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无细胞毒性猪去细胞真皮基质制备及转归研究 被引量：1
1
作者 马忠锋 柴家科 +2 位作者 杨红明 梁黎明 许明火 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1079-1081,共3页
目的制备无细胞毒性猪去细胞真皮基质(PADM),评价其生物安全性,并观察基质在体内的转归情况。方法取0.3～0.4mm厚的猪断层皮片,用高渗盐水浸泡去除表皮,然后置于氢氧化钠溶液中,常温下水浴持续震荡去除真皮细胞,获得PADM,经交联和消毒... 目的制备无细胞毒性猪去细胞真皮基质(PADM),评价其生物安全性,并观察基质在体内的转归情况。方法取0.3～0.4mm厚的猪断层皮片,用高渗盐水浸泡去除表皮,然后置于氢氧化钠溶液中,常温下水浴持续震荡去除真皮细胞,获得PADM,经交联和消毒后进行细菌学及猪病毒微生物学检测。将PADM植入SD大鼠皮下,于术后动态观察PADM大体及组织学形态变化。结果所获PADM柔软而有弹性,易于塑形,便于手术操作。PADM内无任何细胞成分,胶原纤维排列规则有序,弹力纤维丰富。细菌和病毒微生物学检测结果均为阴性。PADM植入SD大鼠皮下后未引发免疫排斥。术后3周,PADM与创面黏附牢固,不易从创面揭离;术后24周仍然可见其结构;早期PADM被大量炎性细胞浸润,随时间延长成纤维细胞逐渐增多,并出现新生的毛细血管,胶原纤维逐渐排列规则、致密。结论高渗盐水/氢氧化钠方法制备PADM过程简单,所得真皮基质无细胞毒性,生物安全性高,在体内可作为真皮支架长期存在。 展开更多
关键词 皮肤移植 去细胞真皮基质 胶原 猪
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去细胞真皮基质的黏弹性研究
2
作者 李晓阳 王鹏飞 +2 位作者 翟建明 赵京玉 宋慧锋 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期668-674,共7页
目的通过对比分析皮肤的物理参数值评价去细胞真皮基质的黏弹性性质。方法将清洁级日本大耳白兔背部皮肤进行3种不同的创面处理,分别为薄自体皮加上去细胞真皮基质移植到创面组(PADM组)、薄自体皮原位回植组(TS组)、正常皮肤真皮组(NS组... 目的通过对比分析皮肤的物理参数值评价去细胞真皮基质的黏弹性性质。方法将清洁级日本大耳白兔背部皮肤进行3种不同的创面处理,分别为薄自体皮加上去细胞真皮基质移植到创面组(PADM组)、薄自体皮原位回植组(TS组)、正常皮肤真皮组(NS组)。对该3组皮片进行应力-应变关系的实验。结果从PADM、TS、NS 3组皮肤的应力松弛曲线、蠕变曲线和应力-应变关系曲线可知,在一定应力下,PADM组的应变最小,NS组的应变最大,TS组居于两者之间。结论皮肤的黏弹性力学模型是4参量黏弹性模型。用去细胞真皮基质作为皮肤替代物移植到皮肤创面后,该植皮的弹性较差,变形后的恢复能力也较差,与临床结果相符合。 展开更多
关键词 应力 应变 蠕变 应力松弛 去细胞真皮基质 黏弹性
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鸵鸟去细胞异种角膜基质载体异位移植对BALB/c小鼠外周血T细胞亚群的影响 被引量：1
3
作者 刘先宁 吴洁 +3 位作者 肖湘华 潘士印 银勇 朱秀萍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期617-620,共4页
背景 鸵鸟去细胞角膜基质具有与人角膜基质相似的天然结构,有望成为直接应用或构建生物角膜理想的载体材料之一. 目的 用鸵鸟角膜制备去细胞基质载体,研究其免疫原性,为产业化开发早日用于临床提供实验基础.方法 收集新鲜鸵鸟和猪眼球... 背景 鸵鸟去细胞角膜基质具有与人角膜基质相似的天然结构,有望成为直接应用或构建生物角膜理想的载体材料之一. 目的 用鸵鸟角膜制备去细胞基质载体,研究其免疫原性,为产业化开发早日用于临床提供实验基础.方法 收集新鲜鸵鸟和猪眼球各20个,采用低温冷冻联合酶消化及干燥剂脱水法制备鸵鸟及猪去细胞角膜基质载体,用Co^60照射法进行消毒.按随机数字表法将雄性BALB/c小鼠45只随机分为伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组,伪手术组小鼠仅制作囊袋,不植入异种角膜基质片,其余两组分别取干燥脱水法制备的猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体（复水后每片湿质量为10 mg）异位植入BALB/c小鼠背部皮下,术后观察伤口愈合情况,并分别于术后7、14、28 d获取BALB/c小鼠外周血,进行免疫荧光标记及流式细胞仪分析,比较两种异种角膜基质对小鼠CD4^＋、CD8^＋、CD25^＋表型的动态影响.结果 猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体小鼠植入处皮肤无红肿及渗出,伤口愈合良好.术后7、14和28 d,伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组外周血中CD4^＋细胞百分率的差异均无统计学意义（F=0.74,P=0.50;F=0.39,P=0.05;F=3.46,P=0.58）;外周血中CD8^＋细胞百分率的差异均无统计学意义（F=1.75,P=0.21;F=1.14,P=0.35;F=0.78,P=0.48）;外周血中CD25^＋细胞百分率差异亦均无统计学意义（F=0.52,P=0.61;F=3.53,P=0.62;F=2.42,P=0.13）.结论 鸵鸟去细胞角膜基质载体的免疫原性低,具有重要的开发价值. 展开更多
关键词 鸵鸟 去细胞角膜基质 免疫原性 异位移植 T淋巴细胞 流式细胞术 近交系BALB C小鼠
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牛心包组织工程心脏瓣膜支架脱细胞的研究 被引量：5
4
作者 杨岷 成少飞 +4 位作者 王学宁 叶清 王维俊 王小妹 陈长志 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期72-75,共4页
目的研究去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,去除新鲜牛心包组织细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的支架材料。方法分别采用去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,处理新鲜牛心... 目的研究去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,去除新鲜牛心包组织细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的支架材料。方法分别采用去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,处理新鲜牛心包组织,光学显微镜、扫描电镜观察脱细胞效果和胶原纤维、弹力纤维改变;热皱缩实验、拉力测试观察基质的物理性能变化;DNA抽提比较脱细胞前后细胞数量差异。结果3种方法均能完全去除细胞,与去污剂-酶消化法比较,其他2种方法对基质的破坏明显。结论去污剂-酶消化法脱细胞效果好,且具有良好的保护基质能力。 展开更多
关键词 组织工程 心脏瓣膜 牛心包 去细胞基质
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人皮肤干细胞体外诱导分化构建人工结膜的实验 被引量：6
5
作者 孟繁剑 陈家祺 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期246-249,共4页
目的观察皮肤干细胞在结膜去细胞基质上的生长和分化情况,探讨利用皮肤干细胞及结膜去细胞基质构建人工结膜的可能性。方法将体外分离培养的1～2代人皮肤干细胞接种于人结膜去细胞基质上,在体外观察细胞的分化情况。标本分别行HE染色、... 目的观察皮肤干细胞在结膜去细胞基质上的生长和分化情况,探讨利用皮肤干细胞及结膜去细胞基质构建人工结膜的可能性。方法将体外分离培养的1～2代人皮肤干细胞接种于人结膜去细胞基质上,在体外观察细胞的分化情况。标本分别行HE染色、人上皮细胞角蛋白CK19单克隆抗体、结膜上皮细胞特异性标记蛋白CK8抗体、CK13抗体、MUC5A/C抗体免疫组化鉴定。结果皮肤干细胞在结膜去细胞基质等模拟的体外微环境下可形成类似结膜上皮细胞的复层增生,并有类结膜上皮细胞特异性标记蛋白表达,呈CK8抗体、CK13抗体、MUC5A/C抗体表达阳性。结论利用皮肤干细胞可在体外模拟的微环境下分化构建人工结膜,用于结膜移植眼表重建。 展开更多
关键词 皮肤干细胞 结膜去细胞基质 人工结膜
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外周血内皮祖细胞在去细胞猪主动脉瓣膜上种植的体外观察
6
作者 王进 郑奇军 +3 位作者 顾春虎 刘洋 康晓军 刘维永 《科学技术与工程》 2008年第9期2335-2339,共5页
为在体外观察外周血内皮祖细胞种植到去细胞猪主动脉瓣上的生长情况。采用TritonX-100联合胰蛋白酶、核酸酶去除猪主动脉瓣膜细胞。从志愿者外周血中分离培养内皮祖细胞,免疫荧光鉴定细胞后。将从外周血培养的EPC种植到去细胞猪主动脉... 为在体外观察外周血内皮祖细胞种植到去细胞猪主动脉瓣上的生长情况。采用TritonX-100联合胰蛋白酶、核酸酶去除猪主动脉瓣膜细胞。从志愿者外周血中分离培养内皮祖细胞,免疫荧光鉴定细胞后。将从外周血培养的EPC种植到去细胞猪主动脉瓣膜上,用HE、免疫组化染色和免疫荧光染色观察种植效果。结果显示猪主动脉瓣内的细胞去除彻底,但纤维支架保存良好。人外周血培养出的细胞,免疫荧光染色示ac-LDL和UEA-1阳性,提示为内皮祖细胞,种植后行HE染色可见到去细胞猪主动脉瓣膜表面单层内皮细胞生长,并且表达von Willebrand因子和CD31。 展开更多
关键词 组织工程心脏瓣膜 去细胞基质 内皮祖细胞
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重度碱烧伤早期异种去细胞角膜材料移植 被引量：1
7
作者 张超 金岩 +2 位作者 胡丹 聂鑫 刘源 《眼科新进展》 CAS 2006年第9期655-659,共5页
目的 观察重度碱烧伤后，早期（伤后1周内）行异种去细胞角膜材料板层移植手术治疗的可行性和疗效，并与同种异体角膜材料进行比较性研究。方法 将19只新西兰大白免制作成角膜重度碱烧伤模型，伤后1周，取16只随机分为2组，每组8只。一... 目的 观察重度碱烧伤后，早期（伤后1周内）行异种去细胞角膜材料板层移植手术治疗的可行性和疗效，并与同种异体角膜材料进行比较性研究。方法 将19只新西兰大白免制作成角膜重度碱烧伤模型，伤后1周，取16只随机分为2组，每组8只。一组行猪去细胞角膜材料板层移植；另一组行同种异体板层兔角膜移植。其余3只烧伤后不作任何处理，为空白对照组。术后进行大体观察、裂隙灯、病理学、角膜内皮染色观察。结果重度碱烧伤异种去细胞角膜材料移植后2～3周，有新生血管侵入植片边缘，植片为灰白色半透明状，移植区角膜上皮愈合。6周后，角膜植片新生血管开始减退，植片局部变透明。观察至28周，植片存活良好，无免疫排斥反应发生，炎症静止，眼表维持相对正常的结构，与同种异体角膜移植组治疗效果相同，可为以后的增视性手术创造良好的条件。结论用异种去细胞角膜基质材料对重度碱烧伤角膜进行移植手术治疗，可减轻伤后炎症反应，防止严重并发症的发生，维持了眼表结构。疗效与同种异体角膜移植相同。 展开更多
关键词 碱烧伤 移植 去细胞角膜基质材料
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脱细胞肠系膜制备生物膜支架的实验研究 被引量：1
8
作者 付勇 廖斌 +3 位作者 于风旭 李新 万居易 邓明彬 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期90-94,共5页
目的应用肠系膜脱细胞基质制备生物膜支架,探讨其理化特性和生物学特性。方法应用反复冻融肠系膜组织后,将肠系膜置于胰蛋白酶消化脱肠系膜脱细胞,并分为肠系膜基质组(A组)和去细胞肠系膜基质组(B组),通过HE染色、电镜、DNA检测、细胞... 目的应用肠系膜脱细胞基质制备生物膜支架,探讨其理化特性和生物学特性。方法应用反复冻融肠系膜组织后,将肠系膜置于胰蛋白酶消化脱肠系膜脱细胞,并分为肠系膜基质组(A组)和去细胞肠系膜基质组(B组),通过HE染色、电镜、DNA检测、细胞毒性实验、拉伸力学测试,检测两组肠系膜基质的理化特性;制备覆膜支架,植入兔髂血管,术后1周、1月、2月超声检测血管血流情况,血管取材病理检测。结果HE染色、电镜检测结果表明,B组基质组织疏松,纤维排列较整齐,未见细胞存留;DNA检测结果表明,B组DNA表达水平低,脱细胞较彻底;CCK-8细胞毒性实验检测结果表明,两组均无细胞毒性;FDA-PI荧光染色结果表明,两组细胞存活良好,未见死亡细胞;拉伸力学测试结果表明,两组最大拉伸力、最大力伸长率、屈服强度、屈服点伸长率差异无统计学意义;脱细胞肠系膜支架植入兔血管后超声检测两组早期通畅性良好,支架植入2月内皮增生较明显。结论冻融和酶消化法脱肠系膜细胞,肠系膜基质去除细胞彻底,无细胞毒性,力学特征良好;肠系膜支架植入血管后早期通畅性良好,2月后内皮增生明显。 展开更多
关键词 肠系膜 去细胞基质 生物膜支架
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大鼠生物活性组织工程角膜等效物穿透性移植后观察 被引量：1
9
作者 孟浩 惠延年 +2 位作者 林旭初 阎锋 金岩 《眼科新进展》 CAS 2007年第5期337-340,共4页
目的观察组织工程角膜等效物(tissue-engineered corneal equivalent,TECE)大鼠穿透性角膜移植后大体及组织病理学特点。方法脱细胞猪角膜基质(corneal acellu-lar matrix,CACM)接种7dSD大鼠原代角膜上皮细胞与基质细胞,气液面培养4～6... 目的观察组织工程角膜等效物(tissue-engineered corneal equivalent,TECE)大鼠穿透性角膜移植后大体及组织病理学特点。方法脱细胞猪角膜基质(corneal acellu-lar matrix,CACM)接种7dSD大鼠原代角膜上皮细胞与基质细胞,气液面培养4～6d至材料透明后作为TECE组植片,单纯CACM作为对照组植片,施行穿透性角膜移植术。术后观察角膜新生血管、植片混浊度、角膜细胞修复情况,2周、4周、8周、16周取材进行HE检查、20周取材进行透射电镜检查。结果TECE组术后10d角膜荧光素钠染色(-),对照组术后14d角膜荧光素钠染色(-);TECE组新生血管出现时间(5.00±1.22)d晚于对照组(3.80±0.84)d,差异有显著统计学意义(P<0.01),2周时TECE组新生血管面积(15.47±7.01)mm2少于对照组(62.75±29.22)mm2,差异有显著统计学意义(P<0.01)。拆线后2组角膜新生血管均大部分消退,植片逐渐透明;20周透射电镜检查提示2组均有新胶原形成,TECE组有神经纤维长入。结论以CACM为支架构建的组织工程角膜等效物可以抑制角膜新生血管形成,透明度高。 展开更多
关键词 角膜 组织工程 去细胞基质 生物支架材料 穿透性角膜移植术
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肝脏组织工程研究进展 被引量：3
10
作者 杨扬 王励 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第5期337-343,共7页
随着科学技术的迅速发展,通过干细胞与组织工程的新技术来再造人类肝脏,为解决供肝短缺提供了新的思路,是未来科学研究的重点。本文从去细胞化基质支架构建肝脏类器官、生物材料微型模具构建肝脏类器官、细胞诱导的无支架培养构建肝脏... 随着科学技术的迅速发展,通过干细胞与组织工程的新技术来再造人类肝脏,为解决供肝短缺提供了新的思路,是未来科学研究的重点。本文从去细胞化基质支架构建肝脏类器官、生物材料微型模具构建肝脏类器官、细胞诱导的无支架培养构建肝脏类器官、构建嵌合体制备人工肝脏等方面介绍肝脏组织工程研究的最新进展。 展开更多
关键词 肝移植 组织工程 去细胞化基质支架 生物材料微型模具 细胞诱导的无支架培养 干细胞 人工肝脏 类器官 嵌合体
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