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题名海洋芽孢杆菌碱性酯酶BSE-1的纯化与性质研究
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作者
高强
王跃军
于建生
孙谧
郑鸿飞
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机构
中国水产科学研究院黄海水产研究所
青岛科技大学化工学院
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出处
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1316-1320,共5页
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基金
863计划(2007AA091602)
国际科技合作重点项目(2005DFA30830)资助
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文摘
海洋芽孢杆菌酯酶发酵液通过低温高速离心(10000r/min,30min,4℃)、乙醇-硫酸铵双水相沉淀和Q-Sepharose HR阴离子交换层析等技术进行了纯化,最终得到电泳纯的酯酶BSE-1。SDS-PAGE电泳结果表明,该酶表观分子量为30kDa。以对硝基苯磷酸酯(PNPP)为底物对BSE-1进行了理化性质研究,结果表明,BSE-1的最适反应温度为60℃,最适pH值为10.0,为嗜热碱性酯酶;该酶在60℃以下、pH 7～11范围内具有良好的热稳定性;与常见酸根离子、有机溶剂的配伍性较好,但金属离子对酶活影响较大,Li^+、Mg^(2+)、Ca^(2+)对BSE-1有激活作用,1mmol/L的Ca^(2+)使酶活提高2倍以上;Ba^(2+)、Fe^(3+)、Ag^+、Sr^(2+)对BSE-1有抑制作用,1mmol/L Ba^(2+)存在下酶活仅能保持10%左右。
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关键词
海洋芽孢杆菌
碱性酯酶
双水相沉淀
热稳定性
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Keywords
marine Bacillus sp., alkaline esterase, aqueous two-phase precipitation, thermal stability
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分类号
TQ925
[轻工技术与工程—发酵工程]
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