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FoxO1对高NEFA诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子表达的影响
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作者 刘佳金 温小庆 +4 位作者 罗春海 贾红豆 王薇 李丹阳 付世新 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4708-4717,共10页
旨在探究叉头盒蛋白O1(fork head box O 1,FoxO1)对高浓度非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)状态下的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子表达变化的影响。通过实时荧光定量PCR法及Western blot法评价添加激活剂白藜芦醇(resvera... 旨在探究叉头盒蛋白O1(fork head box O 1,FoxO1)对高浓度非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)状态下的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子表达变化的影响。通过实时荧光定量PCR法及Western blot法评价添加激活剂白藜芦醇(resveratrol)后沉默信息调节因子(silent information regulator 1,SIRT1)的表达效果,明确奶牛子宫内膜上皮细胞中FoxO1的表达情况。加入Resveratrol和高浓度的NEFA后,检测FoxO1通路关键因子及细胞凋亡相关因子蛋白的表达变化情况。与对照组相比,添加Resveratrol上调SIRT1的蛋白和mRNA表达水平(P<0.01),下调Ac-FoxO1蛋白表达水平(P<0.01);下调Caspase-3蛋白表达水平无显著影响(P>0.05),上调Bcl-2、Bcl-xl的蛋白表达水平(P<0.01),下调Bax和Bax/Bcl-2的蛋白表达水平(P<0.05)。与NEFA组相比,NEFA+Resveratrol组上调IGF-1、SIRT1和p-AKT蛋白表达水平(P<0.01),下调FoxO1、p-FoxO1、Ac-FoxO1、FoxO1/p-FoxO1、AKT和AKT/p-AKT蛋白表达水平(P<0.01),上调Bcl-xl和Bcl-2蛋白表达水平(P<0.01),下调Caspase-3、Bax和Bax/Bcl-2蛋白表达水平(P<0.01)。激光共聚焦检测结果显示,NEFA+Resveratrol组与NEFA组相比,抑制FoxO1的表达水平(P<0.01)。Resveratrol可有效激活SIRT1的表达,进而抑制FoxO1的表达,降低高浓度NEFA状态下奶牛子宫内膜上皮细胞中凋亡因子的表达水平。 展开更多
关键词 奶牛子宫内膜上皮细胞 非酯化脂肪酸 沉默信息调节因子1 蛋白o1 凋亡因子
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高NEFA经FoxO1途径诱导奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡机制的研究
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作者 温小庆 罗春海 +2 位作者 曹一鸣 李美娟 付世新 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第5期56-62,共7页
为揭示高NEFA经FoxO1途径诱导奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的机制,研究通过添加0、0.2、1.2 mM的NEFA刺激奶牛子宫内膜上皮细胞12 h,应用流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期情况,应用WB和qRT-PCR技术检测FoxO1、pFoxO1、Caspase-3、Bcl-2... 为揭示高NEFA经FoxO1途径诱导奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的机制,研究通过添加0、0.2、1.2 mM的NEFA刺激奶牛子宫内膜上皮细胞12 h,应用流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期情况,应用WB和qRT-PCR技术检测FoxO1、pFoxO1、Caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白和mRNA表达水平。结果显示:NEFA在低浓度0.2 m M时细胞凋亡无明显变化,在高浓度1.2 mM时细胞凋亡极显著增多(P<0.01);NEFA在高浓度1.2 mM时极显著上调G1期细胞数量,显著下调G2期细胞数量;NEFA在低浓度0.2 mM时对细胞内Caspase-3、Bcl-2、Bax、FoxO1和p-FoxO1蛋白表达无显著影响(P>0.05);NEFA在1.2 mM时极显著上调细胞内Caspase-3、Bax、FoxO1和p-FoxO1的蛋白表达(P<0.01),NEFA在高浓度1.2 mM时极显著下调Bcl-2的蛋白表达(P<0.01)。NEFA在低浓度0.2 mM时对细胞内Caspase-3、Bcl-2、Bax、FoxO1的mRNA表达无显著影响(P>0.05);NEFA在1.2 mM时极显著上调细胞内Caspase-3、Bax和FoxO1的mRNA表达水平(P<0.01),极显著下调Bcl-2的mRNA水平(P<0.01)。研究表明,高浓度NEFA可以通过FoxO1途径诱导奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡和细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 非酯化脂肪酸 细胞凋亡 奶牛子宫内膜上皮细胞 叉头盒o蛋白1
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甲状腺功能亢进激活心肌细胞β-catenin/FoxO1诱导大鼠心室重构的作用 被引量:1
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作者 袁勋 班莉 +5 位作者 田松麟 朱秋连 张贵平 覃媛 潘丽 侯宁 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期393-411,共19页
【目的】探究甲亢激活心肌细胞β-catenin/FoxO1诱导大鼠心室重构的作用和机制。【方法】通过甲状腺激素(T40.1 mg/kg/day;腹腔注射)连续给药30 d构建甲亢诱导心室重构大鼠体内模型。利用β-catenin抑制剂MSAB(14 mg/kg)同时给药30 d,通... 【目的】探究甲亢激活心肌细胞β-catenin/FoxO1诱导大鼠心室重构的作用和机制。【方法】通过甲状腺激素(T40.1 mg/kg/day;腹腔注射)连续给药30 d构建甲亢诱导心室重构大鼠体内模型。利用β-catenin抑制剂MSAB(14 mg/kg)同时给药30 d,通过Western-blot检测心肌肥厚主要标志物ANP以及β-catenin、FoxO1等蛋白的表达情况;免疫荧光检测β-catenin、FoxO1的核内外表达及分布情况。利用原代培养的乳鼠心肌细胞,使用甲状腺激素(T320 nmol/L)处理心肌细胞24 h构建体外甲亢诱导心肌细胞肥厚模型,利用β-cateninsiRNA(30 nmol/L)转染心肌细胞敲低β-catenin,Western-blot和免疫荧光检测抑制β-catenin对甲亢诱导乳鼠心肌细胞肥厚的影响。【结果】Wnt/β-catenin通路激活后β-catenin入核增多并于细胞核内的转录因子结合发挥转录调控作用。β-catenin在甲亢诱导的大鼠心室重构模型心肌细胞核内表达显著增加,而其经典下游转录因子TCF7l2表达无显著差异。我们的结果显示,MSAB抑制β-catenin明显改善甲亢诱导的大鼠心室重构。进一步研究表明甲亢诱导大鼠心肌肥厚过程中心肌细胞β-catenin/FoxO1表达明显增强,抑制心肌细胞β-catenin/FoxO1改善甲亢诱导大鼠心肌肥厚。【结论】甲亢性心肌肥厚心肌细胞β-catenin/FoxO1活化,抑制β-catenin/FoxO1改善甲状腺激素诱导的心肌细胞肥大。 展开更多
关键词 甲状腺功能亢进症 心肌肥厚 Β-连环素 o1蛋白 心肌细胞肥大 MSAB 甲状腺激素
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电针对MPTP诱导帕金森病小鼠FoXO1/NLRP3通路介导神经炎症的影响 被引量:6
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作者 胡梦妮 张小蕾 +3 位作者 荣臻 汪瑶 李亚楠 马骏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期1494-1499,共6页
目的探究电针对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)模型小鼠的作用机制是否与叉头盒蛋白O1(FoXO1)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路介导的神经炎症相关。方法将30只小鼠随机分为对照组(Ctrl)、模型组... 目的探究电针对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)模型小鼠的作用机制是否与叉头盒蛋白O1(FoXO1)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路介导的神经炎症相关。方法将30只小鼠随机分为对照组(Ctrl)、模型组(MPTP)、电针组(EA),每组10只。连续7 d腹腔注射MPTP 30 mg/(kg•d)制备PD小鼠模型。采用旷场实验及爬杆实验观察小鼠行为学;免疫组化观察小鼠中脑黑质α-突触核蛋白(α-syn)表达水平;蛋白免疫印迹测定Iba-1、FoXO1、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平;ELISA法检测中脑黑质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)炎症因子表达水平。结果MPTP组小鼠出现显著的行为学障碍,中脑黑质α-syn明显增加(P<0.01),Iba-1、FoXO1、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白水平升高(P<0.05,P<0.01),TNF-α、IL-1β含量明显增加(P<0.01)。EA治疗后能有效改善PD小鼠运动障碍,提高运动平衡及协调能力(P<0.01),减少α-syn的异常聚集(P<0.01),减轻小胶质细胞异常活化,缓解神经炎症(P<0.05)。结论电针可能通过调控FoXO1/NLRP3通路介导的神经炎症,在PD中发挥保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 电针 神经炎症 蛋白o1 NoD样受体热蛋白结构域相关蛋白3
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EGF促进绵羊附睾上皮细胞体外增殖的研究
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作者 栾兆进 宋慧子 +3 位作者 杜炜 赵勇超 王兆琛 张家新 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2020年第5期9-16,共8页
【目的】探讨表皮生长因子(EGF)对体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)增殖的影响。【方法】分离培养EECs,利用免疫荧光检测角蛋白18(CK18)对分离的细胞进行鉴定,用CCK-8法测定EGF的最佳作用质量浓度,用RT-PCR检测EECs中附睾分子标记——... 【目的】探讨表皮生长因子(EGF)对体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)增殖的影响。【方法】分离培养EECs,利用免疫荧光检测角蛋白18(CK18)对分离的细胞进行鉴定,用CCK-8法测定EGF的最佳作用质量浓度,用RT-PCR检测EECs中附睾分子标记——谷胱甘肽过氧化物酶-5(GPX5)和雄激素受体(AR)基因的表达情况,用流式细胞仪法检测EGF对EECs细胞周期和凋亡的影响。将P4代EECs分别用表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂Gefitinib、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路抑制剂LY294002和DMSO(对照组)处理后,再用EGF培养,用流式细胞仪法检测细胞周期和凋亡情况。将P4代EECs分别用EGF(-)、EGF、EGF+Gefitinib和EGF+LY294002处理后,用Western blot检测细胞中EGFR、AKT和叉头盒蛋白O1(FOXO1)磷酸化水平。【结果】分离培养的EECs可表达CK18,细胞纯度较好;EGF对EECs增殖促进效应呈浓度依赖性,用含50 ng/mL EGF培养基培养的EECs具有最高的增殖潜能,且不同传代EECs细胞均可正常表达GPX5和AR;EGF处理S期EECs细胞比例极显著升高(P<0.01),凋亡指数显著降低(P<0.05)。与对照组相比,Gefitinib组S期EECs细胞比例极显著降低(P<0.01),LY294002组S期细胞比例显著降低(P<0.05);Gefitinib组EECs细胞的凋亡指数极显著升高(P<0.01),而LY294002组EECs细胞的凋亡指数无显著变化。EGF组中EECs细胞的EGFR、AKT和FOXO1磷酸化水平较高;与EGF组相比,EGF+Gefitinib组中EECs细胞的EGFR、AKT和FOXO1磷酸化水平明显降低,而EGF+LY294002组中EECs细胞的AKT和FOXO1磷酸化水平明显降低。【结论】EGF可增强绵羊EECs体外生长活力,其作用机制可能是EGF通过介导EGFR和PI3K/AKT信号通路上调了FOXO1的磷酸化水平。 展开更多
关键词 表皮生长因子 附睾上皮细胞 绵羊 细胞增殖 蛋白o1
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