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莫米松糠酸酯高特异性抗体制备及酶联免疫分析方法 被引量：1
1
作者 谢桂勉 黄莹星 +1 位作者 林俊虹 张世伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期126-131,共6页
莫米松糠酸酯(mometasone furoate,MF)是一种常见的糖皮质激素。为快速、便捷地监控MF的滥用情况,制备了MF单克隆抗体并建立了其竞争酶联免疫检测方法。将氨氧乙酸分别连接至MF和莫米松二糠酸酯(mometasone difuroate,MDF),合成了免疫... 莫米松糠酸酯(mometasone furoate,MF)是一种常见的糖皮质激素。为快速、便捷地监控MF的滥用情况,制备了MF单克隆抗体并建立了其竞争酶联免疫检测方法。将氨氧乙酸分别连接至MF和莫米松二糠酸酯(mometasone difuroate,MDF),合成了免疫半抗原和包被半抗原。免疫半抗原以活泼脂法连接钥孔血蓝蛋白获得全抗原,通过免疫小鼠、细胞融合及筛选获得能够稳定分泌抗MF单克隆抗体的细胞株,制备并纯化了抗体。该抗体的主要识别区域为MF的五元环区域,因此不和常见的64种糖皮质激素发生交叉反应。建立了基于异源包被的MF间接竞争酶联免疫检测法,其半抑制浓度(IC_(50))为1.2 ng/mL,对肌肉和肝脏的最低检出限分别为0.52μg/kg和0.59μg/kg。灵敏度相比于同源包被提升了20倍。使用60%甲醇水溶液提取动物组织的添加回收率为70%~82%。该方法能有效应用于动物组织中MF的快速筛查。 展开更多
关键词 糖皮质激素 莫米松糠酸酯 单克隆抗体 异源包被 间接竞争酶联免疫检测法(ic-ELISA)
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基于免疫磁珠的喹乙醇磁酶联免疫吸附法的建立与应用
2
作者 陈子怡 宋妍灵 +5 位作者 孙俊杰 李因来 翟璐 张尧峰 冯俊丽 金仁耀 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第7期149-160,共12页
【目的】建立基于免疫磁珠的喹乙醇(olaquindox,OLA)磁酶联免疫吸附法(magnetic bead enzyme-linked immunosorbent assay,MELISA)。【方法】首先合成喹乙醇酶标半抗原(OLA-HS-HRP),并制备免疫磁珠,随后利用偶联完成的免疫磁珠与OLA-HS-... 【目的】建立基于免疫磁珠的喹乙醇(olaquindox,OLA)磁酶联免疫吸附法(magnetic bead enzyme-linked immunosorbent assay,MELISA)。【方法】首先合成喹乙醇酶标半抗原(OLA-HS-HRP),并制备免疫磁珠,随后利用偶联完成的免疫磁珠与OLA-HS-HRP,对MELISA的最佳反应条件进行筛选与优化。【结果】免疫磁珠与OLA-HS-HRP的最佳工作稀释倍数分别为100倍和8000倍,抗体稀释液为含体积分数5%甲醇的PBS缓冲液(0.010 mol/L,pH 7.0);在优化条件下建立的标准方程为y=13.593ln x+17.173(R^(2)=0.9943),其中IC_(10)值、IC_(20)值、IC_(50)值、IC_(80)值分别为0.59、1.23、11.19、101.70 ng/mL;该方法的回收率为93.17%~106.83%,变异系数(CV)<7%。【结论】该研究建立的MELISA灵敏度高且结果可靠,不仅为OLA残留检测提供了新方法,也为食品安全领域中其他小分子药物检测提供了理论依据与参考。 展开更多
关键词 喹乙醇 单克隆抗体 酶标半抗原 免疫磁珠 磁酶联免疫吸附法
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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测杏仁过敏原苦杏仁球蛋白 被引量：9
3
作者 张洁琼 高淑霞 +2 位作者 生威 张燕 王硕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期173-177,共5页
提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12... 提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12.11±1.70)μg/L和(18.95±1.52)μg/L,且与常见的14种植物性蛋白没有交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。将该方法用于法式小面包、饼干和脱脂牛乳中杏仁过敏原的检测,苦杏仁球蛋白的添加回收率为78.94%～125.15%,且相对标准偏差均低于5.81%。 展开更多
关键词 杏仁 苦杏仁球蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附分析法
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双抗夹心酶联免疫吸附法检测沙门氏菌 被引量：36
4
作者 伍燕华 牛瑞江 +4 位作者 赖卫华 山珊 刘道峰 倪小琴 冯荣华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期62-65,共4页
沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门... 沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门氏菌单克隆抗体C1359作为检测抗体,建立快速检测沙门氏菌双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法可以检测A、B、C、D、E等五种典型的沙门氏菌,对沙门氏菌纯培养液的最低检测量为1×104CFU/mL,与其他杂菌不存在交叉反应,具有较好的灵敏性和特异性。 展开更多
关键词 沙门氏菌 多克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附法
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双酚A单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立 被引量：9
5
作者 许龙 章英 +5 位作者 朱立鑫 范艳 赖肖 孟玮 胡娜 刘仁荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第20期202-206,共5页
采用活泼酯法将双酚A的结构类似物双酚酸与载体蛋白偶联制备人工抗原,用制备的人工抗原免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇法进行细胞融合制备双酚A单克隆抗体,成功获得一株分泌抗双酚A单克隆抗体的细胞株3H1,经鉴定抗体属于Ig G1亚型,轻链为... 采用活泼酯法将双酚A的结构类似物双酚酸与载体蛋白偶联制备人工抗原,用制备的人工抗原免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇法进行细胞融合制备双酚A单克隆抗体,成功获得一株分泌抗双酚A单克隆抗体的细胞株3H1,经鉴定抗体属于Ig G1亚型,轻链为κ,并建立了间接竞争酶联免疫分析法。线性范围为1～50 ng/m L,最低检测限为0.43 ng/m L,半数抑制浓度为6.56 ng/m L。回收率为82.83%～101.94%,变异系数为2.94%～12.95%。该方法具有较高的灵敏度和特异性,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 双酚A 单克隆抗体 酶联免疫分析法
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酶联免疫吸附分析双抗夹心法检测临床鼻咽抽吸物中呼吸道合胞病毒 被引量：3
6
作者 孙永鹏 靳输梅 +5 位作者 詹炉停 温桂平 赵敏 张伟 夏宁邵 郑子峥 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期505-510,共6页
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医... 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医疗机构中推广,国内尚无上市的快速诊断试剂用于临床检测.为此建立用于RSV抗原检测的早期快速诊断试剂,并以反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测为参比,同时使用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗夹心法和免疫荧光法对112份临床鼻咽抽吸物(NPA)样本进行检测.ELISA双抗夹心法和免疫荧光法的灵敏度分别为79.31%和74.14%,特异度分别为100%和96.30%,Kappa值分别为0.787 1和0.689 5,两者均与RT-PCR检测结果具有高度一致性.此外,将ELISA双抗夹心法与免疫荧光法比较,两者无显著差异(p>0.05).综上,ELISA双抗夹心法操作简便,特异性高,有望代替进口检测试剂盒完成RSV感染的早期快速诊断. 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 融合蛋白 酶联免疫吸附分析双抗夹心法 快速诊断
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抗体夹心酶联免疫吸附法测定鸡白细胞介素-2 被引量：1
7
作者 翁凌 张凌晶 +1 位作者 张其标 曹敏杰 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期142-145,共4页
利用抗鸡白细胞介素-2(ChIL-2)单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统.此系统对鸡白细胞介素-2的检测灵敏度为50 pg/mL.两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细... 利用抗鸡白细胞介素-2(ChIL-2)单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统.此系统对鸡白细胞介素-2的检测灵敏度为50 pg/mL.两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细胞因子不产生任何非特异性反应.以不同种类的促有丝分裂剂或鸡病毒刺激鸡淋巴细胞,培养液中分泌产生的天然鸡白细胞介素-2的量用此系统检出.在促有丝分裂剂中,植物血凝素(PHA)导致ChIL-2的产生量最高;在病毒方面,传染性法氏囊病毒最能促使ChIL-2的分泌.本研究建立的抗体夹心酶联免疫吸附测定系统为我们以定量方式测定鸡白细胞介素-2提供了一个灵敏度高、特异性好的工具. 展开更多
关键词 抗体 鸡白细胞介素-2 抗体夹心酶联免疫吸附测定 WESTERN印迹
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甜菜丛根病的双抗体夹心酶联免疫吸附测定 被引量：1
8
作者 王皙玮 吴玉梅 马龙彪 《中国糖料》 2009年第3期30-31,共2页
对甜菜丛根病毒采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(Double antibody sandwich assay,DAS-ELISA)法进行了检测,并对测定方法及检测结果进行了分析讨论。
关键词 甜菜丛根病 甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV) 双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)
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黄瓜绿斑驳花叶病毒病快速检测法与酶联免疫双抗体夹心检测法的比较及其在生产上的应用
9
作者 蔡美艳 叶建人 李程巧 《农业科技通讯》 2017年第10期144-147,共4页
采用快速检测法(浙江大学和安德珍各自生产的试剂盒)和酶联免疫双抗体夹心法对棚栽嫁接西瓜疑似感病植株叶片和显症植株叶片进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测,结果发现,疑似感病叶片中,阳性率:DAS-ELISA法86.36%>浙大快速检测法59.09%>... 采用快速检测法(浙江大学和安德珍各自生产的试剂盒)和酶联免疫双抗体夹心法对棚栽嫁接西瓜疑似感病植株叶片和显症植株叶片进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测,结果发现,疑似感病叶片中,阳性率:DAS-ELISA法86.36%>浙大快速检测法59.09%>安德珍快速检测法34.09%,DASELISA法与快速检测法之间的阳性率差异极显著(χ~2=25.03,P<0.01),与浙大快速检测法符合率72.72%,与安德珍快速检测法符合率为47.72%,2家快速检测法之间的阳性率有显著性差异(χ~2=4.57,P<0.05);显症病叶中,阳性检出率浙大快速检测法高于安德珍快速检测法,当样品在冰箱中保存后,快速检测法的阳性检出率会下降,影响检测结果。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 快速检测法 酶联免疫双抗体夹心法 比较 应用
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双抗夹心酶联免疫吸附法检测荞麦过敏蛋白 被引量：3
10
作者 张新瑀 崔晓东 +2 位作者 杨欢 葛川 王转花 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期53-56,共4页
提取制备荞麦过敏原蛋白（TBt）并免疫动物,分别制备鼠多克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了双抗夹心酶联免疫吸附检测法（ELISA）用于检测食品中的荞麦过敏原。SDS-PAGE结果表明,纯化的TBt纯度达到98%以上,鼠抗血清效价为1∶6400。建立的... 提取制备荞麦过敏原蛋白（TBt）并免疫动物,分别制备鼠多克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了双抗夹心酶联免疫吸附检测法（ELISA）用于检测食品中的荞麦过敏原。SDS-PAGE结果表明,纯化的TBt纯度达到98%以上,鼠抗血清效价为1∶6400。建立的双抗夹心ELISA法对荞麦过敏原蛋白的最低检测限为0.16μg/m L,线性范围为0.16~16μg/m L。并采用建立的双抗夹心ELISA法对市场出售的15种食品中荞麦过敏成分进行了检测。结果显示,该方法对绝大多数食品中的荞麦过敏原都有很好的特异性及灵敏性,说明该法可用于食物过敏原的诊断及食品中微量荞麦过敏成分的检测。 展开更多
关键词 荞麦 过敏蛋白 多克隆抗体 酶联免疫吸附法
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单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨 被引量：2
11
作者 尹东 陈红根 +4 位作者 许雪萍 衣方誉 姜唯声 曾小军 王腊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期726-726,678,共2页
关键词 单克隆抗体 JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验 血吸虫病 疗效观察
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磁微粒分离酶联免疫法在日本血吸虫抗体检测中的应用 被引量：9
12
作者 姚蓝 刘振世 +4 位作者 黄进 董素娟 魏兰英 方正明 姜昌富 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期784-786,共3页
目的探讨磁微粒分离酶联免疫法(MPAIA)用于检测日本血吸虫病血清抗体的效果。方法用MPAIA测定日本血吸虫病血清中特异性抗体。结果用MPAIA检测384例非血吸虫病流行区阴性血清,均为阴性;检测61例急性血吸虫病人血清、788例慢性血吸虫病... 目的探讨磁微粒分离酶联免疫法(MPAIA)用于检测日本血吸虫病血清抗体的效果。方法用MPAIA测定日本血吸虫病血清中特异性抗体。结果用MPAIA检测384例非血吸虫病流行区阴性血清,均为阴性;检测61例急性血吸虫病人血清、788例慢性血吸虫病人血清、32例晚期血吸虫病人血清其阳性率分别为100%、94.2%、90.6%;检测14例并殖吸虫病人、13例囊虫病人、9例旋毛虫病人血清,均未发现交叉反应。结论MPAIA检测日本血吸虫血清抗体有较高的灵敏度和特异度,可用于日本血吸虫病的临床诊断和现场疫情监测,该方法具有广阔应用前景。 展开更多
关键词 磁分离酶联免疫法 日本血吸虫 抗体
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培氟沙星抗体的制备及对鸡蛋样品中培氟沙星的酶联免疫法检测 被引量：6
13
作者 田秀梅 张银志 +2 位作者 孙秀兰 钱和 季鹏 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期371-375,共5页
采用活泼酯法合成培氟沙星人工抗原,通过免疫新西兰大白兔获得抗体,建立了间接竞争酶联免疫法(ELISA)检测鸡蛋中培氟沙星。人工抗原经紫外光谱和红外光谱鉴定,免疫所获得抗体测得效价高达1∶51 200,继而建立了培氟沙星间接竞争ELISA,标... 采用活泼酯法合成培氟沙星人工抗原,通过免疫新西兰大白兔获得抗体,建立了间接竞争酶联免疫法(ELISA)检测鸡蛋中培氟沙星。人工抗原经紫外光谱和红外光谱鉴定,免疫所获得抗体测得效价高达1∶51 200,继而建立了培氟沙星间接竞争ELISA,标准曲线线性相关系数为0.9920,Ic50达1.5μg/L,抗体对恩诺沙星的交叉反应率为13.89%;鸡蛋样品中分别添加不同浓度的培氟沙星和恩诺沙星,经乙腈-水溶液(体积比4∶1)提取,离心稀释后经ELISA检测,结果表明培氟沙星和恩诺沙星加标回收率为分别为90%～94.2%、84%～90.3%,相对标准偏差分别为5.2%～10.0%、6.5%～10.3%。该方法具有灵敏度高、样品前处理简单、批量检测的优点,适用于复杂食品基质中培氟沙星的定量检测。 展开更多
关键词 培氟沙星 鸡蛋 抗体 酶联免疫法
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双酚A残留酶联免疫分析方法的研究及应用 被引量：7
14
作者 张丽莎 吕型超 +3 位作者 陈涵倩 邓杰 潘熙萍 施曼玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期234-239,共6页
为了建立双酚A残留的酶联免疫分析方法,采用碳化二亚胺法将半抗原双酚酸(BHPVA)分别与卵清蛋白(OVA)和牛血清蛋白(BSA)偶联,制备免疫原BHPVA-OVA和包被原BHPVA-BSA。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测表明BHPVA与BSA... 为了建立双酚A残留的酶联免疫分析方法,采用碳化二亚胺法将半抗原双酚酸(BHPVA)分别与卵清蛋白(OVA)和牛血清蛋白(BSA)偶联,制备免疫原BHPVA-OVA和包被原BHPVA-BSA。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测表明BHPVA与BSA和OVA的偶联比分别为12∶1和16∶1。BHPVA-OVA免疫新西兰大白兔获得抗双酚A的多克隆抗体,抗体ELISA效价为1∶1×107。基于该抗体建立双酚A间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法,其检测的线性范围为0.02-100ng·mL-1,线性回归方程y=9.0326 ln x+39.105,R2=0.9975,双酚A的检测限为IC10=0.04ng·mL-1。采用所建立的ciELISA方法均检测出8种塑料食品袋中的双酚A残留,迁移析出量分别从4.9到31mg·L-1,批内和批间变异系数均小于12.48%,说明本试验所建立ciELISA法可有效地用于塑料食品袋中的双酚A迁移量的测定,不仅具有高度的灵敏性,而且具有较好的稳定性。 展开更多
关键词 双酚A 多克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附法 塑料食品袋
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酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮抗双链DNA抗体的应用价值 被引量：8
15
作者 王之青 郑冰 李恩灵 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期530-533,共4页
目的·探讨酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)抗体的特点及临床应用价值。方法·采用放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)法和ELISA 法同时检测186 例系统... 目的·探讨酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)抗体的特点及临床应用价值。方法·采用放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)法和ELISA 法同时检测186 例系统性红斑狼疮(systemiclupus erythematosus,SLE)患者、183 例非SLE 自身免疫疾病患者、78 例非自身免疫病对照和50 例健康体检者血清中抗dsDNA 抗体,评价其诊断效能。结果· RIA 法和ELISA 法对于SLE 诊断的敏感度分别为47.31%和62.90%、特异度分别为85.85%和81.67%,阳性预测值分别为66.67%和67.24%,阴性预测值分别为73.15%和78.14%。2 种方法检测值均随疾病的活动度升高而增高。结论· ELISA 法对SLE的诊断特异度与RIA 法接近,但其敏感度更高,可有效筛查SLE 患者。同时,2 种方法均有助于监测SLE 病情的活动状态。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 抗双链DNA抗体 酶联免疫吸附法 放射免疫法
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间接免疫荧光法与酶联免疫吸附试验检测抗核抗体对比分析 被引量：7
16
作者 夏勇 李齐光 +1 位作者 唐希才 邱志超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第13期2449-2451,共3页
目的:应用间接免疫荧光法(indirect immunofluoreseent assay,IF)与酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测临床疑似自身免疫疾病患者血清抗核抗体并进行相关性及对比分析。方法:IF法按说明书操作,在荧光显微镜... 目的:应用间接免疫荧光法(indirect immunofluoreseent assay,IF)与酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测临床疑似自身免疫疾病患者血清抗核抗体并进行相关性及对比分析。方法:IF法按说明书操作,在荧光显微镜下观察到特异的荧光核型为阳性;ELISA法按说明书操作,浓度≥18U/mL为阳性,12～18U/mL为可疑,≤12U/mL为阴性。结果:检测临床疑似自身免疫患者血清138份,IF法阳性50份,阴性88份,阳性率36.23%,ELISA法阳性78份,阴性60份,阳性率56.52%。经卡方检验P<0.01。其中IF法样本血清稀释倍数与ELISA法检测浓度的Spearman相关系数为0.499。结论:两种方法检测抗核抗体差异有显著性,ELISA法敏感度明显高于IF法。同时,IF法样本血清抗核抗体血清稀释倍数与ELISA法的浓度呈一定相关性。 展开更多
关键词 抗核抗体 间接免疫荧光法 酶联免疫吸附试验
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采用酶联免疫捕获法和荧光酶联免疫吸附法检测过敏原IgE抗体的比较分析 被引量：4
17
作者 郑佩燕 孙宝清 +3 位作者 黄惠敏 韦妮莉 李靖 陈德晖 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期595-598,共4页
目的:对酶联免疫捕获法的ALLERG-O-LIQ系统和荧光酶联免疫吸附法的ImmunoCAP系统检测过敏原特异性IgE抗体的一致性进行对比观察。方法:研究对象为我院2008～2010年就诊于变态反应科、儿科的病例,采用2种不同的酶联免疫吸附法检测屋尘螨(... 目的:对酶联免疫捕获法的ALLERG-O-LIQ系统和荧光酶联免疫吸附法的ImmunoCAP系统检测过敏原特异性IgE抗体的一致性进行对比观察。方法:研究对象为我院2008～2010年就诊于变态反应科、儿科的病例,采用2种不同的酶联免疫吸附法检测屋尘螨(D1)、粉尘螨(D2)、狗毛屑(E5)、德国小蠊(I6)、鸡蛋(F1)、牛奶(F2)、花生(F13)、蟹(F23)、虾(F24),共9种过敏原特异性IgE抗体检测,将2种检测结果进行一致性检验和线性回归分析。结果:共进行了520项次过敏原特异性IgE检测,两种系统对吸入性过敏原特异性IgE抗体定量检测结果一致性良好(P<0.05),特异性IgE结果:屋尘螨>粉尘螨>德国小蠊>狗毛屑;而对食物过敏SIgE抗体检测结果的相关度较吸入过敏原低,特异性IgE结果:蟹>虾>花生>鸡蛋>牛奶。结论:ALLERG-O-LIQ系统和ImmunoCAP系统都属于新一代易操作的过敏原检测系统。2种检测方法一致性良好,结果偏离度较小,呈线性回归分布。因此,对于评估血清中的特异性IgE来说,ALLERG-O-LIQ系统是一个可靠的、经济的临床诊断系统。其检测的结果与ImmunoCAP系统的检测结果比较相符合。 展开更多
关键词 酶联免疫捕获法 过敏原检测 过敏原特异性IgE抗体
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两种酶联免疫法检测SARS病毒特异性抗体的比较 被引量：3
18
作者 梁艳 匡铁吉 +7 位作者 董梅 雷红 孟祥红 何菊芳 宋萍 杨采娥 佟爱华 肖漓 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期808-808,共1页
关键词 严重急性呼吸综合征 酶联免疫吸附法 抗体
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三唑磷酶联免疫吸附测定法中包被抗体稳定剂的研究 被引量：1
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作者 桂文君 梁赤周 +2 位作者 王姝婷 王春梅 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2007年第2期165-171,共7页
选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇（PEG）、卵清蛋白（OVA）、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理（37℃,1h）后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争EL... 选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇（PEG）、卵清蛋白（OVA）、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理（37℃,1h）后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争ELISA法对不同稳定剂处理的包被抗体免疫活性、亲合性及检测灵敏度进行检测,并与未经稳定剂处理的对照进行比较,筛选得到效果较好的稳定剂1（质量分数：甘油2.5%,氨基酸1.5%,蛋白胨3.0%,离子螯合剂0.1%,防腐剂0.01%）。用稳定剂1处理包被抗体后,4-6℃下保存半年及37℃下保存14d的试验结果表明,抗体的活性相对保持率分别为97.8%和94.2%;其免疫活性、亲合性（I50分别为68.43和54.38ng/mL）及灵敏度（I10分别为3.72和3.22ng/mL）与常规方法包被的抗体（包被好后不贮存,直接检测,I50为60.73ng/mL,I10为3.11ng/mL）无明显差异;冻融试验表明,经稳定剂1处理的三唑磷抗体在反复冻-融次数不超过8次时其活性也是稳定的。说明筛选出的稳定剂可以显著提高三唑磷多克隆包被抗体的稳定性,可用于三唑磷ELISA试剂盒的生产。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 稳定剂 三唑磷 多克隆抗体
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灵芝酸A多克隆抗体制备及酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：4
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作者 袁耀武 田益玲 +2 位作者 李升云 杨心怡 马晓飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第16期332-337,共6页
以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体。对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法。结果显示:多克隆抗体中... 以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体。对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法。结果显示:多克隆抗体中存在靶向偶联抗原3个区域的独特型抗体,总效价为1∶78 125,其中抗灵芝酸A特异性抗体效价为1∶3 125。间接竞争酶联免疫吸附测定法的灵芝酸A检出限为0.3μg/L,半数抑制浓度为4.0μg/L,线性范围在0.6~27.3μg/L之间。样品测定批间变异系数低于10%,样品加标回收率在82.9%~118.6%之间,对22份灵芝粉剂产品的测定结果显示不同品牌产品中灵芝酸A含量的差异极显著,该法测定结果与高效液相色谱法的测定结果相比,相关系数为0.972。结果表明,间接竞争酶联免疫吸附法测定灵芝酸A可行,该方法能够为灵芝保健品市场中相关产品的质量监控提供一种辅助方案。 展开更多
关键词 灵芝酸A 多克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附测定法
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