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采用双荧光素酶报告法验证乳腺癌中miR-155靶标
被引量：
4
1
作者
孟丽
纪婷
+5 位作者
李鹿丰
张喜平
杨红健
朱聪
郭江峰
丁先锋
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期189-195,共7页
MiR-155与乳腺癌发生发展密切相关.本研究以乳腺癌组织和血清中均显著高表达的miR-155为研究对象,利用TargetScan和PicTar预测miR-155的靶基因.根据miR-155与靶基因结合的保守性、动力学及靶基因功能,筛选出miR-155的靶基因ACTA1(actin ...
MiR-155与乳腺癌发生发展密切相关.本研究以乳腺癌组织和血清中均显著高表达的miR-155为研究对象,利用TargetScan和PicTar预测miR-155的靶基因.根据miR-155与靶基因结合的保守性、动力学及靶基因功能,筛选出miR-155的靶基因ACTA1(actin alpha 1,skeletal muscle)和CEBPB(CCAAT/enhancer binding protein beta),并用双荧光素酶报告法验证.将ACTA1和CEBPB的3'-UTR(3'-untranslated region)全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,并构建结合位点的突变序列,得到pRL-TK-Aw、pRL-TK-Am、pRL-TK-Cw、pRL-TK-Cm载体.不同海肾荧光素酶载体转染Bcap37乳腺癌细胞,同时转染miR-155及内参对照萤火虫荧光素酶载体pGL3-control.根据不同转染的海肾荧光素酶表达活性,运用SPSS软件分析,结果显示,CEBPB是miR-155在乳腺癌中的直接靶基因(P<0.05).miR-155通过下调CEBPB影响乳腺癌的发生.
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关键词
MIR-155
靶基因
双荧光素酶报告法
CEBPB
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职称材料
题名
采用双荧光素酶报告法验证乳腺癌中miR-155靶标
被引量：
4
1
作者
孟丽
纪婷
李鹿丰
张喜平
杨红健
朱聪
郭江峰
丁先锋
机构
浙江理工大学生物工程研究所
浙江省肿瘤医院
浙江省微生物研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期189-195,共7页
基金
浙江省自然科学基金(No.Y2100681)
杭州市科技发展计划(No.20110733Q04
+1 种基金
No.20110733Q21)
公益技术研究社会发展项目(No.2012C23072)~~
文摘
MiR-155与乳腺癌发生发展密切相关.本研究以乳腺癌组织和血清中均显著高表达的miR-155为研究对象,利用TargetScan和PicTar预测miR-155的靶基因.根据miR-155与靶基因结合的保守性、动力学及靶基因功能,筛选出miR-155的靶基因ACTA1(actin alpha 1,skeletal muscle)和CEBPB(CCAAT/enhancer binding protein beta),并用双荧光素酶报告法验证.将ACTA1和CEBPB的3'-UTR(3'-untranslated region)全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,并构建结合位点的突变序列,得到pRL-TK-Aw、pRL-TK-Am、pRL-TK-Cw、pRL-TK-Cm载体.不同海肾荧光素酶载体转染Bcap37乳腺癌细胞,同时转染miR-155及内参对照萤火虫荧光素酶载体pGL3-control.根据不同转染的海肾荧光素酶表达活性,运用SPSS软件分析,结果显示,CEBPB是miR-155在乳腺癌中的直接靶基因(P<0.05).miR-155通过下调CEBPB影响乳腺癌的发生.
关键词
MIR-155
靶基因
双荧光素酶报告法
CEBPB
Keywords
miR-155
target gene
dual-luciferase reporter assay
CEBPB （ CCAAT/enhancer binding protein beta）
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
Q7 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
采用双荧光素酶报告法验证乳腺癌中miR-155靶标
孟丽
纪婷
李鹿丰
张喜平
杨红健
朱聪
郭江峰
丁先锋
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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