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双氢睾酮和褪黑素在牦牛毛囊细胞中的互作效应研究
1
作者
张哓兰
赵志东
+1 位作者
石斌刚
胡江
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第12期5198-5208,共11页
【目的】揭示双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)和褪黑素(melatonin,MLT)在牦牛毛囊细胞中的互作效应,为阐明这两种激素在毛囊周期发育中的调控机制及其作为重要的信号分子在牦牛毛发性状选育中的应用提供依据。【方法】以牦牛真皮毛...
【目的】揭示双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)和褪黑素(melatonin,MLT)在牦牛毛囊细胞中的互作效应,为阐明这两种激素在毛囊周期发育中的调控机制及其作为重要的信号分子在牦牛毛发性状选育中的应用提供依据。【方法】以牦牛真皮毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)和表皮毛母质细胞(hair matrix cells,HMCs)为研究对象,利用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度DHT(0、0.01、0.1、1、10、20、40、80μmol/L)和MLT(0、250、500、600、750、1000、1500 pg/mL)对牦牛DPCs和HMCs增殖的影响;选择最佳浓度DHT和MLT联合处理HMCs,采用MTT法检测两种激素在牦牛HMCs中的互作效应,利用EdU进一步验证试验结果。利用实时荧光定量PCR检测DHT和MLT联合处理后细胞增殖及毛囊发育相关基因的表达情况,分析DHT和MLT可能的作用机制。【结果】与对照组(0μmol/L)相比,10~40μmol/L DHT可显著或极显著促进DPCs增殖(P<0.05;P<0.01),40~80μmol/L DHT可极显著促进HMCs增殖(P<0.01),其中40μmol/L DHT为促进DPCs和HMCs增殖的最佳浓度,此外,低浓度DHT(1μmol/L)可极显著抑制HMCs增殖(P<0.01)。与对照组(0 pg/mL)相比,500 pg/mL MLT对DPCs的促增殖作用最为明显(P<0.01),而不同浓度MLT对HMCs增殖均无明显作用(P>0.05)。使用40μmol/L DHT和500 pg/mL MLT联合处理HMCs 72 h,与DHT组相比,DHT+MLT联合处理对HMCs的促增殖作用极显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,DHT处理HMCs后极显著或显著改变了与毛囊发育相关基因LEF 1、SFRP 1、TGFB 2和BCL 2的表达量(P<0.01;P<0.05),提示DHT可能通过影响这些基因的表达参与调控毛囊的发育过程。【结论】牦牛DPCs和HMCs对DHT和MLT作用的敏感性不同,一定浓度的DHT均可显著促进DPCs和HMCs的增殖,低浓度DHT具有抑制HMCs增殖的趋势。500 pg/mL MLT是促进DPCs增殖的最佳浓度,不同浓度MLT对HMCs增殖均无明显作用。在HMCs中,MLT具有抗DHT作用的功能。
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关键词
牦牛
毛乳头细胞(DPCs)
毛母质细胞(HMCs)
双
氢
睾
酮
(
dht
)
褪黑素(MLT)
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职称材料
双氢睾酮对小鼠卵泡颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素表达的影响
2
作者
于凯
赵玉芬
+6 位作者
翁钰
王琴
郝绍瑜
于泊洋
杜晨光
苏布登格日勒
李海军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第8期3036-3043,共8页
【目的】探讨双氢睾酮(DHT)对小鼠颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素(AMH)表达的影响。【方法】给3周龄的昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG,10 IU/只)以获取颗粒细胞,颗粒细胞传代后48 h HE染色鉴定形态,绘制颗粒细胞的生长曲线,免疫荧光...
【目的】探讨双氢睾酮(DHT)对小鼠颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素(AMH)表达的影响。【方法】给3周龄的昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG,10 IU/只)以获取颗粒细胞,颗粒细胞传代后48 h HE染色鉴定形态,绘制颗粒细胞的生长曲线,免疫荧光法鉴定促卵泡素受体(FSHR)的表达。当第2代颗粒细胞汇合度达到50%时,先用无血清的DMEM/F12培养基饥饿处理12 h,然后在培养基中添加不同浓度的DHT(0、10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)mol/L),培养48 h后检测颗粒细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法及ELISA法分别测定AMH基因及蛋白的表达。在颗粒细胞培养液中分别添加10^(-6)mol/L Flutamide(雄激素受体(AR)特异性抑制剂)、10^(-7)mol/L DHT、10^(-7)mol/L DHT+10^(-6)mol/L Flutamide、10^(-5)mol/L DHT、10^(-5)mol/L DHT+10^(-8)mol/L 11-ketodihydrotestosterone(AR特异性激动剂),分别记为F、D7、DF、D5、DK组,以不添加药物为对照组。培养48 h后,检测各组颗粒细胞增殖及AMH蛋白含量。【结果】体外培养的小鼠颗粒细胞呈梭形或铺路石状,生长曲线呈S形,细胞普遍表达FSHR;与0 mol/L DHT组相比,10^(-8)、10^(-7)mol/L DHT组细胞增殖分别显著和极显著增加(P<0.05;P<0.01),10^(-5)mol/L DHT组细胞增殖显著降低(P<0.05);10^(-7)mol/L DHT组AMH基因的相对表达量和AMH蛋白含量均极显著增加(P<0.01)。与D7组相比,DF组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著降低(P<0.01);与D5组相比,DK组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著升高(P<0.01)。【结论】10^(-7)mol/L DHT能够显著促进颗粒细胞增殖和AMH表达,而10^(-5)mol/L显著降低了颗粒细胞增殖以及AMH表达,且AR介导了DHT调控颗粒细胞增殖和AMH表达。
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关键词
小鼠
颗粒细胞
双
氢
睾
酮
(
dht
)
雄激素受体(AR)
抗缪勒管激素(AMH)
细胞增殖
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职称材料
题名
双氢睾酮和褪黑素在牦牛毛囊细胞中的互作效应研究
1
作者
张哓兰
赵志东
石斌刚
胡江
机构
甘肃农业大学动物科学技术学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第12期5198-5208,共11页
基金
甘肃省青年科技基金(23JRRA1435)
甘肃农业大学学科团队项目(GAU-XKTD-2022-22)。
文摘
【目的】揭示双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)和褪黑素(melatonin,MLT)在牦牛毛囊细胞中的互作效应,为阐明这两种激素在毛囊周期发育中的调控机制及其作为重要的信号分子在牦牛毛发性状选育中的应用提供依据。【方法】以牦牛真皮毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)和表皮毛母质细胞(hair matrix cells,HMCs)为研究对象,利用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度DHT(0、0.01、0.1、1、10、20、40、80μmol/L)和MLT(0、250、500、600、750、1000、1500 pg/mL)对牦牛DPCs和HMCs增殖的影响;选择最佳浓度DHT和MLT联合处理HMCs,采用MTT法检测两种激素在牦牛HMCs中的互作效应,利用EdU进一步验证试验结果。利用实时荧光定量PCR检测DHT和MLT联合处理后细胞增殖及毛囊发育相关基因的表达情况,分析DHT和MLT可能的作用机制。【结果】与对照组(0μmol/L)相比,10~40μmol/L DHT可显著或极显著促进DPCs增殖(P<0.05;P<0.01),40~80μmol/L DHT可极显著促进HMCs增殖(P<0.01),其中40μmol/L DHT为促进DPCs和HMCs增殖的最佳浓度,此外,低浓度DHT(1μmol/L)可极显著抑制HMCs增殖(P<0.01)。与对照组(0 pg/mL)相比,500 pg/mL MLT对DPCs的促增殖作用最为明显(P<0.01),而不同浓度MLT对HMCs增殖均无明显作用(P>0.05)。使用40μmol/L DHT和500 pg/mL MLT联合处理HMCs 72 h,与DHT组相比,DHT+MLT联合处理对HMCs的促增殖作用极显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,DHT处理HMCs后极显著或显著改变了与毛囊发育相关基因LEF 1、SFRP 1、TGFB 2和BCL 2的表达量(P<0.01;P<0.05),提示DHT可能通过影响这些基因的表达参与调控毛囊的发育过程。【结论】牦牛DPCs和HMCs对DHT和MLT作用的敏感性不同,一定浓度的DHT均可显著促进DPCs和HMCs的增殖,低浓度DHT具有抑制HMCs增殖的趋势。500 pg/mL MLT是促进DPCs增殖的最佳浓度,不同浓度MLT对HMCs增殖均无明显作用。在HMCs中,MLT具有抗DHT作用的功能。
关键词
牦牛
毛乳头细胞(DPCs)
毛母质细胞(HMCs)
双
氢
睾
酮
(
dht
)
褪黑素(MLT)
Keywords
yak
dermal papilla cells(DPCs)
hair matrix cells(HMCs)
dihydrotestosterone(
dht
)
melatonin(MLT)
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
双氢睾酮对小鼠卵泡颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素表达的影响
2
作者
于凯
赵玉芬
翁钰
王琴
郝绍瑜
于泊洋
杜晨光
苏布登格日勒
李海军
机构
内蒙古农业大学兽医学院
内蒙古自治区基础兽医学重点实验室
内蒙古医科大学基础医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第8期3036-3043,共8页
基金
国家自然科学基金(31760717)
2020年内蒙古医科大学“科技百万工程”项目(YKD2020KJBW001)
呼和浩特科技计划资助项目(2020-科技兴蒙-国创中心-12)。
文摘
【目的】探讨双氢睾酮(DHT)对小鼠颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素(AMH)表达的影响。【方法】给3周龄的昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG,10 IU/只)以获取颗粒细胞,颗粒细胞传代后48 h HE染色鉴定形态,绘制颗粒细胞的生长曲线,免疫荧光法鉴定促卵泡素受体(FSHR)的表达。当第2代颗粒细胞汇合度达到50%时,先用无血清的DMEM/F12培养基饥饿处理12 h,然后在培养基中添加不同浓度的DHT(0、10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)mol/L),培养48 h后检测颗粒细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法及ELISA法分别测定AMH基因及蛋白的表达。在颗粒细胞培养液中分别添加10^(-6)mol/L Flutamide(雄激素受体(AR)特异性抑制剂)、10^(-7)mol/L DHT、10^(-7)mol/L DHT+10^(-6)mol/L Flutamide、10^(-5)mol/L DHT、10^(-5)mol/L DHT+10^(-8)mol/L 11-ketodihydrotestosterone(AR特异性激动剂),分别记为F、D7、DF、D5、DK组,以不添加药物为对照组。培养48 h后,检测各组颗粒细胞增殖及AMH蛋白含量。【结果】体外培养的小鼠颗粒细胞呈梭形或铺路石状,生长曲线呈S形,细胞普遍表达FSHR;与0 mol/L DHT组相比,10^(-8)、10^(-7)mol/L DHT组细胞增殖分别显著和极显著增加(P<0.05;P<0.01),10^(-5)mol/L DHT组细胞增殖显著降低(P<0.05);10^(-7)mol/L DHT组AMH基因的相对表达量和AMH蛋白含量均极显著增加(P<0.01)。与D7组相比,DF组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著降低(P<0.01);与D5组相比,DK组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著升高(P<0.01)。【结论】10^(-7)mol/L DHT能够显著促进颗粒细胞增殖和AMH表达,而10^(-5)mol/L显著降低了颗粒细胞增殖以及AMH表达,且AR介导了DHT调控颗粒细胞增殖和AMH表达。
关键词
小鼠
颗粒细胞
双
氢
睾
酮
(
dht
)
雄激素受体(AR)
抗缪勒管激素(AMH)
细胞增殖
Keywords
mice
granulosa cells
dihydrotestosterone(
dht
)
androgen receptor(AR)
anti-Müllerian hormone(AMH)
cell proliferation
分类号
Q28 [生物学—细胞生物学]
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题名
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双氢睾酮和褪黑素在牦牛毛囊细胞中的互作效应研究
张哓兰
赵志东
石斌刚
胡江
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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职称材料
2
双氢睾酮对小鼠卵泡颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素表达的影响
于凯
赵玉芬
翁钰
王琴
郝绍瑜
于泊洋
杜晨光
苏布登格日勒
李海军
《中国畜牧兽医》
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