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题名副溶血性弧菌和溶藻弧菌的双重PCR检测技术
被引量：2
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作者
桑燕娇
张继伦
陈浩铭
宁喜斌
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机构
上海海洋大学食品学院
上海机场出入境检验检疫局
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期130-134,共5页
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基金
上海市科委工程中心建设(11DZ2280300)
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文摘
主要针对副溶血性弧菌（VpBJ1997）和溶藻弧菌（VaATCC17749）的gyrB基因的不同位点设计特异性引物，利用双重PCR技术同时检测Vp（BJ1997）和Va（ATCC17749），并对该反应体系的特异性以及灵敏度进行检测。结果显示Vp（BJ1997）灵敏度的检测下限可达2×10^2CFU／mL，Va（ATCC17749）灵敏度的检测下限可达2．03×10^2CFU／mL，双重PCR与单一PCR检测的灵敏度的数量级是相同的；与沙门氏菌（ATCC27892）、金黄色葡萄球菌（ATCC13565）、大肠杆菌（35218）、河弧菌（H265）、鳗弧菌（M936）、创伤弧菌（ATCC27562）无交叉反应；在人工污染试验中，混合菌液的检测下限2．84×10^3CFU／mL，而进一步稀释至2．84×10^2CFU／mL时，Vp（BJ1997）已检测不出，Va（ATCC17749）仍可检出。研究表明，该方法特异性强，灵敏度高，操作简单，成本低，检测速度快，为基层单位同时检测副溶血性弧菌和溶藻弧菌提供了一种快速准确的方法，对控制水产品中这两种致病性弧菌具有重大的意义。
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关键词
双重pcr技术
副溶血性弧菌(Vp
BJ1997)
溶藻弧菌(Va
ATCC17749)
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Keywords
duplex pcr technology
Vibrio parahaemolyticu （ B J1997 ）
Vibrio alginolyticus （ ATCC 17749 ）
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分类号
TS254.7
[轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
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题名双重抑制PCR技术分离鹅微卫星标记
被引量：13
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作者
杜文兴
虞德兵
刘红林
练春兰
候水生
王林云
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机构
南京农业大学动物科技学院
东京大学亚洲自然环境科学中心
中国农业科学院畜牧研究所
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出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期63-67,共5页
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基金
国家科技攻关资助项目(2002BA514A926)
江苏省农业三项工程项目(SX(2003)046)
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文摘
用双重抑制PCR技术分离11对鹅的特异微卫星引物,应用于浙东白鹅和太湖鹅的基因组PCR扩增。结果表明:11对引物在浙东白鹅和太湖鹅中分别扩增出37和36个清晰条带,20个等位基因为两品种所共有,11对引物中有5对呈中等多态、6对呈高度多态。各位点产生2～6个等位基因,各位点的平均杂合度为0.456～0.772,以G07位点为最高,G06位点为最低;平均多态信息为0.375～0.737,以G07位点为最高,G01、G03和G11位点为最低。浙东白鹅和太湖鹅有效等位基因数分别为2.655和2.558,与实际测得的两品种平均值3.364和3.273较接近。研究结果表明,两品种的等位基因分布较为均匀,与鹅的实际品种特征一致,因此,双重抑制PCR技术适合于鹅的基因组结构研究。
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关键词
双重抑制pcr技术
微卫星标记
鹅
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Keywords
dual-suppression-pcr technique
microsatellite marker
goose
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分类号
S852
[农业科学—基础兽医学]
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题名利用SSR标记鉴定西瓜杂交种纯度的研究
被引量：10
- 3
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作者
刘子记
詹园凤
朱婕
贺滉
党选民
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机构
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点开放实验室
海南大学园艺园林学院
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出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016年第9期1714-1718,共5页
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基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(No.1630032014019
1630032015003)
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文摘
建立快速、准确、稳定的种子纯度检测技术是保证西瓜杂交种质量的有效措施。利用分子标记技术对小型西瓜‘美月’杂交种纯度进行鉴定。从均匀分布于不同西瓜染色体上的88对SSR引物中筛选出8对引物在‘美月’亲本间表现明显的多态性,分别位于第1、2、3、6、8、9、10染色体上,多态性比率为9.09%,多态性标记均为共显性标记。为了提高检测效率,结合多态性片段大小,同时对标记SSR48和SSR62进行扩增,可成功获得221 bp和131 bp的两组特异性条带,成功建立了双重PCR体系。为了提高鉴定结果的准确性,选用位于西瓜不同染色体上的4对共显性标记对‘美月’进行纯度检测,4对标记的检测结果高度一致,‘美月’杂交种纯度为99.44%。标记鉴定结果与田间表型鉴定结果比较分析表明,2种鉴定结果高度一致。研究结果可为西瓜杂交品种纯度快速检测和品种权保护提供理论依据与技术支撑。
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关键词
小型西瓜
杂交种
双重pcr技术
纯度鉴定
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Keywords
Mini-watermelon
Hybrid
Duplex pcr technology
Purity identification
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分类号
S651
[农业科学—果树学]
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