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HNE诱导下PKCδ/θ-Duox1-ROS对气道黏液高分泌影响的体外实验研究
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作者 何明欣 杨雅楼 +4 位作者 徐立 杨雨菡 张紫薇 周向东 李琪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2042-2045,2051,共5页
目的:探讨蛋白激酶C(PKC)δ/θ-双重功能氧化酶1(Duox1)-活性氧(ROS)信号通路对人气道黏蛋白(MUC)5AC的调控作用及机制,为气道黏液高分泌治疗提供新靶点。方法:PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU预处理人气道... 目的:探讨蛋白激酶C(PKC)δ/θ-双重功能氧化酶1(Duox1)-活性氧(ROS)信号通路对人气道黏蛋白(MUC)5AC的调控作用及机制,为气道黏液高分泌治疗提供新靶点。方法:PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU预处理人气道上皮细胞16HBE,给予人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激建立体外气道炎症细胞模型。试剂盒测定各组细胞ROS生成水平,实时荧光定量PCR检测Duox1和MUC5AC mRNA水平,Western blot测定各组细胞干扰因素对Duox1蛋白水平的影响,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白表达。结果:与对照组相比,HNE组ROS生成明显增多,Duox1、MUC5AC mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);给予Duox1抑制剂、自由基清除剂或PKC抑制剂及PKCδ/θ抑制剂后,ROS生成受到明显抑制,Duox1和MUC5AC mRNA及蛋白表达减少(P<0.05);给予PKCα/β后,ROS生成、Duox1和MUC5AC mRNA及蛋白表达与HNE组比较无明显变化(P>0.05)。结论:体外细胞模型实验中,HNE可通过PKCδ/θ-Duox1-ROS介导MUC5AC高表达,在气道黏液高分泌发展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 蛋白激酶Cδ/θ 双重功能氧化酶1 活性氧 黏蛋白5AC
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