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反义凝血酶受体和p21双基因共表达对损伤的大鼠颈总动脉的影响
1
作者
米立国
孟宪敏
+4 位作者
赵秀文
刘冬青
王学礼
吴小兵
丁金凤
《中国循环杂志》
CSCD
北大核心
2001年第5期385-388,共4页
目的 :观察反义凝血酶受体 (ATR)和 p2 1双基因治疗对WKY大鼠颈总动脉损伤后新生内膜的抑制效果 ,探寻基因治疗再狭窄的有效途径。 方法 :将 42只雄性WKY大鼠随机分成基因治疗组 (导入rAAV/AP组 ,n =18)、载体对照组 (导入rAAV/GFP组...
目的 :观察反义凝血酶受体 (ATR)和 p2 1双基因治疗对WKY大鼠颈总动脉损伤后新生内膜的抑制效果 ,探寻基因治疗再狭窄的有效途径。 方法 :将 42只雄性WKY大鼠随机分成基因治疗组 (导入rAAV/AP组 ,n =18)、载体对照组 (导入rAAV/GFP组 ,n =18)和正常对照组 (n =6 )。构建含有ATR和 p2 1双基因及含有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的腺病毒伴随病毒(AAV)载体pSNAV/AP和 pSNAV/GFP ,用重组单纯疱疹病毒 (rHSV )生产体系包装重组腺病毒伴随病毒 (rAAV ) :rAAV/AP和rAAV/GFP。将rAAV/AP或rAAV /GFP导入拉伤的WKY大鼠的颈总动脉。分别于术后 2、 4、 6周取材 ,用半定量—逆转录多聚酶链反应和免疫组织化学方法检测凝血酶受体 (TR)和 p2 1在动脉壁中的表达。图像分析和统计学检验双基因的疗效。 结果 :逆转录多聚酶链反应和免疫组织化学结果显示外源基因已导入血管壁的新生内膜和中膜并获得稳定表达。图像和统计学分析说明 :基因治疗后 2、 4和 6周 ,双基因治疗组 ( p2 1和ATR)的颈总动脉内膜厚度分别较载体对照组组内膜减少 5 9 2 %、 5 8 7%、 6 4 1%;中膜厚度分别减低 7 8%、 10 8%、 8 3%;中膜细胞密度减低 30 0 %、2 9 4 %、 2 6 2 %。 结论 :ATR和p2
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关键词
反义凝血酶受体基因
P21
基因
治疗
重组腺病毒
伴随病毒
冠心病
实验研究
血管成形术
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职称材料
反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用
被引量:
2
2
作者
孟宪敏
米立国
+4 位作者
赵秀文
曹慧青
刘冬青
高润霖
丁金凤
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期339-342,I001,共5页
目的观察携带反义凝血酶受体(ATR)或/和p21的单、双基因重组腺病毒伴随病毒(rAAV)载体对人主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖与凋亡的影响。方法以携带ATR或/和p21的单、双基因rAAV感染人ASMC。半定量RT-PCR检测各基因的整合与表达;MTT法测定...
目的观察携带反义凝血酶受体(ATR)或/和p21的单、双基因重组腺病毒伴随病毒(rAAV)载体对人主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖与凋亡的影响。方法以携带ATR或/和p21的单、双基因rAAV感染人ASMC。半定量RT-PCR检测各基因的整合与表达;MTT法测定感染不同时间点的细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期与凋亡细胞数目的变化;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测凋亡细胞的比率。结果单、双基因在ASMC中均获得整合,且双基因发生了共表达;病毒感染4d时,ATR组、p21组和AP双基因组的细胞存活率与对照组相比分别降低了16.7%、21.6%和29.4%;三组的G0/G1期细胞数分别为(61.8±2.9)%、(82.5±4.0)%和(80.4±6.1)%;凋亡细胞数为(4.8±0.5)%、(5.7±0.1)%和(9.2±0.9)%;AO/EB染色显示的凋亡细胞比率分别为:对照组(1.5±0.8)%、ATR组(7.2±3.3)%、p21组(10.7±5.6)%、AP组(18.3±2.7)%。结论(1)双基因共表达对抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用均较单基因具有较强的生物学效应。(2)为再狭窄的基因治疗提示了更优化的途径。
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关键词
细胞增殖
反义凝血酶受体基因
P21
基因
共表达
主动脉平滑肌细胞
再狭窄
细胞凋亡
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职称材料
题名
反义凝血酶受体和p21双基因共表达对损伤的大鼠颈总动脉的影响
1
作者
米立国
孟宪敏
赵秀文
刘冬青
王学礼
吴小兵
丁金凤
机构
中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院分子医学中心
河北医科大学
中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室
出处
《中国循环杂志》
CSCD
北大核心
2001年第5期385-388,共4页
基金
国家九五攻关项目(96 90 6 0 2 0 7)
国家自然科学基金(39970 2 97)资助
文摘
目的 :观察反义凝血酶受体 (ATR)和 p2 1双基因治疗对WKY大鼠颈总动脉损伤后新生内膜的抑制效果 ,探寻基因治疗再狭窄的有效途径。 方法 :将 42只雄性WKY大鼠随机分成基因治疗组 (导入rAAV/AP组 ,n =18)、载体对照组 (导入rAAV/GFP组 ,n =18)和正常对照组 (n =6 )。构建含有ATR和 p2 1双基因及含有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的腺病毒伴随病毒(AAV)载体pSNAV/AP和 pSNAV/GFP ,用重组单纯疱疹病毒 (rHSV )生产体系包装重组腺病毒伴随病毒 (rAAV ) :rAAV/AP和rAAV/GFP。将rAAV/AP或rAAV /GFP导入拉伤的WKY大鼠的颈总动脉。分别于术后 2、 4、 6周取材 ,用半定量—逆转录多聚酶链反应和免疫组织化学方法检测凝血酶受体 (TR)和 p2 1在动脉壁中的表达。图像分析和统计学检验双基因的疗效。 结果 :逆转录多聚酶链反应和免疫组织化学结果显示外源基因已导入血管壁的新生内膜和中膜并获得稳定表达。图像和统计学分析说明 :基因治疗后 2、 4和 6周 ,双基因治疗组 ( p2 1和ATR)的颈总动脉内膜厚度分别较载体对照组组内膜减少 5 9 2 %、 5 8 7%、 6 4 1%;中膜厚度分别减低 7 8%、 10 8%、 8 3%;中膜细胞密度减低 30 0 %、2 9 4 %、 2 6 2 %。 结论 :ATR和p2
关键词
反义凝血酶受体基因
P21
基因
治疗
重组腺病毒
伴随病毒
冠心病
实验研究
血管成形术
Keywords
Antisense thrombin receptor gene
p21
Gene therapy
Adeno-associated virus
WKY rat
分类号
R541.4 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用
被引量:
2
2
作者
孟宪敏
米立国
赵秀文
曹慧青
刘冬青
高润霖
丁金凤
机构
中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期339-342,I001,共5页
基金
国家"九五"攻关项目(96-906-02-07)
国家自然科学基金(39970297)资助~~
文摘
目的观察携带反义凝血酶受体(ATR)或/和p21的单、双基因重组腺病毒伴随病毒(rAAV)载体对人主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖与凋亡的影响。方法以携带ATR或/和p21的单、双基因rAAV感染人ASMC。半定量RT-PCR检测各基因的整合与表达;MTT法测定感染不同时间点的细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期与凋亡细胞数目的变化;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测凋亡细胞的比率。结果单、双基因在ASMC中均获得整合,且双基因发生了共表达;病毒感染4d时,ATR组、p21组和AP双基因组的细胞存活率与对照组相比分别降低了16.7%、21.6%和29.4%;三组的G0/G1期细胞数分别为(61.8±2.9)%、(82.5±4.0)%和(80.4±6.1)%;凋亡细胞数为(4.8±0.5)%、(5.7±0.1)%和(9.2±0.9)%;AO/EB染色显示的凋亡细胞比率分别为:对照组(1.5±0.8)%、ATR组(7.2±3.3)%、p21组(10.7±5.6)%、AP组(18.3±2.7)%。结论(1)双基因共表达对抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用均较单基因具有较强的生物学效应。(2)为再狭窄的基因治疗提示了更优化的途径。
关键词
细胞增殖
反义凝血酶受体基因
P21
基因
共表达
主动脉平滑肌细胞
再狭窄
细胞凋亡
Keywords
antisense thrombin receptor gene
p21gene
co-expression
aortic smooth muscle cells
restenosis
分类号
R654.306 [医药卫生—外科学]
R364.3 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反义凝血酶受体和p21双基因共表达对损伤的大鼠颈总动脉的影响
米立国
孟宪敏
赵秀文
刘冬青
王学礼
吴小兵
丁金凤
《中国循环杂志》
CSCD
北大核心
2001
0
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职称材料
2
反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用
孟宪敏
米立国
赵秀文
曹慧青
刘冬青
高润霖
丁金凤
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
2
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