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中国水仙NtBCH基因的克隆及LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建被引量：3: 1; 作者廖正平郑益平 +2 位作者罗鹏吴雪琴曾黎辉《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第12期2382-2390,共9页; 参考洋水仙BCH基因设计引物,以中国水仙花瓣cDNA为模板克隆出中国水仙NtBCH基因,全长959 bp,编码303个氨基酸。以中国水仙LCYE和BCH为目的基因,利用pKANNBIAL、pBI121和pCAMBIA1301等载体构建了LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体,为... 展开更多; 关键词中国水仙 LCYE基因 BCH基因反义技术 rnai 双价植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

玉米ZmSUT4基因RNAi植物表达载体的构建被引量：2: 2; 作者弓雪姜敏 +4 位作者齐欣李明马骏刘欣芳王延波《江苏农业科学》北大核心 2016年第7期42-44,共3页; 蔗糖转运蛋白(sucrose transporters,SUCs或SUTs)是蔗糖装载、卸载、分配的重要载体,Zm SUT4是玉米低亲和、高转运能力SUT4亚族的唯一成员。以黄早四Zm SUT4全长c DNA序列为模板,设计带有限制性内切酶位点的特异性引物,PCR扩增获得正向... 展开更多; 关键词玉米 ZmSUT4基因 rnai植物表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化被引量：1: 3; 作者谢丽娟陶瑶 +6 位作者钟思荣吴凌敏聂亚平周玮刘栋王建革刘齐元《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期28-36,共9页; atp9基因是烟草的雄性不育相关基因。为研究atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用,根据atp9基因全长序列,设计特异性引物,扩增正、反义干扰片段,将长度为239bp的atp9基因的正、反向干扰片段分别连接到linker片段的两侧,最后插... 展开更多; 关键词烟草 atp9基因 rnai 表达载体构建遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究被引量：9: 4; 作者陈利平陈平华 +6 位作者陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期99-106,共8页; 甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分... 展开更多; 关键词甘蔗黄叶病毒甘蔗花叶病毒 CP基因双价rnai表达载体构建遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

薄荷GPPS基因原核表达及RNA干扰载体构建被引量：2: 5; 作者于盱梁呈元 +1 位作者刘艳李维林《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期84-88,共5页; 利用薄荷挥发油合成途径关键酶之一的薄荷牻牛儿基焦磷酸合酶(GPPS)基因特异引物,扩增得到GPPS基因开放式阅读框(1 131 bp),并将其插入到原核表达载体pET-28a中,经酶切测序验证的重组质粒pET-28a-GPPS转入Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表... 展开更多; 关键词薄荷 GPPS 原核表达 rnai 载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

双效表达载体的构建及其U6启动子的功能效率鉴定被引量：1: 6; 作者项海涛杨彬 +2 位作者温峰琴胡永浩柳纪省《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期82-85,90,共5页; 利用pBudcE4.1双表达载体构建shRNA与蛋白共表达载体,为双效疫苗的研制提供新的研究思路。以含U6启动子的载体为模板,PCR扩增得到U6启动子,用其置换载体pBudcE4.1内的CMV启动子的核心部分构建shRNA与蛋白共表达载体。用干扰绿色荧光蛋... 展开更多; 关键词 rnai 共表达载体 U6启动子构建鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量：3: 7; 作者赵虹张惊宇 +2 位作者徐万海杨子超赵庆杰《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期623-627,共5页; 目的:构建人STUB1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并进行鉴定。方法:针对筛选确定的人STUB1基因RNAi有效靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeI和EcoRI酶切后的pMagic 4.0载体连接,产生短发卡RNA... 展开更多; 关键词基因 RNA干扰慢病毒载体构建与鉴定 RNA interference LENTIVIRAL vector 慢病毒颗粒慢病毒表达载体构建人包装 rnai 胶质瘤发生寡核苷酸链 shRNA DNA测序载体连接阳性克隆信号通路筛选确定合成; 在线阅读下载PDF 职称材料

盐胁迫条件下转录因子RAP2L14调控杨树生长研究被引量：2: 8; 作者王星斗黄娟娟 +3 位作者樊艳刘强韩有志王升级《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第6期14-23,共10页; [目的]ERF(ethylene response factor)转录因子家族基因能够调控植物应答高盐等逆境胁迫,参与植物生长发育等生物学过程。RAP2L14是ERF转录因子家族重要成员,本研究旨在探究其在杨树生长及应答盐胁迫过程中的功能。[方法]利用RT-qPCR及... 展开更多; 关键词 ERF转录因子 84K杨 RAP2L14 rnai表达载体构建遗传转化盐胁迫; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国水仙NtBCH基因的克隆及LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建被引量：3: 1; 作者廖正平郑益平罗鹏吴雪琴曾黎辉; 机构福建农林大学园艺学院; 出处《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第12期2382-2390,共9页; 基金福建省自然科学基金项目(No.2011J01084); 文摘参考洋水仙BCH基因设计引物,以中国水仙花瓣cDNA为模板克隆出中国水仙NtBCH基因,全长959 bp,编码303个氨基酸。以中国水仙LCYE和BCH为目的基因,利用pKANNBIAL、pBI121和pCAMBIA1301等载体构建了LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体,为利用基因工程技术改良中国水仙奠定了基础。; 关键词中国水仙 LCYE基因 BCH基因反义技术 rnai 双价植物表达载体; Keywords Narcissus tazetta var.chinensis LCYE gene BCH gene Antisense techniques rnai Dual plant expression vector; 分类号 S682.21 [农业科学—观赏园艺]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名玉米ZmSUT4基因RNAi植物表达载体的构建被引量：2: 2; 作者弓雪姜敏齐欣李明马骏刘欣芳王延波; 机构辽宁省农业科学院玉米研究所; 出处《江苏农业科学》北大核心 2016年第7期42-44,共3页; 基金国家自然科学基金(编号:31401392) 辽宁省博士启动基金(编号:201501112) +1 种基金 2014ZX08003-003); 文摘蔗糖转运蛋白(sucrose transporters,SUCs或SUTs)是蔗糖装载、卸载、分配的重要载体,Zm SUT4是玉米低亲和、高转运能力SUT4亚族的唯一成员。以黄早四Zm SUT4全长c DNA序列为模板,设计带有限制性内切酶位点的特异性引物,PCR扩增获得正向、反向2个片段,将反向、正向片段双酶切后依次插入p Green-HY104植物表达载体中,从而构建由35S启动子调控的Zm SUT4基因RNA干扰(RNAi)的植物表达载体HY104-A-S,然后通过冻融法将载体质粒转入含有p Soup质粒的农杆菌EHA105中。Zm SUT4基因RNAi的植物表达载体的构建为研究Zm SUT4基因的功能奠定了基础。; 关键词玉米 ZmSUT4基因 rnai植物表达载体构建; 分类号 S513.03 [农业科学—作物学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化被引量：1: 3; 作者谢丽娟陶瑶钟思荣吴凌敏聂亚平周玮刘栋王建革刘齐元; 机构江西农业大学农学院/作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室/江西省作物生理生态与遗传育种重点实验室南昌职业学院湖南农业大学生物安全科学技术学院/植物病虫害生物学与防控湖南省重点试验室江西农业大学园林与艺术学院; 出处《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期28-36,共9页; 基金国家自然科学基金项目(31260350 31301388) 江西省教育厅科技计划项目(GJJ13275)~~; 文摘 atp9基因是烟草的雄性不育相关基因。为研究atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用,根据atp9基因全长序列,设计特异性引物,扩增正、反义干扰片段,将长度为239bp的atp9基因的正、反向干扰片段分别连接到linker片段的两侧,最后插入到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功地构建了atp9基因的RNAi表达载体。利用农杆菌介导法将其转化烟草保持系品种中烟90,结果证明atp9基因的RNAi表达载体已整合到中烟90基因组中。经抗性筛选以及分子检测最终获得41株转pCAMBIA1301-atp9-RNAi烟草植株,其中阳性烟草有20株,转化率为48.8%。研究结果为下一步验证atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用奠定了基础。; 关键词烟草 atp9基因 rnai 表达载体构建遗传转化; Keywords tobacco atp9 gene rnai vector construction genetic transformation; 分类号 S572.032 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究被引量：9: 4; 作者陈利平陈平华陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯; 机构福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室国家甘蔗工程技术中心农业部甘蔗及制品质检中心转基因检测室; 出处《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期99-106,共8页; 基金国家自然科学基金项目(No.31070330) 福建省自然科学基金(No.2014J01092); 文摘甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。; 关键词甘蔗黄叶病毒甘蔗花叶病毒 CP基因双价rnai表达载体构建遗传转化; Keywords SCYLV SCMV CP gene Construction of binary ihpRNA expression vector Genetic transformation; 分类号 S566.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名薄荷GPPS基因原核表达及RNA干扰载体构建被引量：2: 5; 作者于盱梁呈元刘艳李维林; 机构江苏省中国科学院植物研究所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期84-88,共5页; 基金江苏省自然科学基金项目(BK2010475) 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(11)1021]; 文摘利用薄荷挥发油合成途径关键酶之一的薄荷牻牛儿基焦磷酸合酶(GPPS)基因特异引物,扩增得到GPPS基因开放式阅读框(1 131 bp),并将其插入到原核表达载体pET-28a中,经酶切测序验证的重组质粒pET-28a-GPPS转入Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表达融合蛋白。结果显示,终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导后6 h,SDS-PAGE显示薄荷GPPS基因在Rosetta(DE3)中获得高效表达。目前利用RNA干扰技术研究基因功能的方法已日趋成熟,以GPPS大亚基基因为靶目标,成功构建了薄荷GPPS大亚基基因的pBI121-RNAi-GPPS干扰载体。; 关键词薄荷 GPPS 原核表达 rnai 载体构建; Keywords Mentha haplocalyx Briq. GPPS Prokaryotic expreesion rnai Vector construction; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双效表达载体的构建及其U6启动子的功能效率鉴定被引量：1: 6; 作者项海涛杨彬温峰琴胡永浩柳纪省; 机构甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期82-85,90,共5页; 基金国家"973"前期专项(2004CCA00500) 国家"863"项目(2006AA10A204); 文摘利用pBudcE4.1双表达载体构建shRNA与蛋白共表达载体,为双效疫苗的研制提供新的研究思路。以含U6启动子的载体为模板,PCR扩增得到U6启动子,用其置换载体pBudcE4.1内的CMV启动子的核心部分构建shRNA与蛋白共表达载体。用干扰绿色荧光蛋白表达的方法鉴定重组载体中的U6启动子能否启动shRNA的表达。经PCR扩增、双酶切鉴定及DNA测序证明成功构建了载体pBudcE4.1-U6。用干扰载体pBudcE4.1-U6-eGFPshRNA与含eGFP的载体共转染293T细胞后,荧光显微镜观察显示eGFP的表达量下降;流式细胞仪检测细胞的转染效率降低。研究结果证明U6启动子正常发挥作用。成功构建RNAi与蛋白共表达载体,为利用该载体研制动物双效疫苗奠定了基础。; 关键词 rnai 共表达载体 U6启动子构建鉴定; Keywords rnai Co-expression vector U6 promoter Construction Identification; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S572 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量：3: 7; 作者赵虹张惊宇徐万海杨子超赵庆杰; 机构哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科哈尔滨医科大学附属第一医院神经内科哈尔滨医科大学附属第四医院泌尿外科; 出处《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期623-627,共5页; 基金黑龙江省自然科学基金面上资助项目(D200980); 文摘目的:构建人STUB1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并进行鉴定。方法:针对筛选确定的人STUB1基因RNAi有效靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeI和EcoRI酶切后的pMagic 4.0载体连接,产生短发卡RNA慢病毒载体。PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,并包装成慢病毒颗粒。结果:PCR鉴定与DNA测序证实,合成的含STUB1 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。STUB1 shRNA慢病毒载体在293T细胞中成功包装成慢病毒颗粒。结论:成功构建人STUB1基因RNAi慢病毒载体以及包装成功慢病毒颗粒,为研究STUB1在胶质瘤发生发展过程中相关信号通路的作用,提供了稳定感染细胞的载体。; 关键词基因 RNA干扰慢病毒载体构建与鉴定 RNA interference LENTIVIRAL vector 慢病毒颗粒慢病毒表达载体构建人包装 rnai 胶质瘤发生寡核苷酸链 shRNA DNA测序载体连接阳性克隆信号通路筛选确定合成; Keywords Lentivirus/genet Genetic vectors RNA interference Glioma Polymerase chain reaction Lentiviral vector STUB1 RNA interference; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名盐胁迫条件下转录因子RAP2L14调控杨树生长研究被引量：2: 8; 作者王星斗黄娟娟樊艳刘强韩有志王升级; 机构山西农业大学林学院河北农业大学林学院; 出处《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第6期14-23,共10页; 基金山西农业大学生物育种工程项目(YZGC140) 国家自然科学基金(31800564)。; 文摘 [目的]ERF(ethylene response factor)转录因子家族基因能够调控植物应答高盐等逆境胁迫,参与植物生长发育等生物学过程。RAP2L14是ERF转录因子家族重要成员,本研究旨在探究其在杨树生长及应答盐胁迫过程中的功能。[方法]利用RT-qPCR及转录组测序技术分析‘84K杨’(Populus alba×P.glandulosa)转录因子RAP2L14基因应答盐胁迫表达模式。从‘84K杨’中克隆RAP2L14基因,对RAP2L14基因编码氨基酸序列及上游2000 bp区域启动子结构进行生物信息学分析,构建RAP2L14-RNAi植物表达载体,使用农杆菌叶盘介导法获得转基因84K杨,鉴定表明获得5个RAP2L14-RNAi抑制表达杨树转基因株系。并对盐胁迫条件下转基因株系基础生长指标进行分析。[结果]RAP2L14基因cDNA全长465 bp,共编码154个氨基酸,其表达受盐胁迫诱导。RAP2L14基因上游2000 bp启动子序列含有ABRE、ARE、CGTCA-motif等11个逆境胁迫相关作用元件。盐胁迫后,RAP2L14-RNAi转基因株系的生根率及株高明显低于对照,且生根起始时间推迟了2 d。[结论]杨树ERF转录因子基因RAP2L14为盐胁迫相关基因,其抑制表达提高了转基因株系对于盐胁迫的敏感性,限制了根的发生。本研究为揭示ERF转录因子在杨树分子育种及应答逆境胁迫方面提供候选基因及基础材料。; 关键词 ERF转录因子 84K杨 RAP2L14 rnai表达载体构建遗传转化盐胁迫; Keywords ERF Populus abla×P.glandulosa RAP2L14 rnai Genetic transformation Salt stress; 分类号 S722.36 [农业科学—林木遗传育种]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	中国水仙NtBCH基因的克隆及LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建	廖正平郑益平罗鹏吴雪琴曾黎辉	《热带作物学报》 CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	玉米ZmSUT4基因RNAi植物表达载体的构建	弓雪姜敏齐欣李明马骏刘欣芳王延波	《江苏农业科学》北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化	谢丽娟陶瑶钟思荣吴凌敏聂亚平周玮刘栋王建革刘齐元	《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究	陈利平陈平华陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯	《热带作物学报》 CSCD 北大核心	2016	9	在线阅读下载PDF 职称材料
5	薄荷GPPS基因原核表达及RNA干扰载体构建	于盱梁呈元刘艳李维林	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	双效表达载体的构建及其U6启动子的功能效率鉴定	项海涛杨彬温峰琴胡永浩柳纪省	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定	赵虹张惊宇徐万海杨子超赵庆杰	《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
8	盐胁迫条件下转录因子RAP2L14调控杨树生长研究	王星斗黄娟娟樊艳刘强韩有志王升级	《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2021	2	在线阅读下载PDF 职称材料