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布鲁氏菌双抗夹心ELISA检测方法的建立与初步验证
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作者 姚梦欣 彭泽宇 +5 位作者 任文浩 徐艺玫 郭伟 陈创夫 马忠臣 王勇 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期255-262,共8页
目的 建立灵敏、特异的布鲁氏菌双抗体夹心ELISA检测方法。方法 筛选用于布鲁氏菌检测的单克隆捕获抗体和检测抗体,优化并确定最佳抗体包被时间和浓度,最佳封闭液、封闭时间和阴阳性临界值;通过检验其他易与布鲁氏菌发生交叉反应的细菌... 目的 建立灵敏、特异的布鲁氏菌双抗体夹心ELISA检测方法。方法 筛选用于布鲁氏菌检测的单克隆捕获抗体和检测抗体,优化并确定最佳抗体包被时间和浓度,最佳封闭液、封闭时间和阴阳性临界值;通过检验其他易与布鲁氏菌发生交叉反应的细菌来验证该方法的特异性;通过对灭活布鲁氏菌梯度稀释液的检测,验证该方法的灵敏性;将该夹心ELISA检测结果与试管凝集和qPCR检测结果进行比较。结果 筛选出的捕获抗体为4A12,检测抗体为6C12。试验分析显示,捕获抗体4A12的最佳包被浓度为5μg/mL,检测抗体6C12的最佳稀释比为1∶2 000。该研究的最佳包被条件为4℃过夜、5%脱脂奶粉封闭、封闭时间2 h。该研究建立的双抗体夹心ELISA方法只与布鲁氏菌发生反应,与其他细菌未发生反应;布鲁氏菌灭活菌液浓度稀释到1×10^(5) CFU/mL时仍能检测出。批内、批间变异系数均小于10%。结论 该研究成功建立了布鲁氏菌双抗夹心ELISA检测方法,该方法具有良好的特异性与灵敏性,为布鲁氏菌病的精确诊断和有效防控提供有效途径。 展开更多
关键词 单克隆抗体 布鲁氏菌 双抗夹心elisa 诊断
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一种快速精准检测各种乳品中牛乳铁蛋白含量的广适性ELISA方法
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作者 张婧 朱孔迪 +3 位作者 刘传铭 刘长振 王鹏杰 黄家强 《中国乳业》 2025年第3期91-99,共9页
[目的]验证夹心法ELISA技术是否可成为包括风味发酵乳在内的各种乳制品中牛乳铁蛋白含量的精准检测方法。[方法]利用优化的夹心法ELISA检测试剂分别检测牛乳铁蛋白(LTF)标准品溶液、巴氏杀菌乳样本、加标巴氏杀菌乳样本、12种北京地区... [目的]验证夹心法ELISA技术是否可成为包括风味发酵乳在内的各种乳制品中牛乳铁蛋白含量的精准检测方法。[方法]利用优化的夹心法ELISA检测试剂分别检测牛乳铁蛋白(LTF)标准品溶液、巴氏杀菌乳样本、加标巴氏杀菌乳样本、12种北京地区市场常见的风味发酵乳、7种加标风味发酵乳、7种混合巴氏杀菌乳的风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量,计算加标回收率及CV值。用该检测试剂检测3种加标风味发酵乳中牛乳铁蛋白对72℃热处理的敏感度;并与牛乳铁蛋白国标检测(高效液相色谱法)方法对比检测生乳和巴氏灭菌乳。[结果]该检测试剂可检测牛乳铁蛋白(LTF)标准品溶液和巴氏杀菌乳样本中牛乳铁蛋白,且加标回收率91.7%~106.4%。经检测,12种风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量为无;7种加标风味发酵乳的加标回收率86.3%~109.1%,且检测CV值远低于12%;7种风味发酵乳与巴氏杀菌乳混合乳中牛乳铁蛋白含量与对照组比值在92.3%~110.5%,且大多数检测CV值远低于12%;3种加标风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量随72℃加热时间延长而降低,且下降曲线相似。与国家标准方法对比分析,夹心法ELISA方法检测生乳和巴氏杀菌乳乳铁蛋白含量的符合率分别为97.54%、111.2%,说明该检测方法的准确性达到国标标准。[结论]夹心法ELISA检测试剂可精准检测风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量。 展开更多
关键词 牛乳铁蛋白 风味发酵乳 夹心elisa
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双抗体夹心ELISA法检测肺炎支原体抗原方法的研究 被引量:1
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作者 崔玉明 蔡平生 +3 位作者 郭善原 李君 刘俊茹 卜桦 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期120-121,共2页
关键词 双抗全夹心elisa法 检测 肺炎支原体 肺炎支原体抗原 肺炎支原体感染
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检测可溶性B7-H4 ELISA夹心法的建立 被引量:29
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作者 胡国艳 郑淑华 +4 位作者 刘伟 那志萍 肖欢 张良清 徐军发 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期831-833,共3页
目的:建立定量检测可溶性B7-H4的ELISA夹心法。方法:采用抗人B7-H4单克隆抗体(mAb)包被酶标板,以兔抗鼠B7-H4多克隆抗体为夹心抗体、HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组小鼠可溶性B7-H4为标准品,建立检测可溶性B7-H4的间接ELISA法,并对5... 目的:建立定量检测可溶性B7-H4的ELISA夹心法。方法:采用抗人B7-H4单克隆抗体(mAb)包被酶标板,以兔抗鼠B7-H4多克隆抗体为夹心抗体、HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组小鼠可溶性B7-H4为标准品,建立检测可溶性B7-H4的间接ELISA法,并对50例正常人和37例术后乳腺癌患者血清样本进行了检测。结果:建立的夹心ELISA法检测B7-H4的线性范围为3.13μg/L^200μg/L,批内、批间变异系数分别为7.92%和11.1%。50例正常人和37例术后乳腺癌患者血清B7-H4的含量分别为(31.62±9.85)μg/L和(42.52±16.63)μg/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论:成功建立了一种灵敏度高、稳定性好的检测可溶性B7-H4的夹心ELISA法。 展开更多
关键词 elisa 夹心 B7-H4 乳腺癌
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一种检测可溶性白细胞介素2受体夹心法ELISA的建立 被引量:31
5
作者 孙忱 朱勇 +4 位作者 金伯泉 刘雪松 赵宁 商澎 黄传书 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期359-361,共3页
采用两种识别不同表位的小鼠抗人白细胞介素2受体(IL-2R)单克隆抗体(McAb),在国内首次建立了检测可溶性IL-2R(sIL-2R)的夹心法ELISA,并进行了初步应用。结果显示:本法特异性强、敏感性高、重复性好、操作简便,能检出正常人、某些患者血... 采用两种识别不同表位的小鼠抗人白细胞介素2受体(IL-2R)单克隆抗体(McAb),在国内首次建立了检测可溶性IL-2R(sIL-2R)的夹心法ELISA,并进行了初步应用。结果显示:本法特异性强、敏感性高、重复性好、操作简便,能检出正常人、某些患者血清中以及细胞培养上清中sIL-2R,可用于基础和临床免疫学研究。 展开更多
关键词 单克隆抗体 夹心elisa 细胞
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双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p抗体 被引量:10
6
作者 王艳芳 曾磊 +6 位作者 陈学东 郝卫 杨梅 蔡建飘 王压娣 袁国勇 车小燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期439-443,共5页
目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心EL... 目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并检测100例健康人群对照血清、21例血培养确诊其他真菌感染病人血清和15例血培养确诊马尔尼菲青霉病人血清,联合本实验室前期建立的马尔尼菲青霉抗原检测方法评价其临床应用价值。结果成功建立一种检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,经健康人群对照及其他真菌感染病人血清评价特异度为100%(121/121),检测15例马尔尼菲青霉病人血清,Mp1p特异性抗体2例阳性,Mp1p特异性抗原12例阳性,Mp1p抗体与抗原联合检测可明显提高灵敏度,达到93.3%(14/15)。结论双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体具有高度的特异性,联合抗原检测可提高马尔尼菲青霉感染诊断率。 展开更多
关键词 马尔尼菲青霉 双抗原夹心elisa 真菌 Mp1p 抗体检测
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禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立和标化 被引量:10
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作者 陈晨 曹红 +5 位作者 金英杰 雷霆 庞平 刘海霞 宋铁彬 陈福勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期535-539,共5页
利用原核表达的禽白血病病毒(ALV)P27蛋白作为抗原制备的单抗作为包被抗体,以制的酶标兔抗P27作为酶标抗体,在国内首次建立了检测ALV抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对禽白血病P27抗原的最小检出量为5 ng/mL,通过统计学试验证明自制... 利用原核表达的禽白血病病毒(ALV)P27蛋白作为抗原制备的单抗作为包被抗体,以制的酶标兔抗P27作为酶标抗体,在国内首次建立了检测ALV抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对禽白血病P27抗原的最小检出量为5 ng/mL,通过统计学试验证明自制的诊断试剂具有良好的特异性和稳定性。与IDEXX试剂盒的平行实验确定自制诊断试剂S/P>0.17为阳性判定标准。应用此方法对北京附近鸡场对抽样检测687份蛋清样品,检测结果与IDEXX的禽白血病抗原检测试剂盒符合率达到100%。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 单抗 双抗体夹心elisa
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戊型肝炎病毒抗体双抗原夹心法ELISA的建立与初步应用 被引量:8
8
作者 何志强 葛胜祥 +5 位作者 邱艳 彭耿 陈毅歆 何水珍 张军 夏宁邵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期18-21,共4页
目的 建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法 将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血... 目的 建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法 将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血清建立双抗原夹心ELISA ;用 4 0 0份义务献血员血清比较双抗原夹心ELISA与间接法IgG抗体ELISA的符合情况 ;用 3只HEV感染猴系列血清比较双抗原夹心ELISA试剂和Genelabs公司HEVIgG试剂 ;用双抗原夹心ELISA试剂检测新疆地区的部分牛、绵羊、山羊、猪血清和上海地区的部分鸡血清中的HEV抗体。结果 建立了检测HEV抗体的双抗原夹心ELISA方法 ,对 4 0 0份义务献血员血清的检测表明其与间接法IgG抗体ELISA试剂的符合情况良好 ,并且有更高的s/co比值 ;与Genelabs公司HEVIgG试剂的比较表明双抗原夹心ELISA试剂的检出更早 ,尤其是持续时间及强度明显优于Genelabs试剂 ;在所检测的各种动物中均发现了HEV抗体 ,其中猪抗体的阳性率最高 ,表明双抗原夹心ELISA试剂可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。结论 利用大肠杆菌表达的HEV重组抗原建立了双抗原夹心法ELISA ,并可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。 展开更多
关键词 戊型肝炎 抗体检测 双抗原夹心elisa 重组抗原 HEV
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猪轮状病毒性腹泻的ELISA双抗夹心法检测及防治建议 被引量:7
9
作者 王玲 蒲万霞 +4 位作者 孟小琴 邓海平 崔东安 焦硕 杨志强 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第5期1990-1990,2013,共2页
[目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,... [目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,且感染率较高。从所取218份样品中共检测出RV阳性50头份,阳性率为22.94%,其中,仔猪170头份,阳性率22.35%,中猪48头份,阳性率25.0%;笼养模式下猪的发病率最低,为17.43%,农户圈养方式下猪的发病率最高,达36.84%。[结论]流行病学调查结果显示,仔猪对RV的感染率高于中猪,采取笼养模式,并对仔猪进行RV防治可降低猪RV的发病率。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 流行病学 elisa双抗夹心
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尿液水通道蛋白-2双抗体夹心ELISA测定法的建立 被引量:13
10
作者 卢武生 许顶立 +2 位作者 殷晓燕 任昊 孟素荣 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期486-489,共4页
目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG。建... 目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG。建立检测充血性心力衰竭模型大鼠尿液AQP2的双抗体夹心ELISA法。结果双抗体夹心ELISA法成功建立,灵敏度为15.625 pmol/ml,批内及批间变异系数分别为4.65%和14.05%;用该法定量检测左冠状动脉结扎术后不同梗死面积充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2浓度,其结果与Western blotting半定量检测结果一致。结论双抗体夹心ELISA法可以较好地定量检测充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2蛋白浓度且较Western blotting更加简便易行,便于临床推广使用。 展开更多
关键词 尿液 水通道蛋白-2 双抗体夹心elisa 测定 水孔蛋白类 充血性心力衰竭
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双抗原夹心ELISA法检测烟曲霉Afmp1cr/Afmp2cr抗体 被引量:3
11
作者 杨梅 王卓娅 +7 位作者 郝卫 王艳芳 黄莉 蔡建飘 江凌晓 车小燕 钟晓祝 余楠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期646-650,共5页
目的建立检测烟曲霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法用毕赤酵母系统表达重组的烟曲霉特异性甘露聚糖蛋白片段Afmp1cr和Afmp2cr,经棋盘滴定法建立可检测烟曲霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。用Afmp1cr和Afmp2cr分别免疫兔血... 目的建立检测烟曲霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法用毕赤酵母系统表达重组的烟曲霉特异性甘露聚糖蛋白片段Afmp1cr和Afmp2cr,经棋盘滴定法建立可检测烟曲霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。用Afmp1cr和Afmp2cr分别免疫兔血清评估方法灵敏度,健康人血清、其它微生物感染者血清评估特异性,并检测曲霉感染者血清。结果 Afmp1cr双抗原夹心ELISA法可捕获1∶800稀释兔多抗血清中的抗体,Afmp2cr双抗原夹心ELISA法可捕获1∶3200稀释兔多抗血清中的抗体,两者均与其他真菌及细菌无交叉反应。2例确诊曲霉感染和1例拟诊曲霉感染患者血清中能检测出抗体。结论初步建立了检测anti-Afmp1cr/Afmp2cr抗体的双抗原夹心ELISA方法,可辅助诊断临床烟曲霉感染。 展开更多
关键词 烟曲霉 双抗原夹心 elisa 抗体检测 Afmp1p Afmp2cr Afmp2cr
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ELISA双抗体夹心法检测河蟹“颤抖病”病毒 被引量:3
12
作者 孙学强 金业 陆承平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期67-70,共4页
用纯化的河蟹“颤抖病” (暂定名 )病毒分别免疫家兔和山羊 ,制备高效价的抗血清。羊抗血清经硫酸铵盐析纯化。经方阵滴定 ,选择P/N =2 95时作 1∶10 0稀释的抗血清为工作浓度 ,建立ELISA双抗体夹心法检测样本 14 4份 ,包括来自长江水... 用纯化的河蟹“颤抖病” (暂定名 )病毒分别免疫家兔和山羊 ,制备高效价的抗血清。羊抗血清经硫酸铵盐析纯化。经方阵滴定 ,选择P/N =2 95时作 1∶10 0稀释的抗血清为工作浓度 ,建立ELISA双抗体夹心法检测样本 14 4份 ,包括来自长江水域的野生河蟹、人工感染发病的河蟹、 1999年和 2 0 0 0年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显示 ,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为 6 6 7%~ 10 0 % ,人工感染的病蟹和人工感染石蟹致病组阳性率均为 10 0 % ,来自长江水域的健康河蟹及未接种病毒的对照石蟹阳性率均为 0 ,表明建立的方法可以用于检测河蟹“颤抖病” 展开更多
关键词 河蟹 elisa双抗体夹心 “颤抖病”病毒 检测
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应用ELISA双抗体夹心法诊断鸭冠状病毒性肠炎的研究 被引量:3
13
作者 范泉水 齐桂凤 +5 位作者 王度林 乔贵林 陆明昌 沈居仁 龙沛然 曾子安 《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第5期41-44,共4页
将电镜检查鸭冠状病毒阳性的病鸭肠管及粪便,经PEG沉淀及蔗糖线性梯度超速离心提纯抗原。用其免疫豚鼠制备抗血清,经饱和硫酸铵粗提,再经QAE-ScphadcxA50离子柱纯化提取IgG。纯化IgG与辣根过氧化物酶(HRP)用过碘酸钠法进行标记,制备酶... 将电镜检查鸭冠状病毒阳性的病鸭肠管及粪便,经PEG沉淀及蔗糖线性梯度超速离心提纯抗原。用其免疫豚鼠制备抗血清,经饱和硫酸铵粗提,再经QAE-ScphadcxA50离子柱纯化提取IgG。纯化IgG与辣根过氧化物酶(HRP)用过碘酸钠法进行标记,制备酶标抗体,建立ELISA了双抗体夹心法,以诊断鸭冠状病毒性肠炎抗原,对发病鸭及回归试验、人工感染试验中收集的55份粪便样品,用本试验检测,并用电镜检查作为对照,证明该法具有特异、敏感、快速、简便之优点,解决了仅靠电镜检查的局限性。 展开更多
关键词 elisa 双抗体夹心 冠状病毒性 肠炎 鸭病
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hGH单克隆抗体的筛选及双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:2
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作者 饶圣宏 刘文 +2 位作者 游牧 徐振山 宋礼华 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期94-97,共4页
采用杂交瘤法制备单克隆抗体,并用辛酸-硫酸铵法纯化单抗,通过ELISA方法和Western blotting测定抗体的效价与特异性,并进行抗体类型、相对亲和力测定;应用纯化的单抗建立hGH双抗体夹心ELISA检测方法。筛选出两株可以稳定分泌抗hGH单抗... 采用杂交瘤法制备单克隆抗体,并用辛酸-硫酸铵法纯化单抗,通过ELISA方法和Western blotting测定抗体的效价与特异性,并进行抗体类型、相对亲和力测定;应用纯化的单抗建立hGH双抗体夹心ELISA检测方法。筛选出两株可以稳定分泌抗hGH单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为3E11、2G9,抗体类型均为IgG1,抗体滴度均可达10-10,特异性好,相对亲和力高,以筛选到的两株单抗建立的双抗夹心ELISA法线性范围为0.09~1.5625ng/mL,R2>0.9,灵敏度为0.09ng/mL。筛选出高效抗hGH的单抗,并建立了hGH双抗体夹心ELISA检测方法。 展开更多
关键词 人生长激素 单克隆抗体 双抗体夹心elisa
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测定尿激酶含量夹心法 ELISA 的建立 被引量:1
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作者 丁皓 吴晓俐 +1 位作者 朱运松 宋后燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期308-310,共3页
采用两种识别不同抗原决定簇的抗尿激酶(UK)单克隆抗体建立了测定人 UK 含量的夹心法ELISA.本法灵敏度为0.15ng/ml,批内 CV4.3%,批间 CV8.7%,平均回收率98%.应用本法测定了部分正常细胞和肿瘤细胞株培养上清中的 UK 含量,肿瘤细胞培养上... 采用两种识别不同抗原决定簇的抗尿激酶(UK)单克隆抗体建立了测定人 UK 含量的夹心法ELISA.本法灵敏度为0.15ng/ml,批内 CV4.3%,批间 CV8.7%,平均回收率98%.应用本法测定了部分正常细胞和肿瘤细胞株培养上清中的 UK 含量,肿瘤细胞培养上清 UK 量明显高于正常细胞.测定82名正常人血浆中 UK 含量,其结果为1.31±0.6ng/ml. 展开更多
关键词 尿激酶 夹心 elisa 单克隆抗体
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双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原的研究 被引量:1
16
作者 梁韶晖 潘长旺 +4 位作者 谭峰 黄慧聪 邢文鸾 秦茜 诸葛青云 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期880-882,共3页
目的建立双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原(Cag).方法采用两株抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,应用双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫CAg,并摸索该法的最佳实验条件.对感染大鼠、小鼠、疑似和确诊广州管圆线虫病病... 目的建立双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原(Cag).方法采用两株抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,应用双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫CAg,并摸索该法的最佳实验条件.对感染大鼠、小鼠、疑似和确诊广州管圆线虫病病例血清进行检测,评价方法的敏感性;对日本血吸虫、肺吸虫、旋毛虫、囊虫病人血清进行交叉反应试验,评价方法的特异性.结果 10μg/ml单抗包被,酶标记单抗1∶1 600稀释为最佳工作浓度.利用该法检测不同血清广州管圆线虫循环抗原的敏感性为84.2%~87.2%,特异性为100%.结论建立的双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原具有敏感性高、特异性强和经济、简便易行等优点. 展开更多
关键词 双抗体夹心elisa 检测方 广州管圆线虫 循环抗原 成虫 单克隆抗体
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FITC-抗FITC系统在夹心法ELISA检测IFN-γ和IL-4中的应用 被引量:1
17
作者 庄然 李琦 +4 位作者 刘雪松 欧阳为明 韩卫宁 王薇 金伯泉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期637-638,共2页
关键词 FITC-抗FITC系统 夹心 elisa 检测 IFN-Γ IL-4 异硫氰酸荧光黄 抗FITC分子单克隆抗体
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ELISA双抗体夹心法检测幼犬轮状病毒的研究 被引量:2
18
作者 魏锁成 何丽 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第1期37-38,共2页
应用ELISA双抗体夹心法对幼犬轮状病毒感染情况进行调查,结果表明兰州地区幼犬轮状病毒感染阳性率为57.1%,其中2~4月龄的幼犬占阳性病例的75.0%,而2月龄以内及大于4月龄的犬感染轮状病毒的病例较少。
关键词 轮状病毒 elisa双抗体夹心 幼犬 兰州地区
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ELISA检测可溶性白细胞介素2受体夹心法的临床应用及其评价 被引量:1
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作者 孙忱 金伯泉 +2 位作者 朱勇 刘雪松 黄传书 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1994年第2期43-46,共4页
应用双单克隆抗体夹心法ELISA对甲型肝炎、肾综合征出血热、小儿呼吸道合胞病毒感染以及肾移植术后患者等血清中可溶性白细胞介素2受体(sIL2R)进行了定量检测,并对该方法的敏感性、重复性等参委大进行了对比观察。结果表... 应用双单克隆抗体夹心法ELISA对甲型肝炎、肾综合征出血热、小儿呼吸道合胞病毒感染以及肾移植术后患者等血清中可溶性白细胞介素2受体(sIL2R)进行了定量检测,并对该方法的敏感性、重复性等参委大进行了对比观察。结果表明,该方法敏感性高、特异性强.重复性好,变异率低于国外同类产品,所检测的临床疾病sIL-2R水平的变化与文献报道相符,并与病情、病程相关性良好,可用于基础和临床免疫学研究。 展开更多
关键词 白细胞介素2 受体 夹心 elisa
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应用ELISA双抗体夹心法检测法氏囊病毒 被引量:1
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作者 张文生 张晶 李富桂 《天津畜牧兽医》 1994年第1期28-30,共3页
从抗传染性法氏囊病(IBD)高免卵黄液中提取IgG,用作包被抗体和酶标记抗体,建立了检测IBD病毒的ELISA双抗体夹心法,经特异性检验,阻断实验,敏感性检验等,证明此方法具有良好的特异性、敏感性,比普通免疫琼扩法可... 从抗传染性法氏囊病(IBD)高免卵黄液中提取IgG,用作包被抗体和酶标记抗体,建立了检测IBD病毒的ELISA双抗体夹心法,经特异性检验,阻断实验,敏感性检验等,证明此方法具有良好的特异性、敏感性,比普通免疫琼扩法可提高灵敏度1000倍以上。为大样本检测IBD病毒提供了一种有效的方法,是IBD病原学诊断及流行病学调查的可靠手段,值得推广、使用。 展开更多
关键词 elisa IBD 双抗体夹心 检测 病毒
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