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单羧酸转运泵基因反义真核表达载体的构建被引量：7: 1; 作者成党校钱桂生黄桂君《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期807-809,共3页; 目的　构建单羧酸转运泵基因反义逆转录病毒真核表达载体。方法　应用RT PCR方法扩增带有双酶切位点的单羧酸转运泵目的基因片段 ,与带有相同酶切位点的pLXSN逆转录病毒真核表达载体粘末端进行反向基因插入连接 ,构建具有反义表达的逆... 展开更多; 关键词单羧酸转运泵肿瘤 MCT1基因反义真核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠谷氨酰胺酶反义真核表达载体的构建及鉴定被引量：3: 2; 作者刘宏鸣杨俊涛顾红光《医学研究生学报》 CAS 2003年第7期487-488,共2页; 目的 :构建大鼠谷氨酰胺酶 (GA)反义真核表达载体。　方法 :采用分子克隆技术将rGAcDNA反向克隆到真核表达载体pcDNA 3.0中。　结果 :EcoRⅠ和HinDⅢ双酶切后 ,反义重组基因为 0 .2 8kb和 5 .4kb两条带 ,与理论计算相符。　结论 :成功... 展开更多; 关键词谷氨酰胺酶反义真核表达载体大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

促血管生成素2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响: 3; 作者曾松王继见朱鹏《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期505-511,共7页; 目的:探讨促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系;观察反义Ang2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响。方法:用Western blot法检测Ang2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中的表达,用免疫... 展开更多; 关键词新生血管形成促血管生成素2 反义真核表达载体人胃癌细胞株基因转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

反义促血管生成素2基因稳定转染对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的抑制作用: 4; 作者陈雷朱鹏《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期497-501,共5页; 目的:观察以pEGFP-N1为载体的促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)反义基因转染的人胃癌细胞SGC-7901中Ang2蛋白的表达,研究其对人胃癌细胞体外生长的抑制作用。方法:应用重组质粒转染反义Ang2的pEGFP-N1载体(pEGFP-N1-anti Ang2)、pEGFP... 展开更多; 关键词人类反义真核表达载体促血管生成素2 基因转染凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名单羧酸转运泵基因反义真核表达载体的构建被引量：7: 1; 作者成党校钱桂生黄桂君; 机构第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期807-809,共3页; 基金国家自然科学基金!资助项目 ( 3990 0 0 67); 文摘目的　构建单羧酸转运泵基因反义逆转录病毒真核表达载体。方法　应用RT PCR方法扩增带有双酶切位点的单羧酸转运泵目的基因片段 ,与带有相同酶切位点的pLXSN逆转录病毒真核表达载体粘末端进行反向基因插入连接 ,构建具有反义表达的逆转录病毒载体。结果　构建载体进行双酶切电泳分析及插入片段基因序列分析 ,证明反义载体构建成功。结论　应用RT PCR方法扩增插入DNA片段 ,简单、灵活、快捷。双酶切定向连接构建反义表达载体可实现构建一步到位 ,免去正反向筛选的麻烦。; 关键词单羧酸转运泵肿瘤 MCT1基因反义真核表达载体; 分类号 R730.51 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠谷氨酰胺酶反义真核表达载体的构建及鉴定被引量：3: 2; 作者刘宏鸣杨俊涛顾红光; 机构第三军医大学大坪医院肝胆外科; 出处《医学研究生学报》 CAS 2003年第7期487-488,共2页; 文摘目的 :构建大鼠谷氨酰胺酶 (GA)反义真核表达载体。　方法 :采用分子克隆技术将rGAcDNA反向克隆到真核表达载体pcDNA 3.0中。　结果 :EcoRⅠ和HinDⅢ双酶切后 ,反义重组基因为 0 .2 8kb和 5 .4kb两条带 ,与理论计算相符。　结论 :成功构建了大鼠GA反义真核表达载体。; 关键词谷氨酰胺酶反义真核表达载体大鼠; Keywords Glutaminase Antisense eukaryotic expression vector Rat; 分类号 Q517 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名促血管生成素2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响: 3; 作者曾松王继见朱鹏; 机构重庆医科大学附属第二医院胃肠外科; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期505-511,共7页; 基金重庆医科大学科研创新基金资助项目(编号:CX200503); 文摘目的:探讨促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系;观察反义Ang2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响。方法:用Western blot法检测Ang2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中的表达,用免疫组化法检测53例不同病理分期的胃癌组织中Ang2蛋白的表达;应用脂质体转染法将既往实验合成[1]的pEGFP-N1-anti Ang2转染体外培养的人胃癌细胞SGC-7901,以空载体(pEGFP-N1)转染组和未转染组作对照,RT-PCR及免疫组化检测转染后Ang2基因及蛋白的表达,MTT法和流氏细胞仪(flow cytometry,FCM)检测反义Ang2基因转染对细胞生长和细胞凋亡的影响;分别用上述3组细胞注射于裸鼠皮下,对比观察肿瘤生成的速度和肿瘤组织中的血管生成数量。结果:Ang2蛋白在正常胃黏膜组织中不表达,在不同病理分期的胃癌组织中均呈阳性表达(F=166.76,P<0.000 1);RT-PCR及免疫组化显示反义Ang2基因转染组无Ang2 mRNA及Ang2蛋白的表达,MTT法检测显示反义Ang2基因转染组细胞体外增殖能力明显低于其他两组(F=10.39,P=0.002 4),FCM检测显示其活细胞比率明显低于其他两组(χ2=3 188.980 5,P<0.000 1);转染了反义Ang2基因的胃癌细胞成瘤速度较其它两组明显减慢[第6天(F=10.18,P=0.000 5)、第18天(F=7.80,P=0.002 1)及第30天(F=79.58,P<0.000 1)],肿瘤组织中血管生成的数量较其它两组明显减少[第1周(F=15.18,P<0.000 1)、第2周(F=3.50,P=0.044 4)、第3周(F=39.02,P<0.000 1)]。结论:胃癌组织中Ang2的表达与胃癌血管生成及胃癌侵袭能力密切相关;反义Ang2基因转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901中Ang2 mRNA及Ang2蛋白的表达,抑制其体外生长,促进其凋亡;并对其体外成瘤性及其新生血管的生成有明显的抑制作用。; 关键词新生血管形成促血管生成素2 反义真核表达载体人胃癌细胞株基因转染; Keywords angiogenesis angiopoietin2 antisense oligonucleotides cell line of human gastric carcinoma gene transfection; 分类号 R735.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反义促血管生成素2基因稳定转染对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的抑制作用: 4; 作者陈雷朱鹏; 机构重庆医科大学附属第二医院普外科; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期497-501,共5页; 基金重庆市科委自然科学基金资助项目(编号:CSTC2011JJA0623) 重庆医科大学科研创新基金资助项目(编号:CX200503); 文摘目的:观察以pEGFP-N1为载体的促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)反义基因转染的人胃癌细胞SGC-7901中Ang2蛋白的表达,研究其对人胃癌细胞体外生长的抑制作用。方法:应用重组质粒转染反义Ang2的pEGFP-N1载体(pEGFP-N1-anti Ang2)、pEGFP-N1空载体质粒以脂质体转染法转染体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,经G418筛选抗性克隆,扩大培养后,应用RT-PCR技术与免疫组化法检测Ang2基因及其蛋白的表达,MTT法分析细胞生长抑制作用,AnnexinV-FITC和PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:RT-PCR与免疫组化均示pEGFP-N1-anti Ang2转染组无Ang2 mRNA及其Ang2蛋白的表达,MTT检测表明pEGFP-N1-anti Ang2转染组活细胞数较其它两组均低,差异有统计学意义(F=10.39,P=0.002 4),流式细胞仪检测则显示其凋亡率较其它两组明显增高,差异有统计学意义(χ2=3 188.98,P<0.000 1)。结论:pEGFP-N1-anti Ang2成功转染人胃癌细胞SGC-7901且可封闭Ang2 mRNA表达,使已转染pEGFP-N1-anti Ang2的人胃癌细胞Ang2蛋白的表达减少,并抑制人胃癌细胞的恶性表型。; 关键词人类反义真核表达载体促血管生成素2 基因转染凋亡; Keywords human antisense oligonuclertide angiopoietin2 gene transfection apoptosis; 分类号 R735.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	单羧酸转运泵基因反义真核表达载体的构建	成党校钱桂生黄桂君	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2000	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大鼠谷氨酰胺酶反义真核表达载体的构建及鉴定	刘宏鸣杨俊涛顾红光	《医学研究生学报》 CAS	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	促血管生成素2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响	曾松王继见朱鹏	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	反义促血管生成素2基因稳定转染对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的抑制作用	陈雷朱鹏	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料