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番木瓜β-Gal基因RNAi双T-DNA植物表达载体的构建及其遗传转化的初步研究被引量：2: 1; 作者何玮毅陈晓静 +2 位作者申艳红卢秉国潘东明《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期556-561,共6页; 克隆了番木瓜(Carica papaya L.)果肉的细胞壁水解关键酶β-半乳糖苷酶(β-GAL)基因保守区,将其反向重复插入载体pKANNIBAL,构建RNAi中间表达载体pKAN/RG,将其上的发夹结构取代经改造的载体pCAMBIA1300上hptⅡ基因,构建中间表达载体p130... 展开更多; 关键词番木瓜 Β-半乳糖苷酶 RNA干扰双T—DNA植物表达载体遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

双T-DNA反式串联植物表达载体构建与验证: 2; 作者胡太蛟冯庆玲 +1 位作者潘大仁王锋《福建农业学报》 CAS 2013年第3期195-200,共6页; 通过对双T-DNA串联结构的改变,构建2个双T-DNA反式串联的植物表达载体p1300-DMAR-LF-GCMSAGS和p1300-DMAR-LF-GLCMSAGS。经过转化水稻后验证,结果表明:能够获得无选择标记基因的转基因植株;与顺式串联植物表达载体比较,反式串联的植物... 展开更多; 关键词双t-dna 反式串联植物表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

CMO,BADH双基因植物表达载体的构建被引量：1: 3; 作者何宇锋刘君 +1 位作者韩烈保陈其军《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第5期63-66,共4页; 以pC1303质粒和pC1391质粒为基础,利用载体pBIUC和pBIB构建了分别有Ubi启动子、35S启动子调控的带有控制甜菜碱合成的CMO和BADH的植物表达载体pC1303-Ubi-CMO-35S-BADH,为进一步开展提高植物抗逆性基因工程提供了基础。; 关键词双基因表达载体甜菜碱 CMO BADH 植物表达载体 BADH 基因工程 CMO 构建 35S启动子植物抗逆性甜菜碱基础; 在线阅读下载PDF 职称材料

番木瓜β-Gal基因的克隆分析与植物表达载体构建被引量：1: 4; 作者何玮毅陈晓静 +1 位作者申艳红卢秉国《热带作物学报》 CSCD 2010年第2期217-223,共7页; 番木瓜果实采后贮藏期间的迅速软化与β-Gal基因的表达密切相关。利用常规PCR结合反向PCR技术,分离了一条4501bp的番木瓜β-Gal基因组序列。其共含有17个内含子,外显子部分与相应的cDNA序列只有1个碱基的差异。生物信息学分析结果表明,... 展开更多; 关键词番木瓜 Β-半乳糖苷酶果实特异性启动子双t-dna植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于phy基因的双边界植物表达载体构建: 5; 作者赵鄢鹏李杰 +4 位作者刘琦夏善勇吴立成王秀君李希臣《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期394-397,共4页; 采用同源克隆方法从泡盛曲霉中克隆了1515bp的植酸酶基因,与黑曲霉(A.niger963)phyA2的核苷酸同源性为95%。以植物表达载体pTTBUG8为基础,构建了由35S启动子调控、具有磷高效利用功能基因(phy)的双边界植物表达载体pBSP。解决了bar基因... 展开更多; 关键词 phy基因 BAR基因双边界植物表达载体安全性; 在线阅读下载PDF 职称材料

eGfp/Gus融合基因植物表达载体的构建和转化验证被引量：4: 6; 作者吴学龙何海燕 +1 位作者刘智宏黄锐之《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期645-650,共6页; 绿色荧光蛋白(Gfp)基因和葡萄糖醛酸糖苷酶(Gus)基因是广泛应用的2个报告基因,在定性和定量研究基因表达和启动子功能等方面各有优劣。为联合使用这2个报告基因,根据报告基因序列设计2对带有特异限制性内切酶位点的引物,PCR法分别扩增... 展开更多; 关键词 eGfp/Gus双报告基因植物表达载体瞬时表达转基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

冷相关转录因子CBF2基因的克隆及其植物表达载体的构建被引量：2: 7; 作者刘俊蔡平钟 +4 位作者马林张志雄向跃武王闵霞张志勇《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期428-432,共5页; 从拟南芥Columbia基因组DNA中分别克隆了CBF2基因和低温诱导型启动子Rd29A。测序结果显示:克隆的CBF2基因长725 bp,编码216个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸同源性为99.8%;启动子Rd29A全长为956 bp,与已报道的该启动子序... 展开更多; 关键词 CBF2 启动子克隆双酶切植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

无选择标记的高光效基因植物表达载体的构建被引量：2: 8; 作者刘峰许明 +2 位作者陈福禄郑回勇郑金贵《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第2期270-272,共3页; 构建无选择标记的玉米高光效基因植物表达载体,旨在利用共转化系统获得无标记基因的高光效转基因植物.; 关键词玉米高光效基因共转化系统表达载体无选择标记双质粒双农杆菌转基因植物; 在线阅读下载PDF 职称材料

木薯MeGWD3基因克隆及植物表达载体构建被引量：1: 9; 作者付莉莉韩冰莹 +2 位作者谭德冠孙雪飘张家明《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1057-1063,共7页; 【目的】克隆木薯葡聚糖水合双激酶(Me GWD3)基因并构建其植物表达载体,为开展木薯Me GWD3基因调控及功能研究提供参考。【方法】采用RT-PCR从木薯华南124(SC124)中克隆Me GWD3基因,对其进行序列分析,并将其连接至改造的p CAMBIA2300载... 展开更多; 关键词木薯葡聚糖水合双激酶克隆植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番木瓜β-Gal基因RNAi双T-DNA植物表达载体的构建及其遗传转化的初步研究被引量：2: 1; 作者何玮毅陈晓静申艳红卢秉国潘东明; 机构福建农林大学园艺学院福建农林大学园艺植物遗传育种研究所福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所; 出处《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期556-561,共6页; 基金福建省科技厅重点项目(2008N008) 福建省自然科学基金(B0610010)资助; 文摘克隆了番木瓜(Carica papaya L.)果肉的细胞壁水解关键酶β-半乳糖苷酶(β-GAL)基因保守区,将其反向重复插入载体pKANNIBAL,构建RNAi中间表达载体pKAN/RG,将其上的发夹结构取代经改造的载体pCAMBIA1300上hptⅡ基因,构建中间表达载体p1300-/MFRG,分离单T-DNA区段,与载体pCAMBIA2301构建RNAi双T-DNA植物表达载体p2301/TTRG。酶切分析和PCR检测表明,p2301/TTRG已被成功导入农杆菌EHA105。通过遗传转化,初步获得了GUS染色呈阳性且具Kan抗性的番木瓜胚性愈伤组织。; 关键词番木瓜 Β-半乳糖苷酶 RNA干扰双T—DNA植物表达载体遗传转化; Keywords Carica papaya L. β-galactosidase RNA interference Two t-dna plant expression vector Genetic transformation; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双T-DNA反式串联植物表达载体构建与验证: 2; 作者胡太蛟冯庆玲潘大仁王锋; 机构福建农林大学生命科学学院福建省农业科学院生物技术研究所; 出处《福建农业学报》 CAS 2013年第3期195-200,共6页; 基金国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08001-001); 文摘通过对双T-DNA串联结构的改变,构建2个双T-DNA反式串联的植物表达载体p1300-DMAR-LF-GCMSAGS和p1300-DMAR-LF-GLCMSAGS。经过转化水稻后验证,结果表明:能够获得无选择标记基因的转基因植株;与顺式串联植物表达载体比较,反式串联的植物表达载体成功地将非连锁共整合的频率分别由47.37%和45.83%提高到了55.81%和51.28%,提高无选择标记基因转基因植株的筛选效率。; 关键词双t-dna 反式串联植物表达; Keywords double t-dna trans-linked plant expression; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CMO,BADH双基因植物表达载体的构建被引量：1: 3; 作者何宇锋刘君韩烈保陈其军; 机构北京林业大学草坪研究所北京林业大学省部共建森林培育与保护教育部重点实验室中国农业大学; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第5期63-66,共4页; 基金国家转基因植物研究与产业化专项项目"抗干旱耐盐碱基因工程黑麦草 +1 种基金国家863项目(2001AA244082)资助; 文摘以pC1303质粒和pC1391质粒为基础,利用载体pBIUC和pBIB构建了分别有Ubi启动子、35S启动子调控的带有控制甜菜碱合成的CMO和BADH的植物表达载体pC1303-Ubi-CMO-35S-BADH,为进一步开展提高植物抗逆性基因工程提供了基础。; 关键词双基因表达载体甜菜碱 CMO BADH 植物表达载体 BADH 基因工程 CMO 构建 35S启动子植物抗逆性甜菜碱基础; Keywords Double gene expression vector Lycine CMO BADH; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学] S512.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番木瓜β-Gal基因的克隆分析与植物表达载体构建被引量：1: 4; 作者何玮毅陈晓静申艳红卢秉国; 机构福建农林大学园艺学院福建农林大学园艺植物遗传育种研究所福建农林大学应用生态研究所; 出处《热带作物学报》 CSCD 2010年第2期217-223,共7页; 基金福建省科技厅重点项目(No.2008N0008) 福建省自然科学基金项目(No.B0610010)资助; 文摘番木瓜果实采后贮藏期间的迅速软化与β-Gal基因的表达密切相关。利用常规PCR结合反向PCR技术,分离了一条4501bp的番木瓜β-Gal基因组序列。其共含有17个内含子,外显子部分与相应的cDNA序列只有1个碱基的差异。生物信息学分析结果表明,该番木瓜β-GAL属于糖苷水解酶超级家族42中家族35的成员,在进化过程中与拟南芥的亲缘关系较近,与鳄梨和北美云杉则较远。同时,它还具有一段定位于胞外的信号肽,再次表明其可能参与了果肉细胞壁的降解和果实软化。进一步分离了β-Gal基因启动子,初步验证了其果实表达特异性。将该启动子替换载体p2301/TTRG上的CaMV 35S启动子,构建出RNAi-β-Gal双T-DNA植物表达载体。酶切分析和PCR检测结果表明,载体p2301/BPTTRG已被成功导入农杆菌,可用于后续的遗传转化研究。; 关键词番木瓜 Β-半乳糖苷酶果实特异性启动子双t-dna植物表达载体; Keywords Carica papaya L. β-galactosidase fruit-specific promoter two-t-dna plant expression vector; 分类号 S667.9 [农业科学—果树学] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于phy基因的双边界植物表达载体构建: 5; 作者赵鄢鹏李杰刘琦夏善勇吴立成王秀君李希臣; 机构东北农业大学生命科学学院黑龙江省农业科学院生物技术研究所; 出处《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期394-397,共4页; 基金国家"十一五"转基因生物重大专项资助项目(2009ZX08004-005B); 文摘采用同源克隆方法从泡盛曲霉中克隆了1515bp的植酸酶基因,与黑曲霉(A.niger963)phyA2的核苷酸同源性为95%。以植物表达载体pTTBUG8为基础,构建了由35S启动子调控、具有磷高效利用功能基因(phy)的双边界植物表达载体pBSP。解决了bar基因及其产物PAT蛋白的安全性及产权等问题,并为植物养分高效利用基因工程研究奠定了重要基础。; 关键词 phy基因 BAR基因双边界植物表达载体安全性; Keywords phy gene bar gene Plant expression vectors containing two t-dnas Security; 分类号 S565.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名eGfp/Gus融合基因植物表达载体的构建和转化验证被引量：4: 6; 作者吴学龙何海燕刘智宏黄锐之; 机构浙江省植物基因工程代谢重点实验室浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所; 出处《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期645-650,共6页; 基金 "863"研究计划(2008AA02Z103) 浙江省自然科学基金项目(Y306097); 文摘绿色荧光蛋白(Gfp)基因和葡萄糖醛酸糖苷酶(Gus)基因是广泛应用的2个报告基因,在定性和定量研究基因表达和启动子功能等方面各有优劣。为联合使用这2个报告基因,根据报告基因序列设计2对带有特异限制性内切酶位点的引物,PCR法分别扩增增强型Gfp(eGfp)和Gus基因,连接到植物表达载体pF-GC5941中,构建含CaMV35S启动子驱动的eGfp/Gus基因融合表达载体,命名为pFGC-DR。注射农杆菌法转化烟草叶片,以及花器官农杆菌浸泡法转化拟南芥,发现融合基因成功地在烟草叶片中瞬时表达和在拟南芥中稳定表达,表明融合报告基因在烟草和拟南芥中都能高效表达。; 关键词 eGfp/Gus双报告基因植物表达载体瞬时表达转基因表达; Keywords eGfp/Gus dual reporter gene plant expression vector transient expression transgenic plants; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名冷相关转录因子CBF2基因的克隆及其植物表达载体的构建被引量：2: 7; 作者刘俊蔡平钟马林张志雄向跃武王闵霞张志勇; 机构西南科技大学生命科学与工程学院四川省农业科学院生物技术核技术研究所; 出处《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期428-432,共5页; 基金四川省农业科学院重点研究项目“主要农作物优质、抗逆基因克隆与利用研究”(2006-2010) “利用生物信息学克隆水稻生长激素及其结合蛋白基因的研究”; 文摘从拟南芥Columbia基因组DNA中分别克隆了CBF2基因和低温诱导型启动子Rd29A。测序结果显示:克隆的CBF2基因长725 bp,编码216个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸同源性为99.8%;启动子Rd29A全长为956 bp,与已报道的该启动子序列比较,其核苷酸同源性为99.5%。以双元载体pCAMBIA1301为基础,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-CBF2,为利用CBF2基因提高植物的耐寒性创造了条件。; 关键词 CBF2 启动子克隆双酶切植物表达载体; Keywords C-repeat binding factor 2 Promoter Clone Double digestion Plant expression vector; 分类号 S637 [农业科学—蔬菜学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名无选择标记的高光效基因植物表达载体的构建被引量：2: 8; 作者刘峰许明陈福禄郑回勇郑金贵; 机构福建农林大学生命科学学院; 出处《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第2期270-272,共3页; 基金福建省科技厅资助项目(2001Z012).; 文摘构建无选择标记的玉米高光效基因植物表达载体,旨在利用共转化系统获得无标记基因的高光效转基因植物.; 关键词玉米高光效基因共转化系统表达载体无选择标记双质粒双农杆菌转基因植物; Keywords selectable marker-free PEPC gene expression vector; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学] S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名木薯MeGWD3基因克隆及植物表达载体构建被引量：1: 9; 作者付莉莉韩冰莹谭德冠孙雪飘张家明; 机构中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1057-1063,共7页; 基金海南省自然科学基金项目(314123); 文摘【目的】克隆木薯葡聚糖水合双激酶(Me GWD3)基因并构建其植物表达载体,为开展木薯Me GWD3基因调控及功能研究提供参考。【方法】采用RT-PCR从木薯华南124(SC124)中克隆Me GWD3基因,对其进行序列分析,并将其连接至改造的p CAMBIA2300载体,构建植物表达载体p CAMBIA2300-Me GWD3。【结果】Me GWD3基因全长3522 bp,编码1173个氨基酸。经序列比对,发现Me GWD3基因序列与木薯Phytozome数据库中公布的GWD基因(cassava4.1_000497m)只存在2个碱基差异,同源性高达99.94%;与NCBI数据库中收录的木薯GWD基因(JN618460)同源性高达99.00%,与蓖麻GWD基因(XM_002518566)同源性达86.00%;成功构建植物表达载体p CAMBIA2300-Me GWD3。【结论】成功构建的植物表达载体p CAMBIA2300可用于Me GWD3基因功能及木薯淀粉代谢研究。; 关键词木薯葡聚糖水合双激酶克隆植物表达载体; Keywords cassava glucan water dikinase clone plant expression vector; 分类号 S533 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	番木瓜β-Gal基因RNAi双T-DNA植物表达载体的构建及其遗传转化的初步研究	何玮毅陈晓静申艳红卢秉国潘东明	《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	双T-DNA反式串联植物表达载体构建与验证	胡太蛟冯庆玲潘大仁王锋	《福建农业学报》 CAS	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	CMO,BADH双基因植物表达载体的构建	何宇锋刘君韩烈保陈其军	《生物技术通报》 CAS CSCD	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	番木瓜β-Gal基因的克隆分析与植物表达载体构建	何玮毅陈晓静申艳红卢秉国	《热带作物学报》 CSCD	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	基于phy基因的双边界植物表达载体构建	赵鄢鹏李杰刘琦夏善勇吴立成王秀君李希臣	《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	eGfp/Gus融合基因植物表达载体的构建和转化验证	吴学龙何海燕刘智宏黄锐之	《浙江农业学报》 CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	冷相关转录因子CBF2基因的克隆及其植物表达载体的构建	刘俊蔡平钟马林张志雄向跃武王闵霞张志勇	《西南农业学报》 CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	无选择标记的高光效基因植物表达载体的构建	刘峰许明陈福禄郑回勇郑金贵	《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
9	木薯MeGWD3基因克隆及植物表达载体构建	付莉莉韩冰莹谭德冠孙雪飘张家明	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料