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初诊双表达弥漫大B细胞淋巴瘤的疗效及预后分析 被引量:2
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作者 史玉叶 陶红 +4 位作者 李蕴劼 史文婷 卢雪莹 王春玲 于亮 《中国社区医师》 2019年第28期18-19,21,共3页
目的:探讨MYC及Bcl2和/或Bcl6双表达的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者疗效及对患者生存的影响。方法:回顾性分析初治36例双表达(DEL)及非双表达(non-DEL)DLBCL患者临床资料,分析两组患者临床特征的差异。所有患者采取常规CHOP方案[环... 目的:探讨MYC及Bcl2和/或Bcl6双表达的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者疗效及对患者生存的影响。方法:回顾性分析初治36例双表达(DEL)及非双表达(non-DEL)DLBCL患者临床资料,分析两组患者临床特征的差异。所有患者采取常规CHOP方案[环磷酰胺(CTX)750mg/m2,d1;盐酸表柔比星(EPI)60mg/m2,第1天;长春新碱(VCR)1.4mg/m2(最大2mg),d1;泼尼松60mg/m2,d1~5,21d/周期)]化疗或者免疫化疗(利妥昔单克隆抗体375mg/m2,d0,其余用药同常规化疗方案)。所有患者至少接受3个疗程以上化疗,中位疗程数5个(3~8个)。观察其疗效,并分析比较DEL及non-DEL患者的生存差异。结果:DEL患者5年OS显著优于non-DEL患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DEL-DLBCL患者一线R-CHOP方案治疗有效,但总体预后较差,对疗效不佳或者复发/难治的患者可考虑含新药,如来那度胺的方案一线治疗或者挽救治疗。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 利妥昔单抗 MYC蛋白 双表达
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类风湿关节炎合并双表达淋巴瘤一例 被引量:1
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作者 何欣 黄玉琴 +3 位作者 郑建雄 姚婷 青玉凤 张全波 《中华老年多器官疾病杂志》 2021年第6期461-463,共3页
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以侵袭性、对称性多关节炎为表现的全身性自身免疫性疾病,可伴有低热、乏力、体质量下降等全身症状。据统计,恶性淋巴瘤(malignant lymphoma,ML)是我国目前发病率增长最迅速的恶性肿瘤之一... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以侵袭性、对称性多关节炎为表现的全身性自身免疫性疾病,可伴有低热、乏力、体质量下降等全身症状。据统计,恶性淋巴瘤(malignant lymphoma,ML)是我国目前发病率增长最迅速的恶性肿瘤之一,主要表现为无痛性淋巴结肿大、肝脾大,全身组织器官均可受累,常伴有发热、盗汗、全身瘙痒、体质量下降等全身症状。RA发生ML较一般人群患病率高,其中以弥漫大B细胞瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)最常见,RA合并DLBCL并不少见,而同时表达myc(+)、bcl-2(+)被称为双表达,提示预后差,报道较少。本文报道一例川北医学院附属医院老年科长期门诊随访的RA合并双表达的DLBCL患者的病例。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 细胞瘤 大B细胞 弥漫性 双表达淋巴瘤
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变异猪流行性腹泻病毒M和N融合双基因的原核表达及表达产物免疫原性分析 被引量:2
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作者 王隆柏 王晨燕 +4 位作者 吴学敏 陈秋勇 车勇良 陈如敬 周伦江 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1249-1255,共7页
旨在构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株(GenBank登陆号KJ646580)的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2(pE2)表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组... 旨在构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株(GenBank登陆号KJ646580)的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2(pE2)表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至E2-M片段,转化到Trans 1-T1感受态细胞中,构建出pE2-M-N融合双基因质粒并转化Transetta(DE3),表达出相应的融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot验证蛋白的表达情况。将纯化的M-N融合蛋白皮下接种BLAB/c小鼠,通过ELISA方法检测融合蛋白的免疫原性。结果表明:扩增出M和N基因,成功构建了pE2-M质粒,并将E2-M基因与N基因进行有效连接,构建出pE2-M-N融合双基因质粒,表达出了具有免疫原性的M-N融合蛋白,该蛋白能够诱导小鼠产生相应的特异性抗体。变异PEDV的pE2-M-N双基因融合质粒的构建,为进一步开展变异PEDV的诊断技术和免疫学等研究,奠定良好基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PEDV M基因 N基因 基因表达
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鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达 被引量:3
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作者 陈玮 邵传森 +6 位作者 沈建根 鲍建芳 潘建平 韩伟 寿林 项哨 郑树 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第1期15-18,共4页
目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载... 目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL- 展开更多
关键词 白细胞介素-12 生物合成 质粒 基因表达 MIL-12 天然杀伤细胞 遗传载体 分子克隆 亚基共表达 小鼠
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组织因子途径抑制因子/绿色荧光蛋白双顺反子真核表达载体构建及其在NIH 3T3细胞中表达
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作者 宋丽萍 楼莎 +5 位作者 朱敦皖 刘兰霞 张海玲 董霞 董庭婷 冷希岗 《生物医学工程与临床》 CAS 2011年第2期178-182,88,共5页
目的构建含人组织因子途径抑制因子(TFPI)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子真核表达载体,并验证其在NIH 3T3细胞中的表达,为血管再狭窄的防治提供一个具有示踪和治疗双重作用的有效载体。方法以含有全长cDNA的pIRES-TFPI为模板,多聚... 目的构建含人组织因子途径抑制因子(TFPI)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子真核表达载体,并验证其在NIH 3T3细胞中的表达,为血管再狭窄的防治提供一个具有示踪和治疗双重作用的有效载体。方法以含有全长cDNA的pIRES-TFPI为模板,多聚酶链反应(PCR)扩增TFPI全长cDNA,经酶切后插入到pIRES2-AcGFP1-Nuc载体中,构建成双顺反子真核表达载体,重组质粒经酶切图谱分析、PCR扩增及测序鉴定后命名为pIRES2-AcGFP1-Nuc-TFPI。将其转染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜观察GFP在细胞中的表达,以RT-PCR检测TFPI在细胞内的表达。结果经酶切图谱分析、PCR扩增及DNA测序证实双顺反子真核表达载体构建正确;荧光显微镜可观察到细胞内GFP的表达;RT-PCR证实经TFPI基因转染的细胞内TFPI mRNA表达增高。结论成功构建了包括TFPI和GFP的真核双表达载体,并使其在NIH3T3细胞中顺利表达。 展开更多
关键词 组织因子途径抑制因子 绿色荧光蛋白 顺反子表达载体 血管再狭窄
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联合双基因表达载体的构建及其拟南芥转化
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作者 钟胜 段瑞军 +2 位作者 郭建春 胡新文 符少萍 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第1期52-54,共3页
[目的]为了研究CBF3冷诱导转录因子和细胞渗透调节物质AtGloS3在抗寒中的相互作用,寻找理想的抗寒转基因方式。[方法]根据GenBank中拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组序列设计引物,通过PCR反应克隆包括CBF3(C-repeat Binding Factor 3... [目的]为了研究CBF3冷诱导转录因子和细胞渗透调节物质AtGloS3在抗寒中的相互作用,寻找理想的抗寒转基因方式。[方法]根据GenBank中拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组序列设计引物,通过PCR反应克隆包括CBF3(C-repeat Binding Factor 3)基因以及基因上游启动子的DNA序列:CP-CBF3,共2 075 bp。CP是CBF3基因的启动子,受低温诱导。用EcoRI和BamHI双酶切CP-CBF3并置于植物表达载体pCAMBIA1300中,构建CBF3基因冷诱导表达载体pCA-CP-CBF3。然后将带有组成型启动子的肌醇半乳糖苷酶基因AtG-loS3合并于pCA-CP-CBF3中,构建双基因植物表达载体pCA-CP-CBF3-35S-AtGloS3。用真空抽滤虑法将这两个表达载体转化到拟南芥中,并用潮霉素筛选出转基因植物苗。[结果]CBF3和AtGloS3基因均来自拟南芥,而CBF3不存在内含子,AtGloS3基因存在内含子,故以CB-1、CB-2为引物的非转基因植物中也能得到带,而以AT-1、AT-2为引物的非转基因植物不能得到带。[结论]该研究中pCA-CP-CBF3是1个对照,实验的后续工作需进一步进行。 展开更多
关键词 CBF3冷诱导表达载体 CBF3和AtGolS3基因表达载体 拟南芥转化
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山羊FSH真核表达载体pVITRO-FSHαβ构建及在CHO细胞内稳定表达 被引量:2
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作者 王建武 陈秀萍 +1 位作者 严正杰 丁家桐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1130-1134,共5页
在对山羊促卵泡素α、β亚基基因克隆和瞬时表达的基础上,构建促卵泡素αβ双表达载体,并转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary Cells,CHO),在潮霉素B的抗性筛选下,进行稳定表达,获得了稳定表达的CHO细胞株,为重组激素制剂的研... 在对山羊促卵泡素α、β亚基基因克隆和瞬时表达的基础上,构建促卵泡素αβ双表达载体,并转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary Cells,CHO),在潮霉素B的抗性筛选下,进行稳定表达,获得了稳定表达的CHO细胞株,为重组激素制剂的研制提供了必备条件。 展开更多
关键词 山羊促卵泡素 双表达载体 CHO 稳定表达
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谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建 被引量:1
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作者 尧辉 魏东芝 +2 位作者 周宇荀 沈立新 刘寿春 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期144-148,共5页
通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .... 通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .0 8mmol/L IPTG于 2 8℃诱导工程菌 E.coli BL2 1( DE3) ( p Trc99A/gsh I- gsh II) ,GSH- I、GSH- II蛋白比为 4.5∶ 1 ( m∶ m)时谷胱甘肽合成能力最高 ,达到每克湿菌体 8.5 mg。通过构建单顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I、p Trc99A/gsh II测定GSH- I与 GSH- II蛋白的最适配比 ,结果表明 :在 GSH- I、GSH- II蛋白总量恒定的情况下 ,要提高谷胱甘肽产率 ,两者比例以 3∶ 1~ 6∶ 展开更多
关键词 谷胱甘肽 合成酶系 蛋白表达体系 顺反子重组表达载体 协调表达
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神经氨酸酶基因联合抗黏液病毒基因的抗病毒作用 被引量:1
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作者 傅德智 张亚妮 +6 位作者 陈昊 李伟 郑蒙蒙 王丹 张振韬 施青青 李碧春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期78-86,共9页
拟构建神经氨酸酶(NA)基因和抗黏液病毒(Mx)基因双基因真核共表达载体,并检测基因表达以及转染鸡成纤维(CEF)细胞后的抗病毒效果。克隆了NA基因和突变型Mx基因的cDNA;分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2中,酶切和测序鉴定双基因... 拟构建神经氨酸酶(NA)基因和抗黏液病毒(Mx)基因双基因真核共表达载体,并检测基因表达以及转染鸡成纤维(CEF)细胞后的抗病毒效果。克隆了NA基因和突变型Mx基因的cDNA;分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2中,酶切和测序鉴定双基因共表达载体pVITRO2-Mx-NA的正确性。用pVITRO2-Mx-NA转染NIH-3T3细胞,通过RT-PCR和间接免疫荧光(IFA)方法检测目的基因的表达。随后用pVITRO2-Mx-NA转染CEF细胞,利用RT-PCR及微量细胞病变抑制法测定重组蛋白抗新城疫病毒(NDV)的效果。结果:酶切和测序分析表明成功构建了双基因真核共表达载体pVITRO2-Mx-NA,在转染后的NIH-3T3和CEF细胞中同时检测到了NA和Mx基因的表达。联合基因表达的重组蛋白可保护CEF细胞在孵育的72h内免受NDV的感染,而转染了突变型Mx或者NA单基因真核表达载体的CEF细胞在孵育的48h内亦未受到NDV的侵染;与单基因转染组相比,联合基因转染组明显延迟NDV感染CEF细胞的时间,差异显著(P<0.05)。构建的双基因真核表达载体pVITRO2-Mx-NA转染CEF细胞后,其表达的重组蛋白Mx-NA在细胞水平上具有协同延缓NDV感染的能力,且优于单个基因。 展开更多
关键词 NA MX 基因表达载体 抗病毒活性 抗NDV
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对“三农”问题的历史解读——读吴毅著《村治变迁中的权威与秩序》 被引量:1
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作者 萧斌 《社会主义研究》 CSSCI 北大核心 2003年第1期F003-F003,共1页
关键词 “三农”问题 吴毅 《村治变迁中的权威与秩序——20世纪川东村的表达 中国
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