miR-155-5p靶向调控叉头框蛋白3影响脐带间充质干细胞衰老

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作者 林晓波 李伟中 +6 位作者 庄静文 陈洁玲 侯凯翔 蔡灿鑫 曾纪斌 黄东乔 刘沐芸 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1494-1503,共10页

近期研究表明,miR-155-5p能通过影响线粒体裂变导致骨髓干细胞衰老,但其能否影响脐带间充质干细胞的衰老及作用机制尚不清楚。为研究其影响及机制,从脐带组织中获取P0代脐带间充质干细胞,逐代传至P10代,采用RT-qPCR检测发现,miR-155-5p... 近期研究表明,miR-155-5p能通过影响线粒体裂变导致骨髓干细胞衰老,但其能否影响脐带间充质干细胞的衰老及作用机制尚不清楚。为研究其影响及机制,从脐带组织中获取P0代脐带间充质干细胞,逐代传至P10代,采用RT-qPCR检测发现,miR-155-5p的表达在P10代显著升高(P<0.001)。过表达miR-155-5p的P2代脐带间充质干细胞发现,叉头框蛋白3(forkhead box O3,FOXO3)及自噬相关基因LC 3和Beclin-1表达下降。通过TargetScan在线数据库预测,FOXO 3的3′UTR区域与miR-155-p存在特异结合位点,双荧光素酶报告基因结果证实,FOXO 3为miR-155-5p的靶基因之一。向P10代脐带间充质干细胞转染miR-155-5p inhibitor后,经Western免疫印迹检测发现,FOXO3、p-AMPK、LC3 II/I和Beclin-1蛋白质表达显著升高(P<0.01或0.001),衰老相关蛋白质p16、p21和p53显著下降(P<0.01或0.001)。经β-半乳糖苷酶活性染色后发现,转染miR-155-5p inhibitor的P10代脐带间充质干细胞显著降低β-半乳糖苷酶的表达(P<0.01)。RT-qPCR法和ELISA法分别检测转染miR-155-5p inhibitor的P10代脐带间充质干细胞和其培养的上清后发现,TGF-β、HGF和VEGF的基因表达及蛋白质分泌水平均显著升高(P<0.05或0.01)。经静脉注射脐带间充质干细胞治疗支气管肺发育不良的新生大鼠模型发现,转染miR-155-5p inhibitor的P10代脐带间充质干细胞显著提升新生大鼠生存率(P<0.05),并显著改善新生大鼠肺部病理损伤。综上所述,miR-155-5p通过负调控FOXO 3基因影响脐带间充质干细胞衰老,miR-155-5p inhibitor的应用是通过FOXO 3/AMPK信号通路增加细胞自噬而逆转脐带间充质干细胞衰老。 展开更多

关键词 miR-155-5p 脐带间充质干细胞 细胞衰老 叉头框蛋白3

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叉头框蛋白O3a在失神经肌萎缩中的研究进展

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作者 郭孝静 王艳 +5 位作者 张立 裴飞 吴珊红 张博 秦欢 王淑瑾 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期267-271,共5页

骨骼肌失神经后,肌纤维直径和横截面积减小,导致肌肉质量下降。实验证明,叉头框蛋白O3a(FoxO3a)作为叉头框转录因子亚家族O重要成员之一,对失神经肌萎缩有着重要的调节作用。本文从FoxO3a的结构和功能、上游翻译后修饰和下游靶基因的调... 骨骼肌失神经后,肌纤维直径和横截面积减小,导致肌肉质量下降。实验证明,叉头框蛋白O3a(FoxO3a)作为叉头框转录因子亚家族O重要成员之一,对失神经肌萎缩有着重要的调节作用。本文从FoxO3a的结构和功能、上游翻译后修饰和下游靶基因的调控方面,阐述其作为重要的治疗靶点在失神经肌萎缩中的重要意义,旨在未来延缓失神经肌萎缩方面提供精准的理论依据并寻求新的靶点和治疗方法。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O3a(FoxO3a) 失神经肌萎缩 乙酰化修饰 甲基化修饰 磷酸化修饰

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叉头框蛋白O3a在神经退行性疾病中靶向研究进展

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作者 李莎 崔春爱 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期423-427,共5页

神经退行性疾病是大脑或脊髓内特定神经元细胞群的丢失或进程性病变而导致的不可逆的神经功能障碍性疾病。神经炎症、氧化应激、线粒体功能障碍、兴奋性毒性和蛋白质聚集可促进神经退行性病变过程。叉头框蛋白O3a(FoxO3a)是Forkhead转... 神经退行性疾病是大脑或脊髓内特定神经元细胞群的丢失或进程性病变而导致的不可逆的神经功能障碍性疾病。神经炎症、氧化应激、线粒体功能障碍、兴奋性毒性和蛋白质聚集可促进神经退行性病变过程。叉头框蛋白O3a(FoxO3a)是Forkhead转录因子FoxO亚家族的一个重要成员,通过磷酸化、泛素化介导的降解、微信号转导以及相关蛋白通路,在细胞增殖、凋亡、自噬、活性氧(ROS)解毒方面发挥着重要作用,与神经退行性疾病的发生与发展息息相关。本文重点对近年来FoxO3a在神经退行性疾病中的作用机制及相关通路的靶向作用进行阐述,旨在为该病的防治提供新的研究思路。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O3a 神经退行性疾病 靶向研究

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叉头框蛋白O3通过调控Nod样受体蛋白3炎性小体抑制心脏成纤维细胞衰老 被引量：2

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作者 师莹 张艺扉 +3 位作者 赵莉莉 李曦铭 任珉 秦勤 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期1306-1309,共4页

目的 研究叉头框蛋白O3(FoxO3)在心脏成纤维细胞(CF)衰老中的作用及机制。方法 选取新生Wistar乳鼠第五代CF随机分为小干扰RNA转染对照(siNC)组和siFoxO3组(n=3)。siFoxO3组转染FoxO3小干扰RNA。通过实时定量PCR和免疫印迹法检测衰老和... 目的 研究叉头框蛋白O3(FoxO3)在心脏成纤维细胞(CF)衰老中的作用及机制。方法 选取新生Wistar乳鼠第五代CF随机分为小干扰RNA转染对照(siNC)组和siFoxO3组(n=3)。siFoxO3组转染FoxO3小干扰RNA。通过实时定量PCR和免疫印迹法检测衰老和Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体相关基因以及FoxO3表达情况。结果 与原代CF比较,第五代CF中细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂2A(p16)和细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂1A(p21)mRNA表达、p21和平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)蛋白表达明显升高(P<0.05)。第五代CF中FoxO3 mRNA和蛋白表达明显低于原代(0.67±0.10 vs 1.03±0.02,0.47±0.12 vs 0.95±0.05,P<0.05)。与siNC组比较,siFoxO3组细胞中FoxO3 mRNA表达明显降低,而p16和p21 mRNA表达、p21蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。与siNC组比较,siFoxO3组细胞中NLRP3、硫氧还蛋白结合蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1、白细胞介素1βmRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论 FoxO3通过调控NLRP3炎性小体抑制CF衰老,为衰老相关心血管疾病提供靶点。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O3 成纤维细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 肌动蛋白类 β半乳糖苷酶类

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叉头框蛋白D3在胃贲门腺癌组织中的表达及其对SGC-7901细胞生物学行为的影响

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作者 杨阳 王欣晨 +4 位作者 牛云峰 郭炜 梁佳 郭艳丽 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期810-817,共8页

目的:探讨叉头框蛋白D3(forkhead box protein D3,FOXD3)在胃贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中的表达及其对SGC-7901细胞生物学行为的影响。方法:从河北医科大学第四医院生物标本库中选取2014年6月至2016年12月手术切除... 目的:探讨叉头框蛋白D3(forkhead box protein D3,FOXD3)在胃贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中的表达及其对SGC-7901细胞生物学行为的影响。方法:从河北医科大学第四医院生物标本库中选取2014年6月至2016年12月手术切除的49例GCA组织及相应癌旁组织标本,qRT-PCR检测FOXD3在GCA组织、癌旁组织以及在5种胃癌细胞系中(BGC-823、SGC-7901、HGC-27、MGC-803及NCI-N87)的表达。向SGC-7901细胞转染pc-DNA3.1-FOXD3或pc-DNA3.1,采用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验分别检测FOXD3过表达对SGC-7901细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响,qRT-PCR及WB法检测细胞转染前后上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA及蛋白的表达情况,流式细胞术检测转染前后细胞周期改变。结果:GCA组织中FOXD3 mRNA的表达量明显降低,其表达水平与患者临床分期和淋巴结转移密切关联;FOXD3在胃癌细胞系中的表达均低于正常细胞(均P<0.01)。FOXD3过表达能明显抑制SGC-7901细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力(均P<0.01),提高SGC-7901细胞中E-cadherin的表达水平,减少N-cadherin、β-catenin和vimentin的表达水平(均P<0.01),使细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.01)。结论:FOXD3在GCA组织中的表达明显下调,其过表达可以抑制胃癌细胞的生物学行为,FOXD3可作为抑癌基因为肿瘤治疗提供新思路。 展开更多

关键词 胃贲门腺癌 叉头框蛋白D3 SGC-7901细胞 上皮-间质转化 增殖 迁移 侵袭 细胞周期

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外周血叉头框蛋白P3的表达与原因不明复发性流产关系的研究 被引量：4

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作者 赵广彩 陈文惠 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期683-688,共6页

目的:探讨外周血叉头框蛋白P3(Foxp3)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:选择2018年5月至2020年5月于本院进行治疗的126例URSA患者作为URSA组,选择同期于本院进行产前检查的82例健康孕妇作为对照组。比较两组的一般资料;实... 目的:探讨外周血叉头框蛋白P3(Foxp3)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:选择2018年5月至2020年5月于本院进行治疗的126例URSA患者作为URSA组,选择同期于本院进行产前检查的82例健康孕妇作为对照组。比较两组的一般资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Foxp3的mRNA表达;多因素Logisitic回归分析影响URSA发生的相关因素;Pearson相关性分析外周血Foxp3水平与导致URSA发生的危险因素的相关性;流式细胞术检测Foxp3对Th17/Treg平衡的调控作用;ROC曲线分析Foxp3水平对发生URSA的预测价值,并评价其准确度和有效性。结果:两组的孕酮、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)、Foxp3、Th17、Treg、Th17/Treg差异均有统计学意义(P<0.05)。孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平及IL-6、IL-17、Th17水平、Th17/Treg比值均是影响URSA发生的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。Foxp3分别与孕酮、IL-10、TGF-β、Treg呈显著正相关(r>0,P<0.05),与IL-6、IL-17、Th17、Th17/Treg呈显著负相关(r<0,P<0.05);Foxp3刺激CD4+T细胞12小时和24小时能够显著降低Th17细胞比例和Th17/Treg比值,增加Treg细胞比例。ROC曲线分析Foxp3预测URSA发生的曲线下面积为0.795,准确度和有效性较好。结论:孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平降低及IL-6、IL-17、Th17水平及Th17/Treg比值增加均可能导致URSA的发生风险增加,Foxp3对Th17/Treg平衡具有调控作用。 展开更多

关键词 叉头框蛋白P3 原因不明的复发性流产 Th17/Treg平衡 细胞因子

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叉头框蛋白O3a在缺血性脑卒中的作用及靶向干预的研究进展 被引量：3

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作者 李智莹 蔡小燕 +1 位作者 周柯冰 闫凤侠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期937-944,共8页

脑卒中(stroke)是危害人类健康的常见多发病,也是导致人类致死和致残的主要原因之一。全球疾病负担研究(GBD 2019)显示,仅2019年全球脑卒中发病率为150.8/10万,死亡率84.2/10万。脑卒中每年造成550万人死亡,4 400万人身体残疾[1-2]。《... 脑卒中(stroke)是危害人类健康的常见多发病,也是导致人类致死和致残的主要原因之一。全球疾病负担研究(GBD 2019)显示,仅2019年全球脑卒中发病率为150.8/10万,死亡率84.2/10万。脑卒中每年造成550万人死亡,4 400万人身体残疾[1-2]。《中国脑卒中防治报告2020》显示,我国脑卒中发病率高达201/10万,其中以缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)为主,约占69.6%~70.8%[3]。目前,临床上治疗脑卒中以溶栓、介入为主,因适应证和治疗时间窗选择要求较高,导致符合治疗标准的患者较为局限. 展开更多

关键词 叉头框蛋白O3a 缺血性脑卒中 靶向干预

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β-淀粉样蛋白对叉头蛋白O3a和突触后致密蛋白95的影响 被引量：1

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作者 牛波 王欣怡 +1 位作者 徐江平 汪海涛 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期676-685,共10页

【目的】为了研究β-淀粉样蛋白(Aβ)产生神经毒性的机制,本研究探讨了Aβ对凋亡相关核转录因子叉头蛋白O3a(FoxO3a)和突触后致密蛋白95(PSD95)的作用及可能的机制。【方法】采用梯度浓度(5、10、20μmol/L)寡聚化的Aβ25-35处理PC12细... 【目的】为了研究β-淀粉样蛋白(Aβ)产生神经毒性的机制,本研究探讨了Aβ对凋亡相关核转录因子叉头蛋白O3a(FoxO3a)和突触后致密蛋白95(PSD95)的作用及可能的机制。【方法】采用梯度浓度(5、10、20μmol/L)寡聚化的Aβ25-35处理PC12细胞和神经元24 h,采用Westernblot法检测FoxO3a和PSD95的变化。免疫荧光法检测PC12细胞中PSD95表达量的变化和FoxO3a在细胞内的定位。在Aβ25-35海马注射的大鼠和APP/PS1转基因鼠中,考察脑组织中PSD95和FoxO3a的变化。采用WesternBlot法检测体外环境和在体环境中,Aβ对FoxO3a和蛋白激酶B(AKT)磷酸化的影响。【结果】与正常对照组相比,20μmol/L的Aβ25-35处理组PSD95蛋白水平下调至(45.09±1.61)%(F=7.487,P=0.0540)。与之对应,20μmol/L的Aβ25-35上调FoxO3a的蛋白水平为对照组的(228.7±20.44)%(F=17.48,P=0.0210)。在原代培养的神经元中,获得了相似的结果。另外,免疫荧光的结果显示Aβ25-35可以促进FoxO3a进入细胞核。大鼠海马注射Aβ25-35后,水迷宫实验中目标区域的平均停留时间为(24.35±1.29)s(F=2.843,P=0.098),平均穿越次数为(2.53±0.49)次(F=3.459,P=0.0149),与对照组相比都显著降低。RT-PCR结果显示Aβ25-35组大鼠海马组织中PSD95的mRNA水平下降为对照组的(58.40±8.28)%(F=1.193,P=0.0101),同时FoxO3a的mRNA的表达量上调(140.90±7.45)%(F=2.378,P=0.0496)。在7月龄的APP/PS1转基因小鼠的大脑组织中,PSD95的mRNA和蛋白水平分别下调为野生型小鼠的(60.89±1.53)%(F=20.05,P=0.0088)和(59.63±13.55)%(F=8.496,P=0.0445),而FoxO3a的mRNA和蛋白水平则分别上调为对照组的(172.4±4.87)%(F=2.351,P=0.0004)和(235.00±39.03)%(F=2.754,P=0.0320)。20μmol/L的Aβ25-35处理PC12细胞不同时间后(5、10、20和40 min),FoxO3a和AKT的磷酸化水平随着时间增长而降低,APP/PS1转基因小鼠脑组织中的AKT和FoxO3a的磷酸化水平与对照组相比也显著下降至(65.75±3.51)%(F=6.362,P=0.0236)和(46.62±9.64)%(F=8.562,P=0.0079)。【结论】Aβ在体外细胞模型和体内动物模型中都可以上调核转录因子FoxO3a的表达,下调PSD95的水平,可能的机制是通过去磷酸化AKT从而减少了PSD95的合成,同时降低了FoxO3a的磷酸化水平并增加FoxO3a的表达量。 展开更多

关键词 Β-淀粉样蛋白 叉头框蛋白O3a 突触后致密蛋白95 蛋白激酶B 老年性痴呆

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血清FOXO3和TXNIP对老年PCI术后患者发生主要心血管不良事件的预测价值 被引量：1

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作者 谢立新 李桂娇 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第4期301-305,共5页

目的探讨血清叉头框蛋白O3(FOXO3)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗(PCI)患者术后发生主要心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法选取2021年6月至2023年5月我院收治的120例老年... 目的探讨血清叉头框蛋白O3(FOXO3)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗(PCI)患者术后发生主要心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法选取2021年6月至2023年5月我院收治的120例老年CHD患者为研究对象,患者均行PCI。随访12个月后(失访6例),根据患者是否发生MACE(复发心绞痛、急性心肌梗死、严重心律失常)分为MACE组(n=40)和非MACE组(n=74)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中FOXO3和TXNIP水平;采用Pearson相关分析评估CHD患者血清FOXO3和TXNIP水平的相关性;受试者操作特征(ROC)曲线分析血清FOXO3和TXNIP对CHD患者PCI术后发生MACE的预测价值。logistic回归分析影响CHD患者PCI术后MACE发生的因素。结果与非MACE组相比,MACE组患者血清中FOXO3水平显著降低,TXNIP水平显著升高(P<0.05)。Pearson相关分析显示,CHD患者血清FOXO3和TXNIP水平呈负相关(r=-0.586,P<0.001)。logistic回归分析结果显示,FOXO3和TXNIP是CHD患者PCI术后发生MACE的影响因素(P<0.05)。血清FOXO3和TXNIP联合预测CHD患者PCI术后发生MACE的曲线下面积(AUC)高于FOXO3和TXNIP单独预测(Z=7.583,P<0.001;Z=8.640,P<0.001)。结论PCI术后发生MACE的CHD患者血清中FOXO3呈低表达,TXNIP呈高表达,FOXO3和TXNIP对老年CHD患者PCI术后发生MACE有临床预测价值。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O3 硫氧还蛋白相互作用蛋白 冠状动脉粥样硬化性心脏病 经皮冠状动脉介入治疗

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FOXO3a蛋白在缺氧小鼠脑组织中的表达 被引量：4

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作者 钱敏 高帅芸 +3 位作者 王波 梁慧欣 陆一鸣 叶静 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第1期61-66,共6页

目的:探讨叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在缺氧小鼠大脑组织中的表达。方法:16只SPF级3月龄C57小鼠随机分为对照组(control)和缺氧组(hypoxia)。两组小鼠分别接受常氧浓度环境及低氧环境处理1 h,应用Western Blot法定量检测FOXO3a蛋白的表达水... 目的:探讨叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在缺氧小鼠大脑组织中的表达。方法:16只SPF级3月龄C57小鼠随机分为对照组(control)和缺氧组(hypoxia)。两组小鼠分别接受常氧浓度环境及低氧环境处理1 h,应用Western Blot法定量检测FOXO3a蛋白的表达水平;应用免疫荧光染色技术检测FOXO3a蛋白在脑组织中的表达分布。结果:与control组比较,应用Western Blot检测,发现缺氧后小鼠脑组织FOXO3a蛋白表达水平上调;免疫荧光检测显示缺氧小鼠的脑皮层、海马区中FOXO3a蛋白表达水平明显升高(P<0.01),其中神经元及星形胶质细胞的FOXO3a表达均明显升高(P<0.01)。结论:缺氧可导致小鼠脑皮层、海马区神经元及星形胶质细胞FOXO3a蛋白表达上调。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O3a 缺氧 脑损伤 神经元 星形胶质细胞 小鼠

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贝母素乙调节FOXO3-FOXM1信号轴对卵巢癌生物学行为和化疗耐药性的影响 被引量：1

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作者 杨发珍 张红敏 +1 位作者 着么 王乾印 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期976-982,共7页

目的探讨贝母素乙(PMI)调节叉头框蛋白O3(FOXO3)-叉头框转录因子M1(FOXM1)信号轴对卵巢癌增殖、侵袭、迁移、凋亡和化疗耐药性的影响。方法以卵巢癌SKOV3细胞、SKOV3/顺铂(DDP)细胞为研究对象,MTT法检测DDP对SKOV3细胞、SKOV3/DDP细胞... 目的探讨贝母素乙(PMI)调节叉头框蛋白O3(FOXO3)-叉头框转录因子M1(FOXM1)信号轴对卵巢癌增殖、侵袭、迁移、凋亡和化疗耐药性的影响。方法以卵巢癌SKOV3细胞、SKOV3/顺铂(DDP)细胞为研究对象,MTT法检测DDP对SKOV3细胞、SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况以及PMI对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况;将SKOV3/DDP细胞分为对照组(正常培养)、DDP组(20μg/mL DDP)、L-PMI组、M-PMI组、H-PMI组(20μg/mL DDP联合50、100、200μmol/L PMI)、甘珀酸(CBX)组(20μg/mL DDP和200μmol/L PMI联合50 ng/mL CBX)。平板克隆实验检测SKOV3/DDP细胞的增殖;Transwell TM实验检测SKOV3/DDP细胞的侵袭和迁移;流式细胞术检测SKOV3/DDP细胞的凋亡率;Western blot法检测SKOV3/DDP细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、多药耐药相关蛋白5抗体(MRP5)、FOXO3、FOXM1蛋白表达量。结果SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞增殖抑制率在DDP干预下以浓度依赖性的方式显著增加,且SKOV3细胞的增殖抑制率高于SKOV3/DPP细胞。SKOV3/DDP细胞增殖抑制率在PMI干预下以浓度依赖性的方式显著增加。DDP组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FOXM1蛋白表达低于对照组,凋亡率、caspase-3、FOXO3蛋白表达高于对照组;与DDP组比较,L-PMI组、M-PMI组、H-PMI组的克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FOXM1蛋白表达显著下降,凋亡率、caspase-3、FOXO3蛋白表达显著上升;CBX组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FOXM1蛋白表达显著高于H-PMI组,凋亡率、caspase-3、FOXO3蛋白表达显著低于H-PMI组。结论PMI可能是通过激活FOXO3,抑制FOXM1,进而抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移和化疗耐药。 展开更多

关键词 贝母素乙 叉头框蛋白O3 叉头框转录因子M1 卵巢癌 肿瘤免疫微环境

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镁对哮喘患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡及Foxp3表达的影响 被引量：2

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作者 梁瑞韵 伍卫 +3 位作者 黄瑾 江山平 黄林洁 李依群 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1690-1694,共5页

目的:观察镁对分离培养的健康人和哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞凋亡及叉头框蛋白3(Foxp3)表达的影响。方法:经磁珠分离法分离出健康人和哮喘患者外周血CD4+CD25+T细胞,分镁剂干预组(10 mmol/L)及空白组培养72 h后,用流式细胞仪检... 目的:观察镁对分离培养的健康人和哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞凋亡及叉头框蛋白3(Foxp3)表达的影响。方法:经磁珠分离法分离出健康人和哮喘患者外周血CD4+CD25+T细胞,分镁剂干预组(10 mmol/L)及空白组培养72 h后,用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞的凋亡率及Foxp3表达情况。结果:(1)健康人外周血CD4+CD25+T细胞的纯度为77.4%～92.3%,哮喘患者CD4+CD25+T细胞的纯度为75.2%～93.8%。(2)CD4+CD25+T细胞占外周血CD4+T细胞的比例在健康组为4.12%～7.98%,在哮喘组为4.51%～8.68%,两者没有显著差异(P>0.05)。(3)镁(10 mmol/L)可以诱导健康组及哮喘组外周血CD4+CD25+T细胞凋亡率增加(P<0.05),但对Foxp3的表达无影响(P>0.05)。结论:镁促进CD4+CD25+T调节细胞凋亡增加可能为其治疗支气管哮喘的作用机制之一。 展开更多

关键词 镁 哮喘 T淋巴细胞 调节性 细胞凋亡 叉头框蛋白3

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针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节性T细胞的影响 被引量：6

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作者 高伟娜 呙月 +5 位作者 王丽君 唐潇 刘亚飞 陈镇燕 张明敏 黄光英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1464-1470,共7页

目的:观察针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法:144只孕鼠随机分为对照组(N)、米非司酮组(M)、米非司酮+针刺组(A)和米非司酮+黄体酮组(W),每组随机再分为6 d组、8 d组和10 d组。其中M组、A组和W组妊娠1 d给予... 目的:观察针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法:144只孕鼠随机分为对照组(N)、米非司酮组(M)、米非司酮+针刺组(A)和米非司酮+黄体酮组(W),每组随机再分为6 d组、8 d组和10 d组。其中M组、A组和W组妊娠1 d给予米非司酮-麻油溶液造模,N组则给予等量麻油溶液。同时,每天下午A组固定并行针刺三阴交和后三里,N组和M组仅固定,W组肌肉注射黄体酮,直到处死当天结束。统计孕鼠胚胎着床数,用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜的CD4+Foxp3+Treg细胞的比例,Western blotting和real-time PCR测定着床点的子宫内膜Foxp3的表达。结果:与N组相比,M组的着床胚胎数、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例、着床点子宫内膜Foxp3蛋白和mRNA的表达均明显下降(P<0.05);与M组相比,A组和W组的着床胚胎数、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例以及着床点子宫内膜Foxp3蛋白和mRNA的表达均有不同程度地升高。结论:针刺改善胚胎着床障碍大鼠的胚胎着床可能与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的调节密切相关。 展开更多

关键词 针刺 胚胎着床 子宫内膜 外周血 T淋巴细胞 调节性 叉头框P3蛋白

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有氧运动通过调节FoxO3a磷酸化及亚细胞定位减轻小肠缺血再灌注损伤 被引量：1

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作者 韩雪 张新敏 +2 位作者 陈岱莉 曹君 黄晓雷 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期439-444,共6页

目的探讨有氧运动通过调控叉头框家族蛋白O3a(forkhead box protein O3a,FoxO3a)活性在C57BL/6小鼠小肠缺血/再灌注(II/R)损伤中的保护作用及机制。方法6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为静息+假手术(SS)组、静息+II/R(SI)组、游泳训练+II... 目的探讨有氧运动通过调控叉头框家族蛋白O3a(forkhead box protein O3a,FoxO3a)活性在C57BL/6小鼠小肠缺血/再灌注(II/R)损伤中的保护作用及机制。方法6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为静息+假手术(SS)组、静息+II/R(SI)组、游泳训练+II/R(TI)组和游泳训练+II/R+FoxO3a磷酸化激活剂SC79(TSC)组。TI和TSC组进行为期5周的游泳训练,所有小鼠于训练结束后3 d行II/R术,SS组不夹闭血管,TSC组小鼠于再灌注前1 h腹腔注射0.04 mg/g SC79。再灌注2 h后处死小鼠取标本,苏木精-伊红染色观察小肠组织病理改变,DHE染色检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。同时检测小肠组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。Western blot法检测Ser253磷酸化叉头框家族蛋白O3a(P-FoxO3a^(Ser253))、FoxO3a表达。qRT-PCR检测抗氧化基因锰超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,MnSOD)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator 1α,PGC1α)的表达。结果II/R前行有氧运动干预,通过发挥抗氧化应激作用,减轻II/R损伤。与SI组小鼠相比,TI组小鼠小肠组织细胞质内P-FoxO3a^(Ser253)表达水平下调(P<0.01),细胞核内FoxO3a含量提高(P<0.01),抗氧化基因MnSOD和PGC1α的表达增加(P<0.05和P<0.01),小肠组织ROS生成减少(P<0.01),氧化应激产物MDA含量明显下降(P<0.05),抗氧化酶CAT和SOD含量增加(P<0.05和P<0.01);再灌注前腹腔注射SC79后,上述有氧运动减轻II/R损伤作用被抵消。结论有氧运动通过调节FoxO3a磷酸化及亚细胞定位减轻C57BL/6小鼠II/R损伤。 展开更多

关键词 有氧运动 叉头框家族蛋白O3a 磷酸化 氧化应激 肠缺血再灌注损伤

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川陈皮素通过激活SIRT1/FOXO3a信号来减轻肾缺血再灌注损伤 被引量：5

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作者 曹雯 徐玉祥 +3 位作者 范丽 郭洁 李江 张九芝 《世界中医药》 CAS 2023年第15期2134-2141,共8页

目的:本研究旨在探究川陈皮素(NOB)保护小鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的可能分子机制。方法:将Balb/c小鼠分为5组(n=6):假手术组、模型组、NOB组(50 mg/kg)、组蛋白去乙酰化酶沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂EX527组(5 mg/kg)、NOB+EX527... 目的:本研究旨在探究川陈皮素(NOB)保护小鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的可能分子机制。方法:将Balb/c小鼠分为5组(n=6):假手术组、模型组、NOB组(50 mg/kg)、组蛋白去乙酰化酶沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂EX527组(5 mg/kg)、NOB+EX527组(50 mg/kg的NOB+5 mg/kg EX527)。在建模前24 h对小鼠进行药物处理。通过阻断小鼠左肾动静脉血流建立RIRI模型。建模24 h后检测肾组织中氧化应激标志物含量。通过苏木精-伊红(HE)染色和天狼星红染色评价肾组织病变和纤维化。通过TUNEL染色检测肾细胞凋亡。通过蛋白质免疫印迹法检测肾组织中SIRT1、叉头框蛋白O3a(FOXO3a)、细胞凋亡和自噬相关蛋白表达。通过实时荧光定量PCR检测肾组织中SIRT1和FOXO3a mRNA的水平。结果:与模型组比较,NOB组小鼠肾脏病变程度减轻,肾脏纤维化面积降低(均P<0.05)。与模型组比较,NOB组肾组织抗氧化作用升高(P<0.05)。与模型组比较,NOB组肾组织中细胞凋亡减少(P<0.05)。与模型组比较,NOB组肾组织中SIRT1和FOXO3a的mRNA和蛋白相对表达量升高,微管相关蛋白轻链(LC)3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白相对表达量升高,而p62降低(均P<0.05)。此外,EX527逆转了NOB对肾脏的保护作用(P<0.05)。结论:NOB通过激活SIRT-1/FOXO3a信号通路介导的自噬来减轻RIRI。 展开更多

关键词 川陈皮素 肾脏缺血再灌注损伤 肾脏保护 自噬 炎症 氧化应激 组蛋白去乙酰化酶沉默信息调节因子1/叉头框蛋白O3a信号通路

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E-cadherin和FOXO3a在胃癌组织和细胞中表达的关系 被引量：9

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作者 陈发帅 薛长年 +6 位作者 刘世佳 王梦丹 马子涵 孙海斌 郑鹏远 郭彦伟 张自森 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期442-447,共6页

目的:探讨上皮钙黏素(E-cadherin)和叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在胃癌组织和细胞中表达的关系及意义。方法:应用免疫组织化学法检测53例胃癌组织及对应癌旁组织中E-cadherin和FOXO3a的表达情况,分析两者的表达水平及与临床病理参数的关系。... 目的:探讨上皮钙黏素(E-cadherin)和叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在胃癌组织和细胞中表达的关系及意义。方法:应用免疫组织化学法检测53例胃癌组织及对应癌旁组织中E-cadherin和FOXO3a的表达情况,分析两者的表达水平及与临床病理参数的关系。构建E-cadherin过表达的胃癌稳转细胞株AGS,免疫细胞化学法检测E-cadherin及FOXO3a蛋白表达,Western blot法检测细胞中E-cadherin、FOXO3a、Akt、Bcl-2和Bax的蛋白表达,CCK-8法检测细胞活力。结果:胃癌组织中E-cadherin和FOXO3a的阳性率较对应癌旁组织均显著降低(P<0.05)。E-cadherin表达与胃癌分化程度和TNM分期显著相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤部位、T分期及淋巴结转移无显著相关。FOXO3a表达与胃癌分化程度显著相关(P<0.05),与年龄、性别、部位、TNM分期、T期及淋巴结转移无显著相关。胃癌组织中E-cadherin与FOXO3a表达存在显著正相关(r=0.376,P=0.003)。E-cadherin过表达后,胃癌AGS细胞活力显著下降,细胞中FOXO3a和Bax表达显著升高,Akt表达显著下降。结论:E-cadherin与FOXO3a共同参与胃癌的发生发展,E-cadherin可能通过调节Akt/FOXO3a信号传导影响胃癌细胞活力。 展开更多

关键词 胃癌 上皮钙黏素 叉头框蛋白O3a 细胞活力

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吉非替尼通过增加Foxo3a活性抑制肺纤维化小鼠上皮-间质转分化 被引量：6

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作者 彭婷 杜海坚 +2 位作者 李理 李伟峰 黄文杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期444-448,共5页

目的:研究吉非替尼对肺纤维化小鼠转录因子叉头框蛋白O3a(Foxo3a)活性、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平及相关通路的影响,探讨吉非替尼抑制肺上皮-间质转分化的可能机制。方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为3组:对照组(生理盐水气管... 目的:研究吉非替尼对肺纤维化小鼠转录因子叉头框蛋白O3a(Foxo3a)活性、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平及相关通路的影响,探讨吉非替尼抑制肺上皮-间质转分化的可能机制。方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为3组:对照组(生理盐水气管内雾化)、博来霉素组(博来霉素3 mg/kg溶于100μL生理盐水气管内雾化)和吉非替尼处理组(博来霉素气管内雾化后,每天吉非替尼20 mg/kg溶于100μL生理盐水灌胃)。实验第14天收集样本,将小鼠肺组织置于10%中性甲醛固定,石蜡包埋切片后行HE与Masson染色;RT-PCR法检测Foxo3a和α-SMA mRNA表达水平;Western blotting法检测表皮生长因子受体(EGFR)、Akt、Foxo3a和α-SMA蛋白表达水平。结果:吉非替尼处理组小鼠肺组织病理损伤较博来霉素组明显减轻,胶原沉积明显减少,炎症损伤评分及纤维化评分明显下降(均P<0.01),Foxo3a mRNA表达水平明显升高(P<0.05),α-SMA mRNA表达水平明显下降(P<0.05),总Foxo3a蛋白表达增加,但Foxo3a磷酸化水平显著下降(P<0.01),胞核Foxo3a蛋白明显增加(P<0.05);同时,EGFR和Akt磷酸化水平也显著下降(P<0.01,P<0.05),上皮-间质转分化标志蛋白α-SMA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:吉非替尼抑制博来霉素诱导的肺纤维化,其机制可能与抑制EGFR/Akt通路活化、增强转录因子Foxo3a活性、从而抑制上皮-间质转分化密切相关。 展开更多

关键词 吉非替尼 叉头框蛋白O3a 肺纤维化 博来霉素 上皮-间质转分化

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梓醇通过FOXO3-FOXM1轴调控乳腺癌MCF-7细胞的增殖与凋亡 被引量：2

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作者 张腾 孙守毅 +1 位作者 侯海涛 李书恒 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期881-886,共6页

目的:探讨中药地黄提取物梓醇(Cat)对乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡,以及裸鼠移植瘤生长的影响及其机制。方法:以不同质量浓度(0、5、25、50、100、200μg/mL)Cat处理人乳腺癌MCF-7细胞,用MTT法筛选Cat给药浓度。将MCF-7细胞分为空白对照组... 目的:探讨中药地黄提取物梓醇(Cat)对乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡,以及裸鼠移植瘤生长的影响及其机制。方法:以不同质量浓度(0、5、25、50、100、200μg/mL)Cat处理人乳腺癌MCF-7细胞,用MTT法筛选Cat给药浓度。将MCF-7细胞分为空白对照组、Cat低剂量组、Cat中剂量组、Cat高剂量组、Cat+sh-NC组和Cat+sh-FOXO3组,采用Edu细胞增殖实验、平板克隆实验、流式细胞术分别检测各组细胞的增殖与克隆形成能力、凋亡率和细胞周期,WB法检测各组细胞中FOXO3、FOXM1、caspase-3和caspase-8蛋白表达。构建乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,观察Cat对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中FOXO3和FOXM1蛋白表达。结果:Cat低(50μg/mL)、中(100μg/mL)、高(200μg/mL)剂量处理的MCF-7细胞的增殖能力均显著下降(均P<0.05)。与空白对照组比较,Cat低、中、高剂量组Edu阳性细胞率、克隆形成数、S期与G2/M期细胞比例及FOXO3蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例及FOXM1、caspase-3、caspase-8蛋白表达均显著升高(均P<0.05);与Cat+sh-NC组比较,Cat+sh-FOXO3组Edu阳性细胞率、克隆形成数、S期与G2/M期细胞比例及FOXO3蛋白表达均显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例及FOXM1、caspase-3和caspase-8蛋白表达均显著下降(均P<0.05)。Cat组MCF-7细胞裸鼠移植瘤体积、质量和FOXO3蛋白表达均显著降低(均P<0.05),FOXM1的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:Cat抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并促进凋亡,在体内抑制裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与上调FOXO3、下调FOXM1的表达有关。 展开更多

关键词 梓醇 叉头框蛋白O3 叉头框蛋白M1 乳腺癌 MCF-7细胞 增殖 凋亡

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IRF4通过调控FOXP3影响支气管肺发育不良模型小鼠肺血管内皮细胞增殖 被引量：1

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作者 朱莹 何朗粤 +1 位作者 江健锋 卢红艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1366-1372,共7页

目的:通过分析干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)和叉头框蛋白P3(forkhead box P3,FOXP3)的相互作用及其与肺血管内皮细胞(pulmonary vascular endothelial cells,PVECs)增殖的关系,探讨IRF4在支气管肺发育不良(bro... 目的:通过分析干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)和叉头框蛋白P3(forkhead box P3,FOXP3)的相互作用及其与肺血管内皮细胞(pulmonary vascular endothelial cells,PVECs)增殖的关系,探讨IRF4在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型小鼠肺发育中的作用。方法:利用85%高氧暴露建立C57BL/6小鼠BPD模型,以空气暴露为正常对照,将小鼠分为常氧7 d(normoxia for 7 d,N7)组、高氧7 d(hyperoxia for 7 d,H7)组、常氧14 d(normoxia for 14 d,N14)组和高氧14 d(hyperoxia for 14 d,H14)组,每组6只。分别在空气或高氧暴露7 d和14 d取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理情况;免疫组化染色检测PVECs增殖标志物血小板内皮细胞黏附分子1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)的表达;Western blot检测血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)、FOXP3和IRF4蛋白的表达水平;免疫共沉淀检测IRF4和FOXP3蛋白的相互作用。结果:与同时间点常氧组相比,高氧组小鼠肺组织CD31阳性细胞平均光密度和肺血管密度均显著降低(P<0.01);高氧组小鼠肺组织VEGFA、Ang-1和FOXP3蛋白表达水平均显著降低,IRF4蛋白表达水平显著升高(P<0.01);免疫共沉淀提示IRF4和FOXP3存在相互作用,且高氧组较常氧组相互作用显著增强(P<0.01);IRF4和FOXP3蛋白表达呈显著负相关(R=-0.932,P<0.01),FOXP3蛋白表达与CD31呈显著正相关(R=0.865,P<0.01)。结论:在高氧诱导的BPD模型小鼠中,IRF4可能通过抑制FOXP3蛋白表达影响PVECs的增殖和肺血管发育。 展开更多

关键词 干扰素调节因子4 叉头框蛋白P3 肺血管内皮细胞 支气管肺发育不良

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半夏提取物通过AMPK/FOXO3a信号通路对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响 被引量：10

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作者 黄丽萍 郭腾飞 张文青 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2571-2576,共6页

目的:探讨半夏提取物(EP)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:采用卵清蛋白致敏和激发方式构建哮喘大鼠模型,分离并培养大鼠ASMCs,免疫荧光染色鉴定ASMCs中的α-肌动蛋白(α-actin),符合ASMCs特征后将AS... 目的:探讨半夏提取物(EP)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:采用卵清蛋白致敏和激发方式构建哮喘大鼠模型,分离并培养大鼠ASMCs,免疫荧光染色鉴定ASMCs中的α-肌动蛋白(α-actin),符合ASMCs特征后将ASMCs分为对照组、模型组、EP组、Compound C组、EP+Compound C组,MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、TNF-α水平;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、叉头框蛋白O3a(FOXO3a)、p-FOXO3a蛋白表达。结果:免疫荧光染色显示98%细胞的细胞质中呈现绿色荧光的肌丝,α-actin呈阳性表达,证明培养的细胞为ASMCs。与对照组比较,模型组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著升高,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,EP组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著降低,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a水平显著升高(P<0.05),而Compound C组上述对应指标呈相反趋势(P<0.05);与EP组比较,EP+Compound C组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著升高,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a水平显著降低(P<0.05)。结论:EP可能通过激活AMPK/FOXO3a通路抑制哮喘大鼠ASMCs增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 半夏提取物 哮喘 气道平滑肌细胞 细胞增殖 凋亡 腺苷酸活化蛋白激酶/叉头框蛋白O3a通路

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