双抗夹心酶联免疫吸附法检测沙门氏菌 被引量：36

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作者 伍燕华 牛瑞江 +4 位作者 赖卫华 山珊 刘道峰 倪小琴 冯荣华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期62-65,共4页

沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门... 沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门氏菌单克隆抗体C1359作为检测抗体,建立快速检测沙门氏菌双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法可以检测A、B、C、D、E等五种典型的沙门氏菌,对沙门氏菌纯培养液的最低检测量为1×104CFU/mL,与其他杂菌不存在交叉反应,具有较好的灵敏性和特异性。 展开更多

关键词 沙门氏菌 多克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附法

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酶联免疫吸附分析双抗夹心法检测临床鼻咽抽吸物中呼吸道合胞病毒 被引量：3

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作者 孙永鹏 靳输梅 +5 位作者 詹炉停 温桂平 赵敏 张伟 夏宁邵 郑子峥 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期505-510,共6页

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医... 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医疗机构中推广,国内尚无上市的快速诊断试剂用于临床检测.为此建立用于RSV抗原检测的早期快速诊断试剂,并以反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测为参比,同时使用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗夹心法和免疫荧光法对112份临床鼻咽抽吸物(NPA)样本进行检测.ELISA双抗夹心法和免疫荧光法的灵敏度分别为79.31%和74.14%,特异度分别为100%和96.30%,Kappa值分别为0.787 1和0.689 5,两者均与RT-PCR检测结果具有高度一致性.此外,将ELISA双抗夹心法与免疫荧光法比较,两者无显著差异(p>0.05).综上,ELISA双抗夹心法操作简便,特异性高,有望代替进口检测试剂盒完成RSV感染的早期快速诊断. 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 融合蛋白 酶联免疫吸附分析双抗夹心法 快速诊断

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牛初乳中免疫球蛋白G双抗夹心ELISA检测方法的建立 被引量：2

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作者 刘金 王丽威 岳喜庆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第14期74-79,共6页

将牛免疫球蛋白G（immunoglobulin G,Ig G）作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选获得分泌抗牛Ig G单克隆抗体的细胞株。制备小鼠腹水抗体,进一步纯化获得抗牛Ig G单克隆抗体。建立双抗夹心酶联免疫吸附法检测牛初乳中Ig G质量... 将牛免疫球蛋白G（immunoglobulin G,Ig G）作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选获得分泌抗牛Ig G单克隆抗体的细胞株。制备小鼠腹水抗体,进一步纯化获得抗牛Ig G单克隆抗体。建立双抗夹心酶联免疫吸附法检测牛初乳中Ig G质量浓度,该方法在7.8~1 000 ng/m L范围内有良好的线性关系,最低检出限为7.06 ng/m L,批内变异系数为4.52%,批间变异系数为4.94%,回收率为91.85%~102.45%。此法操作简便、准确度高、稳定性好,可用于实际牛初乳样品的快速检测。 展开更多

关键词 牛初乳 免疫球蛋白G 单克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附法

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夹心酶联免疫吸附试验检测人表皮生长因子的方法建立及其应用研究

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作者 夏勇 吴学诗 张美英 《实用医学杂志》 CAS 2005年第14期1588-1590,共3页

目的:建立临床适用的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)酶联免疫检测方法,探讨EGF在临床常见肿瘤患者血清中的含量变化规律。方法:采用EGF单抗包被酶标板,兔抗EGF多抗为二抗,以辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG作为酶标抗体建立夹... 目的:建立临床适用的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)酶联免疫检测方法,探讨EGF在临床常见肿瘤患者血清中的含量变化规律。方法:采用EGF单抗包被酶标板,兔抗EGF多抗为二抗,以辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG作为酶标抗体建立夹心法ELISA检测临床常见肿瘤患者及健康体检人群的血清EGF含量。结果:建立的EGF酶联免疫吸附法最小检测限达15.6ng/L,批内精密度为8.7%,批间精密度为11.6%,平均回收率为94.7%,符合临床检测要求。血清EGF含量在31名正常人为(1.305±0.382)ng/mL,24名乳腺癌病人术前值为(0.729±0.347)ng/mL,术后为(0.711±0.332)ng/mL,17名结直肠癌病人术前为(0.678±0.311)ng/mL,术后为(0.658±0.298)ng/mL,19名胃癌病人术前为(0.598±0.224)ng/mL,术后为(0.614±0.257)ng/mL。各肿瘤组患者血清EGF水平较健康对照组明显降低(P<0.01)。结论:建立了适用于临床检测的EGF酶联免疫检测方法,肿瘤患者血清中EGF含量较健康对照组明显下降,该检测方法的建立为进一步探讨肿瘤的发病机制提供了有效的手段。 展开更多

关键词 夹心酶联免疫吸附试验 人表皮生长因子 方法建立 酶联免疫检测方法 血清EGF elisa检测 酶联免疫吸附法 健康对照组 factor 含量变化规律 肿瘤患者 辣根过氧化物 病人术前 临床常见 临床检测 批间精密度 平均回收率 体检人群

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胸腺素α1间接ELISA测定方法的建立及其在转基因蓝藻中的应用 被引量：2

5

作者 朱笃 陈天圣 +3 位作者 李元广 叶勤 章军 周克夫 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1-4,共4页

利用胸腺素α1(Tα1)_小牛血清白蛋白融合蛋白免疫新西兰兔获得的抗体 ,建立了Tα1间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以定量检测转Tα1基因聚球藻7942外源基因表达产物胸腺素α1 ,实验结果表明该方法灵敏度高、专一性强、重复性好 ,可... 利用胸腺素α1(Tα1)_小牛血清白蛋白融合蛋白免疫新西兰兔获得的抗体 ,建立了Tα1间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以定量检测转Tα1基因聚球藻7942外源基因表达产物胸腺素α1 ,实验结果表明该方法灵敏度高、专一性强、重复性好 ,可用于转基因微藻Tα1表达量的定量检测 ,同时表明Tα1基因能在聚球藻7942中稳定表达。 展开更多

关键词 胸腺素Α1 间接elisa 测定方法 转基因蓝藻 应用 酶联免疫测定法 聚球藻7942

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夹心ELISA法对奶牛早期妊娠的诊断及注意事项

6

作者 张楠楠 张佩华 +1 位作者 刘光磊 王传蓉 《浙江畜牧兽医》 2018年第6期15-17,共3页

奶牛在怀孕后体内会生成一种妊娠蛋白,这种蛋白称为妊娠特异性蛋白B(PSPB)。它是由胚胎分离得到的几种天冬氨酸蛋白酶家族的混合物。1987年Garth.Sasser教授发现^[1-2],PSPB可用作牛羊等反刍动物早期孕检的有效标记物,然而它只有当奶牛... 奶牛在怀孕后体内会生成一种妊娠蛋白,这种蛋白称为妊娠特异性蛋白B(PSPB)。它是由胚胎分离得到的几种天冬氨酸蛋白酶家族的混合物。1987年Garth.Sasser教授发现^[1-2],PSPB可用作牛羊等反刍动物早期孕检的有效标记物,然而它只有当奶牛怀孕时才会释放。随着配种时间的延长,这种蛋白在体内的浓度将越来越明显,尤其是在怀孕后的28d至33d,这种蛋白的浓度值达到高峰。优孕凯斯(BioPRYN)是一种使用抗原捕捉(夹心),酶联免疫吸附法(ELISA)检测牛只血清中妊娠特异性蛋白B(PSPB)的早期妊娠诊断技术。 展开更多

关键词 elisa法 妊娠诊断技术 早期妊娠 奶牛 夹心 特异性蛋白 天冬氨酸蛋白酶 酶联免疫吸附法

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鸡组织中新霉素残留的ELISA检测方法的研究 被引量：9

7

作者 商艳红 陈义强 +2 位作者 吴小平 阚鹿枫 肖希龙 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第7期90-91,共2页

关键词 elisa检测方法 最高残留限量 新霉素 鸡组织 氨基糖甙类抗生素 酶联免疫测定法 高效液相色谱法 革兰氏阴性菌

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猪口蹄疫快速监控技术与ELISA技术的对比分析

8

作者 徐建平 《畜牧兽医科技信息》 2015年第5期39-39,共1页

1猪口蹄疫快速检测卡简介1.1监测卡的原理检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待... 1猪口蹄疫快速检测卡简介1.1监测卡的原理检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式,即为金标试纸条。 展开更多

关键词 猪口蹄疫 elisa技术 检测卡 金标法 试纸条 酶联免疫吸附法 免疫测定 胶体金 阴性血清 试剂盒

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猪瘟快速检测卡与ELISA技术的对比分析 被引量：1

9

作者 刘志强 徐建平 《中国畜禽种业》 2015年第5期81-81,共1页

1猪瘟快速检测卡简介 1.1监测卡的原理 检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待... 1猪瘟快速检测卡简介 1.1监测卡的原理 检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式,即为金标试纸条。判定标准：猪瘟抗体阳性≥1：32（5log2）;猪瘟抗体阴性〈1：32（5log2）。 展开更多

关键词 检测卡 elisa技术 金标法 试纸条 酶联免疫吸附法 免疫测定 胶体金 阴性血清 试剂盒 毛细管作用

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ELISA技术在犬病毒与抗体检测中的应用

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作者 修福晓 《山东畜牧兽医》 2010年第5期78-79,共2页

ELISA即酶联免疫吸附测定，是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性、特异性较高的试验技术。比较常用的ELISA方法有双抗体夹心法和间接法。ELISA主要用在人、猪、禽等传染病... ELISA即酶联免疫吸附测定，是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性、特异性较高的试验技术。比较常用的ELISA方法有双抗体夹心法和间接法。ELISA主要用在人、猪、禽等传染病的病原及抗体检测。 展开更多

关键词 elisa技术 抗体检测 酶联免疫吸附测定 犬病毒 elisa方法 应用 双抗体夹心法 高效催化

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实时荧光RT-PCR检测辣椒轻斑驳病毒的初步研究 被引量：8

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作者 郭京泽 李兴红 +3 位作者 廖芳 张文明 刘鹏 刘跃庭 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期117-120,共4页

本研究选取辣椒轻斑驳病毒PMMoV、烟草花叶病毒TMV、黄瓜花叶病毒CMV和马铃薯Y病毒PVY作为试验材料,根据PMMoV衣壳蛋白(CP)RNA的序列特异性位点,设计出Taqman荧光探针及其引物,采用实时荧光RT-PCR技术对PMMoV进行快速检测,同时与ELISA... 本研究选取辣椒轻斑驳病毒PMMoV、烟草花叶病毒TMV、黄瓜花叶病毒CMV和马铃薯Y病毒PVY作为试验材料,根据PMMoV衣壳蛋白(CP)RNA的序列特异性位点,设计出Taqman荧光探针及其引物,采用实时荧光RT-PCR技术对PMMoV进行快速检测,同时与ELISA方法进行了灵敏度比较,结果表明:该方法具有较高的灵敏度及较强的特异性,PMMoV检测结果为阳性,TMV、CMV和PVY均无荧光信号,为阴性,灵敏度是传统的ELISA方法的100倍,而且大大缩短了检测时间。该方法快速、准确、灵敏、简便、安全,具有实际应用价值,适用于植物病毒病害的快速检测。 展开更多

关键词 辣椒轻斑驳病毒 实时荧光RT-PCR 双抗夹心酶联免疫吸附法

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李属坏死环斑病毒(PNRSV)新疆巴旦木分离物外壳蛋白基因(CP)片断的克隆与序列分析 被引量：4

12

作者 殷智婷 韩剑 +3 位作者 周国辉 张祥林 罗明 潘亚南 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期740-746,共7页

【目的】为了查明新疆巴旦木果树病原病毒的种类,为病毒的分子检测提供基础。【方法】采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA),从巴旦木果树叶片中检测到李属坏死环斑病毒(PNRSV)。以阳性样品的总RNA为模板进行PNRSV外壳蛋白基因(CP)R... 【目的】为了查明新疆巴旦木果树病原病毒的种类,为病毒的分子检测提供基础。【方法】采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA),从巴旦木果树叶片中检测到李属坏死环斑病毒(PNRSV)。以阳性样品的总RNA为模板进行PNRSV外壳蛋白基因(CP)RT-PCR扩增,对预期430 bp大小的4个扩增产物进行克隆、测序和序列分析。【结果】结果表明,PNRSV新疆巴旦木分离物CP基因的核苷酸和氨基酸序列与世界各地已报道的分离物具有较高的同源性,分别为80.0%～97.2%和80.1%～94.1%,其中与阿根廷分离物AY217的同源性最高;而与同属03亚组的苹果花叶病毒(ApMV)同源性较低,仅为52.9%～55.4%和45.6%～48.6%。新疆PNRSV各分离物之间CP基因高度同源。序列比对与系统发生树的分析显示,PNRSV新疆巴旦木分离物的株系属于GroupⅠ组。【结论】确定了PNRSV为侵染新疆巴旦木果树的病原病毒。这是PNRSV在新疆发现的首次报道。 展开更多

关键词 巴旦木 李属坏死环斑病毒(PNRSV) 双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS—elisa) RT—PCR CP基因

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白介素-2在分泌性中耳炎中的临床意义 被引量：16

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作者 陈穗俊 梁象逢 +3 位作者 郑亿庆 刘伟 许耀东 刘翔 《中华耳科学杂志》 CSCD 2005年第2期93-96,共4页

目的本实验对分泌性中耳炎患者的中耳积液标本进行白介素-2(IL-2)浓度检测和分析,以探索其在分泌性中耳炎中的临床意义。方法用双抗夹心酶联免疫吸附法检测中耳积液、患者血清及对照血清中IL-2的浓度。结果实验组中耳积液中IL-2的浓度... 目的本实验对分泌性中耳炎患者的中耳积液标本进行白介素-2(IL-2)浓度检测和分析,以探索其在分泌性中耳炎中的临床意义。方法用双抗夹心酶联免疫吸附法检测中耳积液、患者血清及对照血清中IL-2的浓度。结果实验组中耳积液中IL-2的浓度明显高于血清中的浓度;实验组血清中IL-2的浓度较对照组血清高;急性期组IL-2含量较慢性期组高;行首次穿刺及二次穿刺患者之间,中耳积液中IL-2的浓度无明显差异(P>0.05);而行三次或三次以上穿刺者中耳积液中该因子的浓度则明显升高(P<0.01)。结论中耳积液中的IL-2是由中耳腔局部产生的,而非单纯由血液中渗透而来;中耳积液中IL-2的高浓度可作为分泌性中耳炎转为慢性病程或迁延不愈的参考。 展开更多

关键词 分泌性中耳炎 临床意义 白介素-2 双抗夹心酶联免疫吸附法 中耳积液 IL-2 检测和分析 对照血清 迁延不愈 慢性病程 实验组 浓度 患者 对照组 慢性期 急性期 穿刺 中耳腔 三次

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mCry1Ac基因在抗虫转基因玉米Bt799中的表达特征 被引量：3

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作者 杨丽丽 董姗姗 +2 位作者 刘燕 王长永 袁艺 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期670-673,共4页

采用双抗夹心酶联免疫法(ELISA)定量检测转mCry1 Ac基因抗虫玉米Bt799在不同生育期不同植株部位的mCry1Ac蛋白含量。结果显示:mCry1 Ac基因在整个生育期玉米叶、茎、根和种子中均能表达,mCry1Ac蛋白含量为(0.82±0.10)^(15.83±... 采用双抗夹心酶联免疫法(ELISA)定量检测转mCry1 Ac基因抗虫玉米Bt799在不同生育期不同植株部位的mCry1Ac蛋白含量。结果显示:mCry1 Ac基因在整个生育期玉米叶、茎、根和种子中均能表达,mCry1Ac蛋白含量为(0.82±0.10)^(15.83±1.77)μg·g-1;随着生育期和植株部位的不同,mCry1Ac蛋白含量呈现明显的时空动态变化,其中,叶、茎和根中mCry1Ac蛋白含量随转基因玉米生育期的推移均呈增加趋势,并均在完熟期达最高;在除苗期外的其他各生育期叶中mCry1Ac蛋白含量均显著高于其他植株部位,而在完熟期种子中mCry1Ac蛋白含量在各植株部位中最低,为(2.86±1.71)μg·g-1。 展开更多

关键词 mCry1Ac基因 转基因玉米 双抗夹心酶联免疫法(elisa) BT蛋白

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苜蓿花叶病毒和白三叶草花叶病毒复合侵染对本氏烟中5种激素含量的影响 被引量：9

15

作者 岳阳 梁巧兰 +5 位作者 魏列新 何辉 孟秀鹏 姜玉玲 蔺珂 陈应娥 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2255-2265,共11页

为探明苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)和白三叶草花叶病毒(white clover mosaic virus,WCMV)复合侵染的协生作用致病机理,以复合接种AMV+WCMV的本氏烟为处理,分别以单独接种AMV、WCMV、磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0,PBS)的本氏烟为对... 为探明苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)和白三叶草花叶病毒(white clover mosaic virus,WCMV)复合侵染的协生作用致病机理,以复合接种AMV+WCMV的本氏烟为处理,分别以单独接种AMV、WCMV、磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0,PBS)的本氏烟为对照,采用DAS-ELISA(double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay)方法检测了接种病毒72 h的本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片中的病毒含量及72~720 h内水杨酸(salicylic acid,SA)、茉莉酸(jasmonic acid,JA)、独脚金内酯(strigolactones,SLs)、油菜素内酯(brassinolide,BR)、乙烯(ethylene,ETH)含量的变化。结果表明:AMV和WCMV接种比例为3∶1的植株720 h时的发病症状比单独接种一种病毒(AMV或WCMV)明显,主要症状表现为轻花叶、斑驳花叶、重花叶、明脉、皱缩。检测接种72 h时叶片病毒浓度发现,接种比例3∶1的植株中AMV的浓度比单独接种AMV以及AMV和WCMV接种比例为1꞉1和1꞉3的处理高,而WCMV的浓度略低于其单独接种WCMV处理,高于AMV和WCMV接种比例为1꞉1和1꞉3的处理;接种AMV和WCMV混合液后复合侵染的本氏烟叶片中SA、JA、SLs、BR、ETH含量在一定时间内与单独接种AMV、WCMV及对照之间差异显著(P<0.05),其中,AMV和WCMV接种比例为3∶1的混合液可在一定时间段内提高本氏烟叶片中SA(216~504 h)、SLs(216~432 h)、BR(216~504 h)、ETH(288~720 h)含量,降低JA(216~504 h)含量,其SA、SLs、BR、ETH含量分别比单独接种AMV、WCMV和健康植株(CK)提高了36.27%以上,JA含量降低了59.09%多。 展开更多

关键词 本氏烟 水杨酸 茉莉酸 独角金内酯 油菜素内酯 乙烯 双抗夹心酶联免疫吸附法

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洛阳地区猪戊型肝炎的血清流行病学调查 被引量：2

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作者 翟凯 《畜禽业》 2022年第6期24-26,共3页

为调查洛阳地区猪戊型肝炎病毒的感染情况,采集该地区规模化猪场和散养户猪血清样品226份,通过双抗夹心酶联免疫测定法(ELISA)对血清中戊型肝炎病毒抗体进行检测。结果显示,洛阳地区猪戊型肝炎病毒抗体阳性率高达63.7%(144/226)。4个地... 为调查洛阳地区猪戊型肝炎病毒的感染情况,采集该地区规模化猪场和散养户猪血清样品226份,通过双抗夹心酶联免疫测定法(ELISA)对血清中戊型肝炎病毒抗体进行检测。结果显示,洛阳地区猪戊型肝炎病毒抗体阳性率高达63.7%(144/226)。4个地区中最高的是伊川,阳性率为68.1%,最低的是新安县,阳性率为51.7%;散养猪(57.2%)的戊型肝炎病毒感染率低于养殖场饲养猪(75.3%);母猪的血清抗体阳性率(67.0%)与架子猪(61.4%)差异不明显。研究结果表明,洛阳地区猪感染戊型肝炎病毒非常普遍,且感染率较高。 展开更多

关键词 猪 戊型肝炎病毒 双抗夹心酶联免疫测定法(elisa) 抗体

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