检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白: 1; 作者吴坤鑫武亚丹 +4 位作者张春微刘志昕王健华余乃通张秀春《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1367-1372,共6页; CRSPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行有效定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的方向。本研究在双链结合蛋白(ds RNA-binding protein,DRB)DRB3和DRB5两个基因外显子的保守序列设计2个靶点,并构建与t RNA串联的双靶点CRISPR/Cas9... 展开更多; 关键词 CRISPR/Cas9 基因编辑拟南芥双链结合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

番茄双链RNA绑定蛋白(SlDRB)基因家族鉴定及抗TYLCV防御反应分析: 2; 作者黄鑫方远鹏 +3 位作者岳宁波张龙吴丹李云洲《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期291-301,共11页; 番茄生产是现代蔬菜生产的主导产业,因经济价值高,成为乡村振兴的优势产业。然而番茄生产大多面临番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)和其他病毒的严重威胁。最新研究发现双链RNA结合蛋白(DRB)在植物RNA干扰(RNAi)抗病毒通路中发挥重要作用。为探... 展开更多; 关键词番茄抗病毒双链RNA结合蛋白(DRB) 生物信息学表达分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

Taq DNA聚合酶的分子改造及其在探针法qPCR直扩体系中的应用被引量：1: 3; 作者胡松青袁家惠 +1 位作者刘光毅侯轶《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期8-16,共9页; Taq DNA聚合酶作为实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术的核心组分,其性能优劣直接影响qPCR技术的进一步发展。然而,野生型Taq DNA聚合酶的耐抑制剂性能差、延伸性能不足。为获得具有高性能的Taq DNA聚合酶,采用基因工程技术将双链DN... 展开更多; 关键词 Taq DNA聚合酶双链DNA结合蛋白耐受性聚合酶链式反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

莱茵衣藻CrDRBs基因的克隆和生物信息学分析被引量：1: 4; 作者娄素琳林鑫 +2 位作者黄思敏李辉胡章立《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期523-528,共6页; 双链核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)结合蛋白(double-stranded RNA-binding protein,DRB)是一类含有双链RNA结合结构域(dsRBD)的蛋白,在小核糖核酸(micro ribonucleic acid,microRNA或miRNA)的生物合成和作用方式选择方面起着重要作用... 展开更多; 关键词分子生物学水生生物学莱茵衣藻微小RNA 双链RNA结合蛋白基因克隆蛋白结构; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白: 1; 作者吴坤鑫武亚丹张春微刘志昕王健华余乃通张秀春; 机构中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南大学热带农林学院; 出处《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1367-1372,共6页; 基金国家自然科学基金项目(No.31570145 No.31461143016); 文摘 CRSPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行有效定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的方向。本研究在双链结合蛋白(ds RNA-binding protein,DRB)DRB3和DRB5两个基因外显子的保守序列设计2个靶点,并构建与t RNA串联的双靶点CRISPR/Cas9表达载体。通过一次转化,获得了DRB3或DRB5单独被编辑或同时被编辑的拟南芥突变体dcl2drb4转基因T_1代植株,为研究DRB3、DRB5是否参与DCL4介导的抗病毒RNA沉默通路奠定基础。; 关键词 CRISPR/Cas9 基因编辑拟南芥双链结合蛋白; Keywords CRISPR/Cas9 gene editing Arabidopsis thaliana dsRNA-binding protein; 分类号 S436.67 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番茄双链RNA绑定蛋白(SlDRB)基因家族鉴定及抗TYLCV防御反应分析: 2; 作者黄鑫方远鹏岳宁波张龙吴丹李云洲; 机构贵州大学农学院; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期291-301,共11页; 基金国家自然科学基金项目(32060679) 贵州大学培育项目(贵大培育[2019]52号、黔科合平台人才[2017]5788-28) 贵州大学人才引进科研项目(贵大人基合字[2017]50号)。; 文摘番茄生产是现代蔬菜生产的主导产业,因经济价值高,成为乡村振兴的优势产业。然而番茄生产大多面临番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)和其他病毒的严重威胁。最新研究发现双链RNA结合蛋白(DRB)在植物RNA干扰(RNAi)抗病毒通路中发挥重要作用。为探究番茄DRB(SlDRB)基因抗TYLCV防御反应,本研究通过生物信息学方法鉴定并分析番茄DRB基因的基础性质,包括DRB基因家族进化树、基因结构和基因染色体上的位置、保守基序、组织特异性表达等,同时利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测SlDRB基因家族对TYLCV的防御反应。结果表明,番茄含有8个SlDRB基因家族成员,分布于6条染色体上,其中3个SlDRB基因位于1号染色体。番茄DRB家族可分出3个亚族,即DRB2/3、DRB6/7和DRB1/4/5/8,不同的亚族内含子数量和蛋白结构分布有所差异。亚细胞定位结果表明SlDRB1、SlDRB5、SlDRB6、SlDRB7和SlDRB8定位于胞外,SlDRB2和SlDRB3定位于细胞质,SlDRB4定位于细胞核。不同SlDRB基因的组织特异性表达差异明显,但是在叶片组织中大多数SlDRB基因表达相对适中,在根、花、果组织中多数基因表达水平相对较高。所有SlDRB基因在番茄受TYLCV侵染后表达水平均有升高,根据表达趋势分为四类:第一类基因SlDRB7、SlDRB8,表达水平持续上调;第二类基因SlDRB2、SlDRB3,在病毒接种第7天表达上调,在第14天下调;第三类基因SlDRB1、SlDRB4,仅在病毒侵染7 d表达上调;第四类基因SlDRB5、SlDRB6,仅在病毒侵染14 d表达上调。本研究在番茄上鉴定了8个SlDRB基因,并明确了该基因参与植株抗病毒的防御反应,为研究SlDRB在番茄RNAi抗病毒中的功能与作用奠定了基础。; 关键词番茄抗病毒双链RNA结合蛋白(DRB) 生物信息学表达分析; Keywords tomato antiviral defense double RNA binding protein(DRB) bioinformatics expression analysis; 分类号 S436.412.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Taq DNA聚合酶的分子改造及其在探针法qPCR直扩体系中的应用被引量：1: 3; 作者胡松青袁家惠刘光毅侯轶; 机构华南理工大学食品科学与工程学院广州英赞生物科技有限公司华南理工大学轻工科学与工程学院; 出处《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期8-16,共9页; 基金广东省基础与应用基础研究基金资助项目(2021A1515220141)。; 文摘 Taq DNA聚合酶作为实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术的核心组分,其性能优劣直接影响qPCR技术的进一步发展。然而,野生型Taq DNA聚合酶的耐抑制剂性能差、延伸性能不足。为获得具有高性能的Taq DNA聚合酶,采用基因工程技术将双链DNA结合蛋白Sso7d或Sto7d融合在野生型Taq DNA聚合酶的N端或C端,构建了4个均可溶表达的改造体,再经过耐受性测试筛选较优的改造体,结果显示:改造体Taq-Sto的耐受性最高,其热稳定性不受影响,且在1 s/kbp的延伸条件下能成功扩增靶标,表明Taq-Sto具有增强的延伸性能,在TaqMan探针法qPCR体系中对腐殖酸、单宁酸、全血等抑制剂同样表现出良好的耐受性。EMSA实验发现:Taq-Sto对DNA模板的结合亲和力有所提高,有利于增强Taq-Sto对模板的竞争力;将Taq-Sto应用于非洲猪瘟病毒(ASFV)的TaqMan探针法qPCR检测,与商品化试剂相比,Taq-Sto具有更低的ASFV检出限,且在体积分数为2%~6%的猪粪便样本或猪肉样本中的检测灵敏度分别为100.0%和85.4%,说明Taq-Sto在直扩qPCR检测领域更具有优势。; 关键词 Taq DNA聚合酶双链DNA结合蛋白耐受性聚合酶链式反应; Keywords Taq DNA polymerase double-stranded DNA-binding protein tolerance polymerase chain reaction; 分类号 Q814 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名莱茵衣藻CrDRBs基因的克隆和生物信息学分析被引量：1: 4; 作者娄素琳林鑫黄思敏李辉胡章立; 机构深圳大学生命与海洋科学学院深圳大学光电工程学院广东省植物表观遗传学重点实验室深圳大学龙华生物产业创新研究院; 出处《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期523-528,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(31800300,31470431) 广东省自然科学基金资助项目(2016A030313052,2018 A030313507) 中国博士后基金资助项目(2016M602 507)。; 文摘双链核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)结合蛋白(double-stranded RNA-binding protein,DRB)是一类含有双链RNA结合结构域(dsRBD)的蛋白,在小核糖核酸(micro ribonucleic acid,microRNA或miRNA)的生物合成和作用方式选择方面起着重要作用.为获得莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii,C. reinhardtii)中所有CrDRBs的全长序列并进行生物信息学分析,从蛋白质功能结构域Pfam数据库中下载了dsRBD结构域模块,使用HMMER软件基于dsRBD检索C. reinhardtii全基因组序列,获得C. reinhardtii中4个含dsRBD结构域的CrDRB蛋白相关信息.抽提C. reinhardtii总RNA,反转录获得其cDNA,设计相应引物克隆获得其完整的基因ORF序列.设计实时荧光定量PCR引物,以actin基因为内参,分析C. reinhardtii各CrDRBs基因的相对表达.同源比对分析C. reinhardtii各CrDRBs蛋白的dsRBD序列.通过Phyre2软件在线预测其dsRBD的高级结构.将莱茵衣藻CrDRBs的dsRBD与拟南芥的5个DRB成员构建系统进化树分析,初步探讨分析莱茵衣藻CrDRBs各成员的的进化保守性.本研究共获得了4个莱茵衣藻双链RNA结合蛋白,均具有典型的dsRBD结构域,含有3个保守氨基酸.相比已报道的DUS16,其他3个CrDRBs的CDS序列较长,基因表达较高(除CrDRB2外).本研究为下一步揭示莱茵衣藻CrDRB在miRNA调控途径的功能奠定基础.; 关键词分子生物学水生生物学莱茵衣藻微小RNA 双链RNA结合蛋白基因克隆蛋白结构; Keywords molecular biology hydrobiology Chlamydomonas reinhardtii micro ribonucleic acid(miRNA) double-stranded RNA-binding protein(DRB) gene cloning protein structure; 分类号 Q756 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白	吴坤鑫武亚丹张春微刘志昕王健华余乃通张秀春	《热带作物学报》 CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	番茄双链RNA绑定蛋白(SlDRB)基因家族鉴定及抗TYLCV防御反应分析	黄鑫方远鹏岳宁波张龙吴丹李云洲	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Taq DNA聚合酶的分子改造及其在探针法qPCR直扩体系中的应用	胡松青袁家惠刘光毅侯轶	《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	莱茵衣藻CrDRBs基因的克隆和生物信息学分析	娄素琳林鑫黄思敏李辉胡章立	《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料