... 目的:研究针对c-myc mRNA不同位点的两种反义寡脱氧核苷酸序列(AS-ODN):myc-AUG AS-ODN,myc-CRD AS-ODN,对类风湿滑膜细胞增殖的抑制作用。方法:培养人类风湿滑膜B型细胞,合成反义寡脱氧核苷酸序列并进行硫代磷酸化修饰,以脂质体L ipofectin为载体,转染滑膜细胞,用MTT法检测细胞的增殖情况。结果:myc-AUG AS-ODN,myc-CRD AS-ODN均能抑制滑膜细胞增殖,使细胞数目减少的最大值分别为40.0%和41.4%。myc-AUG AS-ODN抑制滑膜细胞增殖的起效时间早于myc-CRD AS-ODN。在高浓度时寡脱氧核苷酸具有非序列特异性细胞毒作用。结论:两种AS-ODN序列均可用于抑制滑膜细胞增殖。 展开更多

关键词 类风湿 滑膜 反义寡脱氧核苷酸

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原位杂交技术检测增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸对BIU-87细胞体外增殖的影响

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作者 袁敬东 曾甫清 鲁功成 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期425-427,共3页

运用原位杂交技术检测脂质体介导增殖细胞核抗原 ( PCNA)反义寡脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞 BIU- 87PCNA m RNA的表达水平。结果表明脂质体介导 PCNA反义寡脱氧核苷酸处理组中 BIU- 87细胞 PCNA m RNA的表达水平明显低于对照组。结果提... 运用原位杂交技术检测脂质体介导增殖细胞核抗原 ( PCNA)反义寡脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞 BIU- 87PCNA m RNA的表达水平。结果表明脂质体介导 PCNA反义寡脱氧核苷酸处理组中 BIU- 87细胞 PCNA m RNA的表达水平明显低于对照组。结果提示脂质体介导 PCNA反义寡脱氧核苷酸可抑制人膀胱癌细胞 BIU- 87体外增殖活性 ,其抑制作用可通过阻断 PCNA蛋白表达来实现。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 增殖细胞核抗原 反义寡脱氧核苷酸 原位杂交 膀胱癌

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硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响

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作者 何永文 边莉 梁新华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期112-114,共3页

目的　探讨硫代反义Bcl_xL寡脱氧核苷酸 (AS_sODN)对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响。方法　以脂质体Lipofectin为载体 ,转染AS_sODN于BcaCD885细胞内 ,倒置显微镜观察细胞形态学改变 ,TUNEL原位末端标记检测细胞凋亡 ,流式细胞... 目的　探讨硫代反义Bcl_xL寡脱氧核苷酸 (AS_sODN)对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响。方法　以脂质体Lipofectin为载体 ,转染AS_sODN于BcaCD885细胞内 ,倒置显微镜观察细胞形态学改变 ,TUNEL原位末端标记检测细胞凋亡 ,流式细胞技术 (FCM)测定细胞凋亡率及Bcl_xL蛋白表达水平 ;转染AS_sODN于BcaCD885细胞内 ,再以 4 3℃ ,4 0min加热细胞 ,FCM检测细胞凋亡率。结果　AS_sODN转染后 ,BcaCD885颊癌细胞出现皱缩、呈浮起状 ,TUNEL原位末端标记阳性 ,Bcl_xL蛋白表达明显下降 (P <0 0 5 ) ,热诱导细胞凋亡率明显提高 (P <0 0 5 )。结论　硫代反义Bcl_xL寡脱氧核苷酸能诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡并能提高其热敏感性。 展开更多

关键词 硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸 AS-sODN BcaCD885颊癌 癌细胞 细胞凋亡 热敏感性 细胞培养

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细胞周期蛋白D3反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系CEM的生长抑制作用

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作者 李静 张乐萍 殷慧君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期47-50,共4页

为了研究细胞周期蛋白D3(cyclin D3)过度表达在白血病细胞增殖和白血病发生中所起的作用,选用过度表达cyclin D3的人T细胞白血病细胞系CEM,利用cyclin D3特异的反义寡脱氧核苷酸作用于CEM细胞,观察对CEM细胞生长的影响。经流式细胞术检... 为了研究细胞周期蛋白D3(cyclin D3)过度表达在白血病细胞增殖和白血病发生中所起的作用,选用过度表达cyclin D3的人T细胞白血病细胞系CEM,利用cyclin D3特异的反义寡脱氧核苷酸作用于CEM细胞,观察对CEM细胞生长的影响。经流式细胞术检测,cyclinD3的表达水平明显下降,同时CEM细胞生长明显受到抑制,G_0/G_1期细胞所占比例增大。实验结果说明cyclin D3过度表达在促进白血病细胞增殖中起着重要作用。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白D3 反义寡脱氧核苷酸 白血病细胞 CEM细胞系 细胞增殖

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反义磷脂酰肌醇3-激酶寡脱氧核苷酸抑制白介素-1诱导的NF-κB活化

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作者 郭甫坤 李亦蕾 吴曙光 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2000年第4期443-445,共3页

目的　研究反义磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI 3 激酶 )寡脱氧核苷酸 (oligodeoxynucleotides,ODN)对核因子 κB(NF κB)活化的影响。方法　Lipofectin介导反义PI 3 激酶ODN转染HepG2细胞 ,以逆转录PCR法检测PI 3 激酶mRNA表达水平 ,用Sandwic... 目的　研究反义磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI 3 激酶 )寡脱氧核苷酸 (oligodeoxynucleotides,ODN)对核因子 κB(NF κB)活化的影响。方法　Lipofectin介导反义PI 3 激酶ODN转染HepG2细胞 ,以逆转录PCR法检测PI 3 激酶mRNA表达水平 ,用SandwichELISA法检测NF κB的活化。结果　(1)反义PI 3 激酶ODN抑制PI 3 激酶mRNA表达。 (2 )反义PI 3 激酶ODN呈剂量 (1～ 8μg)和时间 (5～ 2 4h)依赖性地抑制NF κB活化 ,2 μg反义PI 3 激酶ODN与细胞共孵育 8h时抑制效果最好。结论　反义PI 3 激酶ODN通过阻断PI 3 激酶表达抑制NF κB活化 ,预示反义PI 3 激酶ODN可潜在抑制IL 展开更多

关键词 反义磷脂酰肌醇3-激酶 寡脱氧核苷酸 NF-KB IL-1

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c-myb反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞HL-60的生物效应

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作者 吴岚军 王玉芝 刘秀英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期79-84,共6页

为了研究c-myb在髓系白血病细胞的增殖和分化中所起的调控作用,合成了与c-myb mRNA翻译起始区域互补的一段反义寡脱氧核苷酸(18bp),将其作用于白血病细胞系HL-60细胞,观察到细胞生长抑制率平均为55%。经过c-myb反义寡脱氧核苷酸片段作用... 为了研究c-myb在髓系白血病细胞的增殖和分化中所起的调控作用,合成了与c-myb mRNA翻译起始区域互补的一段反义寡脱氧核苷酸(18bp),将其作用于白血病细胞系HL-60细胞,观察到细胞生长抑制率平均为55%。经过c-myb反义寡脱氧核苷酸片段作用HL-60细胞,c-myb mRNA的表达不能被RT-PCR方法检测到,而在未加反义序列组和加随机序列组细胞中则能检测c-myb的表达。NBT染色后在Wright-Giemsa细胞涂片上可观察到未经处理和随机序列处理的95%HL-60细胞处于未分化阶段,经过c-myb反义寡脱氧核苷酸作用后的细胞中NBT阳性细胞占50％,部分细胞出现分化状态。 展开更多

关键词 C-MYB 原癌基因 反义寡脱氧核苷酸 HL-60细胞 细胞增殖 细胞分化

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反义寡脱氧核苷酸技术治疗慢性疼痛研究进展

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作者 汪涛 闵苏 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期171-173,共3页

关键词 神经阻滞治疗 反义寡脱氧核苷酸 慢性疼痛 临床应用效果 基因治疗 基因表达 小针刀疗法 药物疗法

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反义c-fos寡脱氧核苷酸对淋巴瘤细胞株SAC-IIB_2恶性表型抑制的研究 被引量：4

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作者 殷连华 孔宪寿 +1 位作者 严开平 郑颂国 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第1期58-60,共3页

已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,... 已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,同时降低其对裸鼠的致瘤性及Fos蛋白的表达,但对SAC-IIB_2的细胞动力学没有明显的影响.而正义和无义的c-fos寡脱氧核苷酸没有相应的作用.提示反义c-fos寡脱氧核苷酸能特异地抑制小鼠淋巴瘤SAC-IIB_2细胞的恶性表型. 展开更多

关键词 淋巴瘤 细胞株 c-fox 寡脱氧核苷酸 反义技术

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以阳离子脂质体为载体增强反义寡脱氧核苷酸作用的研究

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作者 王春红 孙秉中 袁跃传 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期236-238,共3页

反义核酸作为基因治疗的新方法,在近年来得到了迅速发展,其中反义寡脱氧核苷酸(ASODN)因制备客易而得到广泛的应用。然而,它的作用效率因细胞的低摄入及核酸酶的降解而受到影响。实验中采用以阳离子脂质体为载体的bcr-abl mRNA ASODN作... 反义核酸作为基因治疗的新方法,在近年来得到了迅速发展,其中反义寡脱氧核苷酸(ASODN)因制备客易而得到广泛的应用。然而,它的作用效率因细胞的低摄入及核酸酶的降解而受到影响。实验中采用以阳离子脂质体为载体的bcr-abl mRNA ASODN作用于K562细胞(CML细胞系)的方法,研究了阳离子脂质体所起的作用。结果表明,以阳离子脂质体介导转染ASODN增加了细胞对ASODN摄入量和抗核酸酶降解的能力。结论提示该方法为ASODN临床应用提供一条新的途径。 展开更多

关键词 反义寡脱氧核苷酸 阳离子脂质体 K562细胞

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