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几丁质酶基因与抗真菌蛋白基因、葡聚糖酶基因双价表达载体的构建及农杆菌工程菌株的重组被引量：4: 1; 作者王华周鹏郭安平《西北植物学报》 CAS CSCD 2002年第2期250-256,共7页; 几丁质酶 (Chitinase,Chi.)、β- 1 ,3 -葡聚糖酶 (β- 1 ,3 - Glucanase,Glu.)和萝卜抗真菌蛋白 (Rs- AFP2 )是植物体内正常的表达产物 ,它们对防御植物的真菌病害具有重要的作用。基于它们在功能上具有协同作用 ,本研究利用基因工程... 展开更多; 关键词几丁质酶葡聚糖酶抗真菌蛋白双价表达载体农杆菌工程菌株重组; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法被引量：2: 2; 作者刘明坤刘昌财 +3 位作者许志茹魏志刚阎秀峰刘关君《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期87-92,共6页; 通过对几种常用植物表达载体的35S和Tnos序列进行比对,设计带有酶切位点的引物35S和Tnos,通过PCR克隆了同时带有35S和Tnos序列的目的基因片段,通过定向的酶切、连接获得双价表达载体。此方法简化了植物双价表达载体构建过程,具有明显时... 展开更多; 关键词 35S Tnos pROKⅡ 双价表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

菜豆几丁质酶、烟草葡聚糖酶基因的分离克隆及双价表达载体的构建被引量：1: 3; 作者晏慧君张婷 +3 位作者杨春梅于丽霞张宝琼李涵《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2008年第6期867-872,共6页; 几丁质酶基因(Chitinase,Chi)和葡聚糖酶基因(β-1,3-glucanase,Glu)具有协同抗真菌作用,根据GenBank号M13968,X53600分别设计引物,经RT-PCR扩增,克隆菜豆Chi基因和烟草Glu基因,将两个目的基因分别连上CaMV35S启动子和终止子Nos,然后串... 展开更多; 关键词几丁质酶葡聚糖 pB1121 双价表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究被引量：4: 4; 作者陈英戴咏梅 +2 位作者黄敏仁诸葛强王明庥《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期81-85,共5页; 多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过... 展开更多; 关键词防御素基因NP1 天麻抗真菌蛋白基因翻肿双价抗病基因植物表达载体转基因烟草抗病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国水仙NtBCH基因的克隆及LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建被引量：3: 5; 作者廖正平郑益平 +2 位作者罗鹏吴雪琴曾黎辉《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第12期2382-2390,共9页; 参考洋水仙BCH基因设计引物,以中国水仙花瓣cDNA为模板克隆出中国水仙NtBCH基因,全长959 bp,编码303个氨基酸。以中国水仙LCYE和BCH为目的基因,利用pKANNBIAL、pBI121和pCAMBIA1301等载体构建了LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体,为... 展开更多; 关键词中国水仙 LCYE基因 BCH基因反义技术 RNAI 双价植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

海南PRSV-CP与rhIFNα-2b双价载体构建新策略被引量：3: 6; 作者周鹏郭安平黎小瑛《热带作物学报》 CSCD 2003年第3期58-62,共5页; 为了获得抗病毒能力较强的海南番木瓜转基因新品系,采用海南番木瓜环斑花叶病毒外壳蛋白(PapayaRing Spot Virus-Capsid Protein of Hainan,HPRSV-CP)和重组人源干扰素α-2b(recombinant human interferon-α 2b,rhIFNα-2b)为目的基因... 展开更多; 关键词海南番木瓜环斑花叶病毒外壳蛋重组人源干扰素α-2b 双价基因表达载体转基因抗病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究被引量：9: 7; 作者陈利平陈平华 +6 位作者陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期99-106,共8页; 甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分... 展开更多; 关键词甘蔗黄叶病毒甘蔗花叶病毒 CP基因双价RNAi表达载体构建遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

西伯利亚蓼铜伴侣蛋白与铜锌超氧化物歧化酶基因共转化烟草的耐盐性分析被引量：4: 8; 作者马静曲春浦 +2 位作者许志茹杨传平刘关君《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期208-217,共10页; 为验证西伯利亚蓼铜伴侣蛋白基因(Ps ATX)和铜锌超氧化物歧化酶基因(Ps SOD)共转化的烟草是否具有耐盐功能,分别构建了植物单价表达载体pROKⅡ-Ps ATX、pROKⅡ-Ps SOD和双价表达载体pROKⅡ-Ps ATX-PsSOD,通过农杆菌介导遗传转化烟草,PC... 展开更多; 关键词铜伴侣蛋白基因铜锌超氧化物歧化酶基因双价表达载体耐盐性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名几丁质酶基因与抗真菌蛋白基因、葡聚糖酶基因双价表达载体的构建及农杆菌工程菌株的重组被引量：4: 1; 作者王华周鹏郭安平; 机构西北农林科技大学葡萄酒学院中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室; 出处《西北植物学报》 CAS CSCD 2002年第2期250-256,共7页; 文摘几丁质酶 (Chitinase,Chi.)、β- 1 ,3 -葡聚糖酶 (β- 1 ,3 - Glucanase,Glu.)和萝卜抗真菌蛋白 (Rs- AFP2 )是植物体内正常的表达产物 ,它们对防御植物的真菌病害具有重要的作用。基于它们在功能上具有协同作用 ,本研究利用基因工程技术构建了几丁质酶和抗真菌蛋白、几丁质酶和葡聚糖酶双价表达载体 ,通过农杆菌直接转化技术将双价表达载体转入农杆菌EH A1 0 5 ,最后采用 PCR、DNA dot; 关键词几丁质酶葡聚糖酶抗真菌蛋白双价表达载体农杆菌工程菌株重组; Keywords chitinase β-1,3-Glucanase Rs-AFP2 bivalent-expression vectors Agrobacterium tumefaciens; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学] Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法被引量：2: 2; 作者刘明坤刘昌财许志茹魏志刚阎秀峰刘关君; 机构东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期87-92,共6页; 基金黑龙江省科技攻关重点项目(GB06B303); 文摘通过对几种常用植物表达载体的35S和Tnos序列进行比对,设计带有酶切位点的引物35S和Tnos,通过PCR克隆了同时带有35S和Tnos序列的目的基因片段,通过定向的酶切、连接获得双价表达载体。此方法简化了植物双价表达载体构建过程,具有明显时间短、效率高、不需要中间载体、检测简单等特点,而且引物对于多数常用35S组成型植物表达载体是通用的,为快速构建35S组成型植物双价表达载体提供了一种新方法。; 关键词 35S Tnos pROKⅡ 双价表达载体; Keywords 35S Tnos pROKⅡ Dual-gene expression vectors; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学] S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名菜豆几丁质酶、烟草葡聚糖酶基因的分离克隆及双价表达载体的构建被引量：1: 3; 作者晏慧君张婷杨春梅于丽霞张宝琼李涵; 机构云南省农业科学院花卉研究所云南省花卉技术工程中心西南林学院植物保护学院云南农业大学园林园艺学院; 出处《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2008年第6期867-872,共6页; 基金云南省科技基金项目(C020210); 文摘几丁质酶基因(Chitinase,Chi)和葡聚糖酶基因(β-1,3-glucanase,Glu)具有协同抗真菌作用,根据GenBank号M13968,X53600分别设计引物,经RT-PCR扩增,克隆菜豆Chi基因和烟草Glu基因,将两个目的基因分别连上CaMV35S启动子和终止子Nos,然后串联在一起共同组建于一个表达载体pBI121中,重组表达质粒经过限制性酶切分析鉴定,结果表明含有双价抗真菌基因的植物重组表达载体已构建成功。为非洲菊、香石竹等花卉抗真菌基因工程育种奠定了基础。; 关键词几丁质酶葡聚糖 pB1121 双价表达载体; Keywords Chitinase （Chi） β-1, 3-glucanase （Glu） pBI121 bivalent expression vector; 分类号 S336 [农业科学—作物遗传育种]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究被引量：4: 4; 作者陈英戴咏梅黄敏仁诸葛强王明庥; 机构南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室上海市花卉育种中心; 出处《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期81-85,共5页; 基金上海市农业科技攻关项目(第4-4号) 南京林业大学高学历人才基金项目资助。; 文摘多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过根癌农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,PCR和PCR-Southern分析证明已将NP1和GAFP基因整合到烟草基因组中。离体抑菌实验表明转基因植株对真菌和细菌表现出一定的抗性。以上结果表明通过该表达载体进行遗传转化可获得含双价抗病基因植物,并能有效表达,提高转基因植物抗病能力。; 关键词防御素基因NP1 天麻抗真菌蛋白基因翻肿双价抗病基因植物表达载体转基因烟草抗病性; Keywords NP1 Gastrodia Antifungal Protein （GAFP） vector with two anti-disease genes transgenic tobacco diseaseresistance; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国水仙NtBCH基因的克隆及LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建被引量：3: 5; 作者廖正平郑益平罗鹏吴雪琴曾黎辉; 机构福建农林大学园艺学院; 出处《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第12期2382-2390,共9页; 基金福建省自然科学基金项目(No.2011J01084); 文摘参考洋水仙BCH基因设计引物,以中国水仙花瓣cDNA为模板克隆出中国水仙NtBCH基因,全长959 bp,编码303个氨基酸。以中国水仙LCYE和BCH为目的基因,利用pKANNBIAL、pBI121和pCAMBIA1301等载体构建了LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体,为利用基因工程技术改良中国水仙奠定了基础。; 关键词中国水仙 LCYE基因 BCH基因反义技术 RNAI 双价植物表达载体; Keywords Narcissus tazetta var.chinensis LCYE gene BCH gene Antisense techniques RNAi Dual plant expression vector; 分类号 S682.21 [农业科学—观赏园艺]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海南PRSV-CP与rhIFNα-2b双价载体构建新策略被引量：3: 6; 作者周鹏郭安平黎小瑛; 机构中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室; 出处《热带作物学报》 CSCD 2003年第3期58-62,共5页; 基金国家"863"项目资助(2002AA241141); 文摘为了获得抗病毒能力较强的海南番木瓜转基因新品系,采用海南番木瓜环斑花叶病毒外壳蛋白(PapayaRing Spot Virus-Capsid Protein of Hainan,HPRSV-CP)和重组人源干扰素α-2b(recombinant human interferon-α 2b,rhIFNα-2b)为目的基因,利用pBI121、pCAMBIA2300载体及相关技术(如技术基因内部位点突变套叠PCR),实施双价基因表达载体的构建策略。本研究成果可为其他多价基因表达载体的构建提供技术依据。; 关键词海南番木瓜环斑花叶病毒外壳蛋重组人源干扰素α-2b 双价基因表达载体转基因抗病性; Keywords PRSV-CP of Hainan rhIFN α-2b dual expression vector; 分类号 S432.23 [农业科学—植物病理学] S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究被引量：9: 7; 作者陈利平陈平华陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯; 机构福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室国家甘蔗工程技术中心农业部甘蔗及制品质检中心转基因检测室; 出处《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期99-106,共8页; 基金国家自然科学基金项目(No.31070330) 福建省自然科学基金(No.2014J01092); 文摘甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。; 关键词甘蔗黄叶病毒甘蔗花叶病毒 CP基因双价RNAi表达载体构建遗传转化; Keywords SCYLV SCMV CP gene Construction of binary ihpRNA expression vector Genetic transformation; 分类号 S566.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名西伯利亚蓼铜伴侣蛋白与铜锌超氧化物歧化酶基因共转化烟草的耐盐性分析被引量：4: 8; 作者马静曲春浦许志茹杨传平刘关君; 机构东北林业大学生命科学学院东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室; 出处《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期208-217,共10页; 基金中央高校基本科研业务费专项资金(DL13EA03-01) 国家自然科学基金项目(31370662 31470664); 文摘为验证西伯利亚蓼铜伴侣蛋白基因(Ps ATX)和铜锌超氧化物歧化酶基因(Ps SOD)共转化的烟草是否具有耐盐功能,分别构建了植物单价表达载体pROKⅡ-Ps ATX、pROKⅡ-Ps SOD和双价表达载体pROKⅡ-Ps ATX-PsSOD,通过农杆菌介导遗传转化烟草,PCR验证转基因植株后测定了盐胁迫条件下转基因烟草的丙二醛(MDA)、活性氧、脯氨酸含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,以此鉴定转基因植株的耐盐性。结果表明:(1)Ps ATX和Ps SOD基因已成功整合到烟草基因组中;(2)在100 mmol·L-1Na Cl处理条件下,转双价基因植株的MDA、活性氧、脯氨酸含量均比野生型和转单价基因植株低,而SOD活性则高于这两类植株。证明Ps ATX和Ps SOD基因共转化的烟草植株比转单价基因植株具有更强的耐Na Cl能力。本研究将为研究Ps ATX和Ps SOD基因的抗逆机制奠定分子基础。; 关键词铜伴侣蛋白基因铜锌超氧化物歧化酶基因双价表达载体耐盐性; Keywords PsATX PsSOD dual-gene expression vector salt tolerance; 分类号 Q949.744 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	几丁质酶基因与抗真菌蛋白基因、葡聚糖酶基因双价表达载体的构建及农杆菌工程菌株的重组	王华周鹏郭安平	《西北植物学报》 CAS CSCD	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法	刘明坤刘昌财许志茹魏志刚阎秀峰刘关君	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	菜豆几丁质酶、烟草葡聚糖酶基因的分离克隆及双价表达载体的构建	晏慧君张婷杨春梅于丽霞张宝琼李涵	《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究	陈英戴咏梅黄敏仁诸葛强王明庥	《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	中国水仙NtBCH基因的克隆及LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建	廖正平郑益平罗鹏吴雪琴曾黎辉	《热带作物学报》 CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	海南PRSV-CP与rhIFNα-2b双价载体构建新策略	周鹏郭安平黎小瑛	《热带作物学报》 CSCD	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究	陈利平陈平华陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯	《热带作物学报》 CSCD 北大核心	2016	9	在线阅读下载PDF 职称材料
8	西伯利亚蓼铜伴侣蛋白与铜锌超氧化物歧化酶基因共转化烟草的耐盐性分析	马静曲春浦许志茹杨传平刘关君	《植物研究》 CAS CSCD 北大核心	2015	4	在线阅读下载PDF 职称材料