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双氢青蒿素体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究
1
作者 秦枫 刘云 +4 位作者 唐楠楠 吴植 李勇军 于生兰 朱善元 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4379-4393,共15页
【目的】探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)作用。【方法】试验首先建立体外抗PRRSV的Marc-145细胞模型,采用MTT法检测DHA对Marc-14... 【目的】探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)作用。【方法】试验首先建立体外抗PRRSV的Marc-145细胞模型,采用MTT法检测DHA对Marc-145细胞毒性,确定其最大安全浓度。将Marc-145细胞分为4组,分别为空白对照组(Control)、阳性对照组(利巴韦林)、模型组(PRRSV)和药物组(DHA),检测阻断、抑制和直接灭活作用方式下DHA抗PRRSV的作用效果。通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测不同作用方式下、不同时间点PRRSV N的mRNA和蛋白表达量,利用Annexin/PI双染法检测PRRSV感染诱导的细胞凋亡情况。【结果】DHA和阳性药物利巴韦林的最大安全浓度分别为3.13和15.63μg/mL。在阻断、抑制和直接灭活作用下,DHA对PRRSV的的最大抑制率分别为66.2%、88.9%和62.1%;在抑制作用下细胞基本保持单层完好,在阻断和直接灭活作用下细胞出现了圆缩、团聚的现象。抑制作用下,利巴韦林对PRRSV的抑制率最大,抑制率为68.9%,细胞出现了圆缩、团聚的现象。实时荧光定量PCR检测结果显示,在阻断和抑制作用下,与模型组相比,利巴韦林和DHA组细胞中PRRSV N基因拷贝数显著降低(P<0.05);在直接灭活作用下,与模型组相比,DHA组细胞中PRRSV N基因拷贝数显著降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,不同作用方式下,与模型组相比,不同时间点DHA组细胞中PRRSV N蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。细胞凋亡检测结果显示,阻断作用下,与模型组相比,早期凋亡48 h时,DHA组细胞凋亡率显著降低(P<0.05);晚期凋亡不同时间点,利巴韦林和DHA组细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。抑制作用下,与模型组相比,在早期凋亡和晚期凋亡72 h时,DHA组细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。直接灭活作用下,与模型组相比,早期凋亡24、48 h时,DHA组细胞凋亡率显著降低(P<0.05);晚期凋亡24、72 h时,DHA组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。【结论】DHA体外抗PRRSV作用显著,主要通过抑制PRRSV N基因表达及N蛋白合成发挥作用,同时对细胞凋亡具有抑制效果。 展开更多
关键词 双氢青蒿素(DHA) 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 抗病毒作用 细胞凋亡
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双氢青蒿素可显著增强阿霉素诱导的三阴性乳腺癌细胞凋亡:基于负向调控STAT3/HIF-1α通路
2
作者 陈镝 吕莹 +5 位作者 郭怡欣 张怡荣 王蕊璇 周小若 陈雨欣 武晓慧 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期254-260,共7页
目的探究双氢青蒿素(DHA)协同阿霉素(DOX)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及潜在的分子机制。方法设阴性对照组(DOX、DHA均0μmol/L),分别检测不同浓度双氢青蒿素(50、100、150μmol/L)单独干预和双氢青蒿素与阿霉素联合... 目的探究双氢青蒿素(DHA)协同阿霉素(DOX)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及潜在的分子机制。方法设阴性对照组(DOX、DHA均0μmol/L),分别检测不同浓度双氢青蒿素(50、100、150μmol/L)单独干预和双氢青蒿素与阿霉素联合干预(DOX 0.5μmol/L、DHA50μmol/L、DOX 0.5μmol/L+DHA50μmol/L)对MDA-MB-231细胞的影响。MTT与克隆形成实验检测细胞增殖水平;流式细胞实验检测细胞凋亡水平;Western blotting实验检测细胞PCNA、cleaved PARP、Bcl-2、Bax、STAT3、p-STAT3、HIF-1α、survivin等蛋白表达水平。结果DHA抑制MDA-MB-231细胞增殖的IC50为131.37±29.87μmol/L,DHA与DOX联用组显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.01)。相较于阴性对照组,DHA呈浓度依赖性诱导MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.01);相较于DHA组或DOX组,DHA与DOX联用组诱导MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.001)。相较于阴性对照组,DHA高浓度(150μmol/L)可抑制MDA-MB-231克隆形成(P<0.01)。相较于阴性对照组,DHA下调PCNA、p-STAT3、HIF-1α、survivin蛋白表达水平(P<0.01),上调cleaved PARP蛋白表达水平(P<0.01)、Bax/Bcl-2蛋白表达水平的比值(P<0.01),DHA与DOX联用组下调p-STAT3蛋白表达水平(P<0.05),上调Bax/Bcl-2蛋白表达水平的比值(P<0.01)。结论DHA联合DOX可显著增强抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与DHA负向调控STAT3/HIF-1α通路有关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 阿霉素 STAT3 缺氧诱导因子-1Α 三阴性乳腺癌 凋亡
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miR-29a介导双氢青蒿素对肺腺癌B7H3分子调控
3
作者 朱亚玉 凌惠娟 +2 位作者 牛可 唐静 陈礼文 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期604-610,共7页
目的探究microRNA-29a(miR-29a)介导双氢青蒿素(DHA)对肺腺癌(LUAD)免疫检查点分子B7H3的调控机制。方法利用公共数据库分析B7H3在肺腺癌中的表达水平和预后意义。采用小干扰RNA(siRNA)敲减肺腺癌细胞株A549和HCC827中B7H3分子,CCK-8法... 目的探究microRNA-29a(miR-29a)介导双氢青蒿素(DHA)对肺腺癌(LUAD)免疫检查点分子B7H3的调控机制。方法利用公共数据库分析B7H3在肺腺癌中的表达水平和预后意义。采用小干扰RNA(siRNA)敲减肺腺癌细胞株A549和HCC827中B7H3分子,CCK-8法检测细胞增殖。将梯度浓度的DHA(0、5、10、25、50、100μmol/L)处理A549与HCC827细胞48 h,计算半数抑制浓度(IC_(50)),以IC_(50)浓度DHA处理A549和HCC827细胞1、2、3 d,CCK-8法检测细胞增殖。采用miR-29a inhibitor转染A549、HCC827细胞,DHA处理后RT-qPCR检测miR-29a表达水平,Western blot检测B7H3表达水平。结果B7H3在肺腺癌中过度表达,与预后不良相关。敲低B7H3后A549、HCC827细胞增殖能力显著降低(均P<0.001)。DHA以剂量和时间依赖形式抑制A549、HCC827细胞增殖,IC_(50)分别是30.16μmol/L和7.50μmol/L。DHA上调A549、HCC827细胞miR-29a表达(P<0.001,P<0.01),同时下调B7H3表达(P<0.01,P<0.001)。A549、HCC827细胞转染miR-29a inhibitor后,B7H3表达上调,并且部分逆转DHA对B7H3的下调作用。结论miR-29a介导DHA对肺腺癌B7H3分子调控。 展开更多
关键词 肺腺癌 双氢青蒿素 B7H3 miR-29a 细胞增殖
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双氢青蒿素对新孢子虫感染雄性小鼠精子质量和生精功能基因的影响
4
作者 赵芳琳 刘萌 +3 位作者 唐泽宇 赵健豪 李璐 贾立军 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1796-1806,共11页
【目的】新孢子虫病是引起孕畜流产、死胎或新生儿运动障碍等临床症状的一种原虫病,目前尚无有效的药物防治该病。试验旨在确定双氢青蒿素对新孢子虫感染雄性小鼠精子质量和生精功能基因的影响作用,以期达到抗虫效果。【方法】以新孢子... 【目的】新孢子虫病是引起孕畜流产、死胎或新生儿运动障碍等临床症状的一种原虫病,目前尚无有效的药物防治该病。试验旨在确定双氢青蒿素对新孢子虫感染雄性小鼠精子质量和生精功能基因的影响作用,以期达到抗虫效果。【方法】以新孢子虫感染BALB/c雄性小鼠模型为研究对象,进行双氢青蒿素灌胃给药,给药剂量为0.2 g/kg,连续给药7 d,同时设置空白对照组和模型组。给药后检测雄性小鼠的生殖器官指数和精子质量,采用改良巴氏染色法观察精子形态变化。在给药第7、14、21、35、42天分别检测生精功能基因C-kit、Plzf、Sycp3、Stra8的表达情况。在给药第7天,应用流式细胞术检测生精细胞的凋亡情况。【结果】试验成功建立了新孢子虫感染雄性小鼠模型,与空白对照组相比,模型组小鼠生殖器官指数、精子密度、精子活力均极显著降低(P<0.01),精子畸形率极显著升高(P<0.01),C-kit、Plzf、Sycp3、Stra8基因表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),生精细胞凋亡率极显著升高(P<0.01);双氢青蒿素组小鼠生殖器官指数(除第21天外)、精子密度、精子活力均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),精子畸形率极显著升高(P<0.01),Plzf、C-kit、Sycp3和Stra8基因表达量均降低,部分时间点达显著水平(P<0.05),生精细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。与模型组相比,双氢青蒿素组小鼠生殖器官指数显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),精子密度增加,精子活力增强,精子畸形率极显著降低(P<0.01),C-kit、Plzf、Sycp3和Stra8基因表达量均升高,部分时间点达显著或极显著水平(P<0.05;P<0.01),生精细胞凋亡率极显著降低(P<0.01)。【结论】双氢青蒿素能够调节雄性小鼠生殖器官指数,提高精子质量,减少畸形精子的产生,提高生精功能基因Sycp3、C-kit、Plzf、Stra8的表达量,改善新孢子虫对雄性小鼠精子质量和生精功能基因的损伤。本研究结果为抗新孢子虫有效药物的研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 新孢子虫 双氢青蒿素 生殖器官指数 精子质量 生精功能基因
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双氢青蒿素对断奶仔猪生长性能、肝脏生化指标及免疫指标的影响 被引量：2
5
作者 李思琪 刘震坤 +1 位作者 程嘉奇 罗爱琼 《中国饲料》 北大核心 2024年第20期27-30,共4页
文章旨在探讨双氢青蒿素对断奶仔猪生长性能、肝脏生化指标及免疫指标的影响。试验将200头21日龄、体重相当且健康的断奶仔猪随机分为4组,每组5个重复,每个重复10头仔猪,1组设定为对照组,饲喂基础日粮,剩余3组设定为试验组,饲喂添加不... 文章旨在探讨双氢青蒿素对断奶仔猪生长性能、肝脏生化指标及免疫指标的影响。试验将200头21日龄、体重相当且健康的断奶仔猪随机分为4组,每组5个重复,每个重复10头仔猪,1组设定为对照组,饲喂基础日粮,剩余3组设定为试验组,饲喂添加不同水平双氢青蒿素的基础日粮,其中试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别添加40、80、160 mg/kg的双氢青蒿素,试验为期28 d。结果显示:(1)与对照组相比,试验组仔猪的日均采食量、日均增重量提高,料重比降低,尤其是试验2组各项指标均明显更优,组间差异显著(P<0.05);(2)与对照组相比,试验组仔猪总蛋白(TP)水平显著提高(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅲ组谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(AKP)显著提高(P<0.05);(3)与对照组相比,试验组白细胞介素-10(IL-10)、免疫球蛋白G(IgG)水平明显更高,组间差异显著(P<0.05);与对照组相比,试验Ⅱ组、Ⅲ组白细胞介素-4(IL-4)水平明显更高,组间差异显著(P<0.05)。综合本试验测定指标,在断奶仔猪日粮中添加双氢青蒿素,不仅在一定程度上促进了仔猪的生长性能,改善其肝脏功能,还有助于提高仔猪免疫力。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 断奶仔猪 生长性能 肝脏生化指标 免疫指标
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双氢青蒿素对多发性骨髓瘤细胞发挥抗癌作用
6
作者 张丽翠 钟晨 +5 位作者 张云华 马雅静 董香迎 刘旻 陈晨 田志伟 《世界中医药》 北大核心 2024年第23期3597-3603,3611,共8页
目的:探讨双氢青蒿素通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞发挥的抗癌作用。方法:体外培养U266、RPMI8226细胞,以随机数表法随机分为对照组、双氢青蒿素(40μmol/L)组、双氢青蒿素(40μmol/L)+N-乙... 目的:探讨双氢青蒿素通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞发挥的抗癌作用。方法:体外培养U266、RPMI8226细胞,以随机数表法随机分为对照组、双氢青蒿素(40μmol/L)组、双氢青蒿素(40μmol/L)+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)(ROS清除剂,5 mmol/L)组、双氢青蒿素(40μmol/L)+胰岛素样生长因子1(IGF-1)(PI3K/AKT激活剂,100μg/L)组,经双氢青蒿素、NAC与IGF-1分别处理后,以CCK-8法、流式细胞术测定各组细胞增殖抑制率和凋亡率;检测各组细胞活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)水平;以免疫印迹法检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)、BCL2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、(cleaved Caspase-9、Caspase-3、cleaved Caspase-3)及PI3K/AKT通路相关蛋白表达。构建U266、RPMI8226细胞裸鼠移植瘤模型,检测移植瘤体积与质量。结果:与对照组比较,双氢青蒿素组细胞SOD(11.13±1.22对比2.08±0.36)U/mg、(11.33±1.41对比2.08±0.36)U/mg及CAT(7.98±0.86对比1.29±0.13)U/mg、(7.74±0.85对比1.13±0.19)U/mg水平、PCNA表达(1.31±0.23对比0.41±0.06)、(1.14±0.20对比0.33±0.04)及p-PI3K/PI3K(0.77±0.10对比0.13±0.03)、(0.84±0.12对比0.17±0.04)、p-AKT/AKT(0.83±0.13对比0.18±0.04)、(0.91±0.16对比0.19±0.03)水平、移植瘤体积(1479.73±50.18对比460.54±37.62)mm 3、(1397.86±48.21对比359.71±39.40)mm 3与质量(0.76±0.12对比0.22±0.07)g、(0.69±0.10对比0.16±0.05)g降低(P<0.05),细胞增殖抑制率(0.00±0.00对比51.15±9.93)%、(0.00±0.00对比48.16±10.12)%、凋亡率(1.60±0.39对比55.18±9.74)%、(1.49±0.36对比53.10±9.45)%、ROS(1.00±0.00对比12.90±1.64)、(1.00±0.00对比13.12±2.69)水平、Bax(0.55±0.10对比1.28±0.19)、(0.43±0.11对比1.19±0.13)及Caspase-9(0.33±0.05对比1.24±0.17)、(0.30±0.05对比1.16±0.18)、cleaved Caspase-9(0.22±0.06对比0.89±0.11)、(0.20±0.05对比0.86±0.10)、Caspase-3(0.18±0.05对比0.78±0.09)、(0.17±0.04对比0.74±0.08)、cleaved Caspase-3(0.11±0.03对比0.70±0.08)、(0.10±0.02对比0.67±0.07)蛋白表达升高(P<0.05),IGF-1、NAC均可降低双氢青蒿素对MM细胞的作用。结论:双氢青蒿素可通过抑制PI3K/AKT信号通路激活而促进ROS产生,降低抗氧化酶活性,抑制MM细胞增殖及在裸鼠体内生长,促进其ROS依赖的细胞凋亡。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 双氢青蒿素 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路 活性氧依赖 细胞增殖 细胞凋亡 移植瘤 过氧化氢酶
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双氢青蒿素通过激活氯通道促进鼻咽癌CNE-2Z细胞放疗敏感性 被引量：3
7
作者 刘世情 周丛然 +5 位作者 唐鑫伟 周汉芬 李雪苛 侯秀颖 杨海峰 朱林燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期255-264,共10页
目的:探讨ClC-3氯通道在双氢青蒿素(DHA)促进鼻咽癌CNE-2Z细胞放射增敏中的作用。方法:MTT法检测DHA对CNE-2Z细胞和正常鼻咽上皮NP69-SV40T细胞活力的抑制作用;集落形成实验检测DHA对CNE-2Z细胞的放射增敏作用;Western blot检测ClC-3蛋... 目的:探讨ClC-3氯通道在双氢青蒿素(DHA)促进鼻咽癌CNE-2Z细胞放射增敏中的作用。方法:MTT法检测DHA对CNE-2Z细胞和正常鼻咽上皮NP69-SV40T细胞活力的抑制作用;集落形成实验检测DHA对CNE-2Z细胞的放射增敏作用;Western blot检测ClC-3蛋白的表达;siRNA技术下调ClC-3蛋白的表达;全细胞膜片钳技术记录细胞氯电流。结果:(1)相较于NP69-SV40T细胞,DHA可选择性抑制CNE-2Z细胞活力,IC_(10)值分别为(13.020±4.831)μmol/L和(5.244±1.050)μmol/L(P<0.01);(2)集落形成实验结果显示,DHA对CNE-2Z细胞具有放疗增敏作用,放射增敏比为1.9;(3)DHA能激活CNE-2Z细胞的氯通道,产生外向氯电流;但对NP69-SV40T细胞的氯通道则无影响;(4)DHA促进CNE-2Z细胞的ClC-3氯通道蛋白的表达(P<0.01);(5)氯通道阻断剂NPPB可抑制DHA对CNE-2Z细胞的放射增敏作用,抑制比达1.84;同时也抑制DHA激活的氯电流;(6)下调CNE-2Z的ClC-3蛋白可抑制DHA对鼻咽癌CNE-2Z细胞的放射增敏作用,抑制比达4.19;DHA对CNE-2Z细胞的氯电流的激活作用则不再产生。结论:DHA对鼻咽癌CNE-2Z细胞产生放疗增敏作用,很可能与ClC-3氯通道被激活有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 双氢青蒿素 放射增敏 ClC-3氯通道
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双氢青蒿素对非小细胞肺癌细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫应答的影响 被引量：6
8
作者 王南楠 刘宇 +3 位作者 凌惠娟 牛可 朱亚玉 陈礼文 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期424-429,共6页
目的探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用。方法将NSCLC细胞系A549细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50和100μmol/L)处理A... 目的探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用。方法将NSCLC细胞系A549细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50和100μmol/L)处理A549细胞,根据半抑制浓度(IC 50)选择最适浓度的DHA处理A549细胞0、24、48、72 h;CCK-8法和集落形成实验检测DHA对A549细胞增殖和集落形成能力的影响;密度梯度离心法分离健康个体外周血单个核细胞(PBMC),经黏附贴壁法去除单核细胞,随后与丝裂霉素C预处理的A549细胞按照10∶1比例共培养,2周后采用流式细胞术分别检测CD8^(+)T细胞比例及其穿孔素和颗粒酶B的表达水平。结果与对照组相比,25、50和100μmol/L DHA处理24 h后的A549细胞增殖的抑制率均升高(P<0.01);DHA对A549细胞的IC 50为46.26μmol/L;依据IC 50浓度检测50μmol/L DHA处理A549细胞0、24、48、72 h的细胞抑制率分别为1.53%、53.50%、63.84%和69.91%,分别与前一观察时间点即0、24和48 h相比,细胞抑制率均增高(P<0.01);集落形成实验结果显示,与对照组相比,DHA处理组的A549细胞集落形成数减少(P<0.01);流式细胞术结果显示,与对照组相比,DHA预处理组的A549细胞在共培养体系中诱导的CD8^(+)T细胞的比例、表达穿孔素和颗粒酶B的CD8^(+)T细胞比例均更高(P<0.01)。结论DHA能够抑制NSCLC细胞生长,促进NSCLC细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 非小细胞肺癌 肿瘤免疫 CD8^(+)T细胞 穿孔素 颗粒酶B
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双氢青蒿素通过促进活性氧的产生增强鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性 被引量：1
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作者 从小凡 陈腾 +6 位作者 李硕 王媛媛 周龙云 李小龙 张配 孙小锦 赵素容 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1553-1560,共8页
目的探究双氢青蒿素(DHA)与顺铂(DDP)联合应用对耐DDP鼻咽癌细胞株HNE1/DDP增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法CCK-8法检测不同浓度DHA(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)和不同浓度DDP(0、4、8、16、32、64、128μmol/L)处理24 h和... 目的探究双氢青蒿素(DHA)与顺铂(DDP)联合应用对耐DDP鼻咽癌细胞株HNE1/DDP增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法CCK-8法检测不同浓度DHA(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)和不同浓度DDP(0、4、8、16、32、64、128μmol/L)处理24 h和48 h后HNE1/DDP细胞的存活率;采用Compusyn软件计算DHA与DDP的联合指数。将HNE1/DDP细胞分为对照组、DHA组、DDP组、DHA联合DDP组,给药处理24 h后,CCK-8、EdU和集落克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞增殖和集落克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况和细胞内活性氧(ROS)水平;Western blotting检测凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3表达水平。ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸预处理后,检测其对DHA联合DDP诱导的细胞增殖、凋亡的影响。结果不同浓度DHA和不同浓度DDP均能明显抑制HNE1/DDP细胞活力,DHA(5μmol/L)联合DDP(8、16、32、64、128μmol/L)的联合指数均小于1。与DHA或DDP单独处理组相比,DHA联合DDP组细胞活力下降(P<0.01),集落形成数和EdU阳性染色细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率和细胞内ROS水平升高(P<0.01),细胞凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3的表达水平增加(P<0.05),而N-乙酰半胱氨酸预处理可部分逆转DHA联合DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用(P<0.01)。结论DHA增强DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与细胞内ROS的积累有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 双氢青蒿素 顺铂 活性氧 增殖 细胞凋亡
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双氢青蒿素的毛细管电泳高频电导法测定 被引量：4
10
作者 翟海云 徐健君 +3 位作者 陈缵光 王建伟 蔡沛祥 莫金垣 《分析科学学报》 CAS CSCD 2005年第6期599-602,共4页
采用毛细管电泳高频电导法对双氢青蒿素的快速分离检测进行了研究.对电泳介质的种类、浓度、添加剂以及操作电压和进样时间等影响因素进行了优化.实验选择的最佳条件为:分离介质4.0 mmol/L三乙胺-2.0 mmol/L H3BO3-15.0%C2H5OH,分离电压... 采用毛细管电泳高频电导法对双氢青蒿素的快速分离检测进行了研究.对电泳介质的种类、浓度、添加剂以及操作电压和进样时间等影响因素进行了优化.实验选择的最佳条件为:分离介质4.0 mmol/L三乙胺-2.0 mmol/L H3BO3-15.0%C2H5OH,分离电压22.0 kV,20.0 cm位差虹吸进样15.0 s.在该实验条件下,可在5 min内实现对双氢青蒿素的分离检测,双氢青蒿素的峰面积与含量在3.0～165 μg/mL范围线性关系良好,检出限为1.0μg/mL.成功测定了双氢青蒿素片剂中的双氢青蒿素,回收率达98.0%～103%.该方法简便、快速、成本低,可用于药物分析. 展开更多
关键词 毛细管电泳 高频电导检测 非接触式电导检测 双氢青蒿素 复方双氢青蒿素片
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双氢青蒿素对BXSB小鼠狼疮肾炎的作用及机制研究 被引量：25
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作者 董妍君 李卫东 +4 位作者 屠呦呦 张慧娜 邹万忠 杨岚 林志彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1125-1128,共4页
目的　观察双氢青蒿素 (Dihydroqinghaosu ,DQHS)对BXSB小鼠狼疮肾炎 (LN)病理改变的影响及对其肾组织核蛋白提取物中核转录因子 κB(NF κB)活化和NF κBp6 5蛋白表达的影响 ,探讨DQHS治疗系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus,... 目的　观察双氢青蒿素 (Dihydroqinghaosu ,DQHS)对BXSB小鼠狼疮肾炎 (LN)病理改变的影响及对其肾组织核蛋白提取物中核转录因子 κB(NF κB)活化和NF κBp6 5蛋白表达的影响 ,探讨DQHS治疗系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus,SLE)的分子机制。 方法　对低温冰冻肾组织进行免疫荧光检测 ;用Westernblot的方法检测肾组织核蛋白提取物中NF κBp6 5蛋白的表达 ;以凝胶电泳迁移率改变试验 (Electrophreticmobilityshiftassay ,EMSA)对NF κB的活化进行检测。结果　免疫荧光检测显示 :模型对照组及DQHS(5mg·kg-1)剂量组小鼠肾脏组织中多种免疫球蛋白 (IgG ,IgA ,IgM)和补体 (C3 ,C1q)的荧光检测呈强阳性 ,DQHS高剂量 (12 5mg·kg-1)和中剂量 (2 5mg·kg-1)组除IgG和补体C3 呈微弱阳性外 ,IgA ,IgM和补体C1q均为阴性 ;与正常组相比较 ,BXSB小鼠肾组织核蛋白提取物中NF κB的活化及其p6 5蛋白的表达均增加 ,其中 p6 5蛋白表达的增加差异具有显著性 (P <0 0 1) ;与模型组相比较 ,DQHS3个剂量 (12 5、2 5、5mg·kg-1)组BXSB小鼠肾组织核蛋白提取物中NF κB的活化及其p6 5蛋白的表达均有不同程度的降低 ,其中 p6 5蛋白表达的降低差异具有显著性 (P <0 0 1)。结论　DQHS能抑制肾组织中NF 展开更多
关键词 双氢青蒿素 BXSB小鼠 狼疮肾炎 NF-KB
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双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用 被引量：16
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作者 刘跃亮 罗进勇 +2 位作者 张彦 何通川 曾照芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1719-1723,共5页
目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色... 目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态变化。构建β-Catenin荧光素酶报告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)检测DHA作用143B后细胞内β-Catenin活性变化。不同浓度的DHA作用后,Western blot检测与细胞增殖(如PC-NA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相关的标志物蛋白质表达变化。结果 DHA作用于143B细胞24 h后,MTT结果显示143B细胞的增殖活性受到明显抑制,且其克隆形成能力减弱(P<0.05),在DHA浓度达35μmol.L-1时,抑制效率最明显。Western blot结果显示PC-NA表达下调;而促凋亡蛋白Bad和Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达明显减弱。结论双氢青蒿素具有较明显的抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能通过下调细胞增殖相关蛋白PCNA、Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,启动凋亡程序,致143B细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 人骨肉瘤细胞 细胞增殖 细胞凋亡 WNT信号通路 Β-CATENIN
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双氢青蒿素抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究 被引量：18
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作者 陈卫强 戚好文 +4 位作者 吴昌归 崔燕 刘斌 李焰 吴军正 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第2期85-88,共4页
背景与目的　研究发现,青蒿素类药物具有抗肿瘤活性。双氢青蒿素是青蒿素类药物中活性较强的衍生物。本研究的目的是观察双氢青蒿素对肺腺癌A549细胞生长的影响,以便为肺癌治疗提供实验依据。方法　双氢青蒿素对体外培养肺腺癌A549 细... 背景与目的　研究发现,青蒿素类药物具有抗肿瘤活性。双氢青蒿素是青蒿素类药物中活性较强的衍生物。本研究的目的是观察双氢青蒿素对肺腺癌A549细胞生长的影响,以便为肺癌治疗提供实验依据。方法　双氢青蒿素对体外培养肺腺癌A549 细胞的生长抑制作用采用MTT检测法,用细胞计数法绘制细胞生长曲线,计算对数生长期群体倍增时间,用流式细胞术检测细胞DNA含量,同时分析药物对细胞周期的影响。体内实验采用裸鼠移植瘤模型进行实验。结果　双氢青蒿素有较强的抑瘤效应,半数抑瘤浓度为0.23μmol/l。人肺腺癌A549细胞对数生长期群体倍增时间在对照组为21. 3 h,在双氢青蒿素作用组为38.5 h,两组比较有显著性差异(P<0.01)。流式细胞仪显示双氢青蒿素作用后G0 +G1 期细胞数增加。移植瘤体内试验显示双氢青蒿素的抑瘤率为54.3%。结论　双氢青蒿素对人肺腺癌A549 细胞在体内外均有生长抑制作用,体外作用与G0+G1 期阻滞有关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 肺肿瘤 裸鼠
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双氢青蒿素对小鼠T细胞的免疫抑制作用 被引量：20
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作者 叶燕霞 曾耀英 +3 位作者 黄秀艳 陆晓宇 曾祥凤 王希朝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期417-423,共7页
目的:研究双氢青蒿素(DHA)在体外对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制。方法:加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色法分析T细胞增殖... 目的:研究双氢青蒿素(DHA)在体外对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制。方法:加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色法分析T细胞增殖情况;利用流式细胞术(FCM)结合双色免疫荧光染色技术检测CD3+T细胞早、中、晚期活化标志CD69、CD25、CD71表达情况;用Fluo-4/AM荧光钙离子探针技术检测细胞内钙离子([Ca2+]i)浓度的变化;以碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布;运用流式细胞术(FCM)结合三色荧光染色技术检测CD4+CD25highTreg早期活化抗原CD69表达情况。结果:CFDA-SE染色结果显示,DHA能有效抑制ConA诱导的T细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性;DHA对ConA刺激的CD3+T细胞CD69、CD25的表达有促进作用,而对CD71的表达有抑制作用,均呈剂量依赖性;DHA单独作用不能引起T细胞[Ca2+]i的升高,在ConA的刺激下能引起[Ca2+]i浓度升高;PI染色流式分析结果显示,DHA阻滞细胞于G0/G1期,阻止细胞进入S期和G2/M期;DHA能够下调CD4+CD25highTreg细胞CD69的表达。结论:DHA对小鼠淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 免疫抑制 T淋巴细胞 CD4+CD25highTreg 流式细胞术
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经双氢青蒿素治疗后卡氏肺孢子虫肺炎大鼠的肺部病理学变化 被引量：11
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作者 李文桂 陈雅棠 +1 位作者 刘成伟 余登高 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期223-227,共5页
目的　研究经双氢青蒿素治疗后卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)大鼠肺部病理学变化。方法　以地塞米松磷酸钠皮下注射Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,用 6 0mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠 ,杀鼠取肺 ,用光镜和电镜观察肺部病理学变化 ... 目的　研究经双氢青蒿素治疗后卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)大鼠肺部病理学变化。方法　以地塞米松磷酸钠皮下注射Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,用 6 0mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠 ,杀鼠取肺 ,用光镜和电镜观察肺部病理学变化 ,同时设有感染对照组和正常对照组。结果　肺印片中卡氏肺孢子虫 (Pc)包囊数目显著减少 ,肺组织炎症明显减轻 ,Pc滋养体表膜和核膜破裂 ,胞质中出现大量空泡和高电子密度颗粒 ,Pc包囊中也出现空泡 ,囊内小体变性坏死。结论　双氢青蒿素可杀死Pc滋养体和包囊 ,从而减轻肺组织的炎症反应。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 治疗 卡氏肺孢子虫肺炎 大鼠 肺部 病理
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双氢青蒿素对肺癌细胞株H1299增殖与放疗增敏的影响 被引量：7
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作者 廖奎 王志令 +2 位作者 彭志平 李海玉 李娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期185-188,共4页
目的:研究双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对非小细胞肺癌H1299放疗增敏的影响。方法:通过CCK-8法测定双氢青蒿素的IC10,选择低毒剂量IC10作为实验浓度,采用CCK-8法测定DHA对H1299细胞增殖的影响;流式细胞术、Hoechest33258染色分... 目的:研究双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对非小细胞肺癌H1299放疗增敏的影响。方法:通过CCK-8法测定双氢青蒿素的IC10,选择低毒剂量IC10作为实验浓度,采用CCK-8法测定DHA对H1299细胞增殖的影响;流式细胞术、Hoechest33258染色分别检测DHA对细胞周期和凋亡的影响;软琼脂集落形成实验检测DHA对放疗敏感性的影响。结果:双氢青蒿素的IC10为14.87μmol/L,双氢青蒿素以剂量依赖性的方式抑制H1299细胞增殖,并使细胞阻滞在S期,增加放疗敏感性。结论:青蒿素能明显抑制细胞增殖,增加放疗敏感性。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 非小细胞肺癌 增殖 细胞周期 放疗敏感性
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高效液相色谱-质谱联用技术测定人血浆中双氢青蒿素的含量 被引量：10
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作者 洪馨 黄天来 +3 位作者 宓穗卿 叶少梅 欧卫平 王宁生 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期46-48,52,共4页
建立了测定人血浆中的双氢青蒿素的液相色谱 -质谱联用法。色谱条件 :AlltimaC18 柱 (2.1×150mm ,5μm ,流动相 :甲醇 -水 (体积比85∶15) ;流速 :0.2mL/min ;柱温 :25℃ ;进样量 :20μL。质谱条件 :电喷雾离子源 (ESI) ;用于定量... 建立了测定人血浆中的双氢青蒿素的液相色谱 -质谱联用法。色谱条件 :AlltimaC18 柱 (2.1×150mm ,5μm ,流动相 :甲醇 -水 (体积比85∶15) ;流速 :0.2mL/min ;柱温 :25℃ ;进样量 :20μL。质谱条件 :电喷雾离子源 (ESI) ;用于定量分析的离子分别为m/z307(双氢青蒿素) ,m/z275(蒿甲醚 )。样品用液 -液萃取方法处理。双氢青蒿素的线性范围为5～200μg·L -1,定量下限为5μg·L -1,日内、日间精密度 (RSD)均小于10 % ,萃取回收率在71.5 %～83.2 %之间 (n=5) ,分析方法回收率在98.4 %～101.9 %之间 (n=5)。本法操作简便、准确、灵敏度高 。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 高效液相色谱-质谱 血药浓度
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双氢青蒿素保护刀豆蛋白A诱导的小鼠肝损伤及机制探讨 被引量：13
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作者 李敏 金晓琨 李卫东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期630-633,共4页
目的研究双氢青蒿素(dihydroqinghaosu,DQHS)对刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用及可能机制。方法小鼠尾静脉注射ConA建立肝损伤模型;改良赖式法和ELISA法分别测定DQHS预给药对该模型小鼠血浆转氨酶和T... 目的研究双氢青蒿素(dihydroqinghaosu,DQHS)对刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用及可能机制。方法小鼠尾静脉注射ConA建立肝损伤模型;改良赖式法和ELISA法分别测定DQHS预给药对该模型小鼠血浆转氨酶和TNF-α水平的影响;MTT法检测DQHS对ConA诱导体外小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;RT-PCR检测DQHS对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞IL-1β和TNF-αmRNA表达水平的影响。结果与模型组比较,DQHS 40μg.g-1给药组可降低ConA诱导的肝损伤小鼠血浆转氨酶水平,各DQHS组均可降低该小鼠血浆TNF-α水平;DQHS 40μmol.L-1和100μmol.L-1处理组能抑制ConA诱导的体外脾淋巴细胞增殖,减少LPS刺激的巨噬细胞炎症因子IL-1β和TNF-αmRNA的表达。结论DQHS对ConA诱导的小鼠免疫性肝损伤有保护作用,该作用可能通过抑制脾淋巴细胞增殖和巨噬细胞相关炎症细胞因子表达来实现。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 刀豆蛋白A 肝损伤 淋巴细胞 RAW264.7细胞
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双氢青蒿素治疗实验大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的疗效观察 被引量：12
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作者 刘成伟 陈雅棠 +1 位作者 李文桂 余登高 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第3期261-263,267,共4页
目的：研究双氢青蒿素抬疗实验大鼠卡氏肺抱子虫肺炎的疗效。方法：Ｗｉ丑ａｒ大鼠皮下注射醋酸可的松建立卡氏肺泡子虫肺炎动物模型。用双氢青蒿素治疗实验大鼠同时设有感染组和正常组作为对照。通过存活数、存活率、肺重、肺重／体树... 目的：研究双氢青蒿素抬疗实验大鼠卡氏肺抱子虫肺炎的疗效。方法：Ｗｉ丑ａｒ大鼠皮下注射醋酸可的松建立卡氏肺泡子虫肺炎动物模型。用双氢青蒿素治疗实验大鼠同时设有感染组和正常组作为对照。通过存活数、存活率、肺重、肺重／体树重比、包囊计数和肺组织病理学变化考核药物疗效。结果：治疗组大鼠存活数、存活率均高于感染组，而低于正常组；治疗组大鼠平均肺重、平均肺重／体重比和包囊数均低于感染组，肺组织炎症反应明显减轻。结论：双氢青蒿素是一种治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的有效药物。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 卡氏肺泡子虫 治疗 药物 肺炎 PCP
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双氢青蒿素治疗狼疮肾炎与SIGIRR诱导免疫负调控的相关性 被引量：9
20
作者 黄明 金小康 +3 位作者 蔡庆超 李敏 林志彬 李卫东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1637-1641,1647,共6页
目的:探究双氢青蒿素(DHA)对狼疮肾炎的治疗作用与SIGIRR诱导的TLR4/NF-κB信号通路的相关性,并观察DHA对HK-2细胞炎性损伤的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、DHA(25、50、100 m/kg)治疗组、阳性对照组(强的松,5 mg/kg),另取C5... 目的:探究双氢青蒿素(DHA)对狼疮肾炎的治疗作用与SIGIRR诱导的TLR4/NF-κB信号通路的相关性,并观察DHA对HK-2细胞炎性损伤的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、DHA(25、50、100 m/kg)治疗组、阳性对照组(强的松,5 mg/kg),另取C57BL/6小鼠为正常对照组,共给药12周。HE染色观察肾脏病理学改变,Western blot法检测肾脏SIGIRR,IRAK1和TRAF6蛋白表达变化。在体外,以10μg/ml LPS刺激人肾小管上皮细胞HK-2细胞,分别加入0.67、2.00、6.00μg/ml DHA,以Western Blotting法检测药物分别作用6、12和24 h后SIGIRR蛋白表达情况,ELISA方法检测上清IL-6、CCL2的分泌水平。结果:体内实验中,肾脏病理结果显示模型组小鼠肾脏受损,DHA 100 mg/kg治疗组肾脏损伤有所减轻。DHA 100 mg/kg组相比模型组,SIGIRR蛋白表达有一定的升高,且随DHA剂量增加该蛋白表达有升高趋势。体外实验中,不同浓度DHA能抑制CCL2的分泌,0.67μg/ml DHA作用24 h能显著增加SIGIRR的表达,且SIGIRR表达量随着时间延长有逐渐升高趋势。结论:DHA对狼疮肾炎有一定的治疗作用,且与肾脏SIGIRR表达升高抑制TLR4/NF-κB信号通路的过度活化有关;DHA对LPS诱导的HK-2炎症损伤的抑制与抑制CCL2分泌及增加SIGIRR表达有关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 狼疮肾炎 MRL/LPR 单免疫球蛋白IL-1相关受体
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