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非对称灭活原生质体融合法选育头孢菌素C高产菌株 被引量:1
1
作者 蒲静 雷悦 +2 位作者 张世野 张成钢 徐威 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期167-170,共4页
目的选育高产头孢菌素C产生菌。方法分别以紫外线和加热灭活头孢菌素C产生菌Cephalosporium acremonium 18-U5和Cephalosporium acremonium 18-M6原生质体,并将两种灭活的原生质体经PEG4000融合,从融合株中筛选头孢菌素C高产菌株。结果... 目的选育高产头孢菌素C产生菌。方法分别以紫外线和加热灭活头孢菌素C产生菌Cephalosporium acremonium 18-U5和Cephalosporium acremonium 18-M6原生质体,并将两种灭活的原生质体经PEG4000融合,从融合株中筛选头孢菌素C高产菌株。结果获得高产头孢菌素C的顶头孢霉融合株Cephalosporium acremonium F20,发酵单位达4 655 mg.L-1。与双亲菌株相比分别提高了42.4%和34.9%。结论非对称灭活原生质体融合法选育头孢菌素C高产菌株的方法值得推广。 展开更多
关键词 头孢菌素C 顶头孢霉 原生质 融合 非对称灭活
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猕猴桃酒优质酵母的筛选及原生质体电融合条件初探 被引量:5
2
作者 张江波 岳田利 +1 位作者 高振鹏 袁亚宏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第8期12-16,共5页
通过对发酵力、耗糖速率的测定,结合发酵过程中酸度的变化,从16株酵母菌中筛选出2株作为原生质体电融合的亲本菌株,对其原生质体制备及再生条件进行了研究。确定了两亲本的灭活条件和原生质体电融合的2项基本参数。结果表明,两亲本的最... 通过对发酵力、耗糖速率的测定,结合发酵过程中酸度的变化,从16株酵母菌中筛选出2株作为原生质体电融合的亲本菌株,对其原生质体制备及再生条件进行了研究。确定了两亲本的灭活条件和原生质体电融合的2项基本参数。结果表明,两亲本的最佳酶解去壁条件为酶量16mg/mL,酶解时间60min,亲本WF58最佳热灭活时间为15min,亲本WF65最佳紫外灭活时间为40min;采用BTX830型细胞融合仪,最佳的脉冲场强为2000V/cm,最佳的脉冲时间是30μs。 展开更多
关键词 猕猴桃酒酵母 原生质电融合 双亲灭活 原生质制备和再生
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原生质体电融合选育米曲霉新菌株的研究 被引量:2
3
作者 唐洁 车振明 +1 位作者 李拴美 赵旭壮 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期219-223,共5页
本实验对米曲霉AS3.951和CICC2339的原生质体进行紫外灭活,然后对灭活双亲用CRY-3型细胞电融合仪进行原生质体电融合。通过筛选得到EF113和EF222两株融合株,其酶活力分别达到了7680U/g和7200U/g,远高于酶活低的亲本菌株AS3.951。
关键词 米曲霉 原生质 紫外灭活 电融合
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水稻原生质体电融合适宜条件的研究 被引量:3
4
作者 胡张华 张志宏 +2 位作者 颜秋生 张雪琴 陈锦清 《浙江农业学报》 CSCD 1997年第3期113-117,共5页
水稻原生质体电融合适宜条件为:交流电场强度250V/cm;交流频率500kHz;脉冲强度16kV/cm;脉冲宽度50us;脉冲个数为2。此时的1对1融合率为149%,总融合率达249%。在此条件下。
关键词 水稻 原生质 电融合
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原生质体电融合法构建葡萄酒降酸酵母的研究 被引量:3
5
作者 许俊艳 高年发 +1 位作者 张悦 孙晓雯 《酿酒科技》 北大核心 2008年第1期48-51,共4页
以发酵性能优良的葡萄酒酵母F83和具有降解苹果酸能力的酒类酒球菌作为亲本菌株,进行电融合,构建发酵性能良好且具有降解苹果酸能力的葡萄酒酵母菌株。结果表明,两亲本菌株原生质体电融合的最佳条件为:交变电压55 V,交变电场频率1000 k... 以发酵性能优良的葡萄酒酵母F83和具有降解苹果酸能力的酒类酒球菌作为亲本菌株,进行电融合,构建发酵性能良好且具有降解苹果酸能力的葡萄酒酵母菌株。结果表明,两亲本菌株原生质体电融合的最佳条件为:交变电压55 V,交变电场频率1000 kHz,脉冲宽度30μs,脉冲个数5个。共获得13株融合株,其中10号融合子发酵、降酸性能较佳。 展开更多
关键词 微生物 葡萄酒酵母 酒类酒球菌 原生质电融合 降酸 融合
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曲霉原生质体的制备与非对称灭活 被引量:1
6
作者 徐德峰 赵海锋 赵谋明 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期132-137,共6页
为提高菌丝原生质体的释放量和活力,分别考查了碳源、菌龄、渗透压稳定剂、酶浓度、酶解时间及再生培养基种类对Aspergillus oryzaeHN3042和Aspergillus niger CICC2377原生质体释放和再生的影响,并研究了两个亲本原生质体的非对称灭活... 为提高菌丝原生质体的释放量和活力,分别考查了碳源、菌龄、渗透压稳定剂、酶浓度、酶解时间及再生培养基种类对Aspergillus oryzaeHN3042和Aspergillus niger CICC2377原生质体释放和再生的影响,并研究了两个亲本原生质体的非对称灭活参数.确定了亲本原生质体的适宜制备参数.结果表明,以MPY液体培养基为菌丝培养基、0.7mol/L NaCl复合0.4mol/L山梨醇为渗透压稳定剂、以高渗豆汁固体培养基为再生培养基,原生质体有30%以上的再生率.通过非对称灭活曲线确定Aspergillus oryzae HN3042原生质体于15W紫光灯垂直距离13cm处照射15min,Aspergillus niger CICC2377原生质体于65℃水浴10min,可使亲本原生质体临界失活. 展开更多
关键词 曲霉 原生质 制备 再生 非对称灭活
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酱油主发酵酵母和后熟酵母原生质体电融合的研究 被引量:2
7
作者 王金英 孙瑾方 《中国调味品》 CAS 北大核心 1994年第7期17-18,31,共3页
报告了在酱油发酵中,产生乙醇的主发酵酵母(ZygoSaccharomycesrouxii)和生成4-乙基愈创木酚酱香成份的后熟酵母(Candidaversatilis)两菌株属间原生质体电诱导融合试验研究的初步结果。
关键词 酱油 发酵 酵母 原生质 电融合
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柑橘原生质体电融合研究进展 被引量:1
8
作者 刘继红 《世界农业》 北大核心 1998年第1期31-32,共2页
柑橘原生质体电融合研究进展华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室刘继红柑橘是多年生木本植物,童期长,遗传上高度杂合,一些主栽品种雄性败育(如温州蜜柑)或/和雌性败育(如脐橙),更为重要的是柑橘具有多胚性,使得杂交育种... 柑橘原生质体电融合研究进展华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室刘继红柑橘是多年生木本植物,童期长,遗传上高度杂合,一些主栽品种雄性败育(如温州蜜柑)或/和雌性败育(如脐橙),更为重要的是柑橘具有多胚性,使得杂交育种进展极为缓慢。而原生质体融合技术能... 展开更多
关键词 柑桔 原生质融合 育种 电融合 融合
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芦荟原生质体的电融合研究 被引量:2
9
作者 邢朝云 王剑文 《抗感染药学》 2009年第2期107-110,共4页
目的:探讨芦荟原生质体电融合条件,为芦荟种质改良提供细胞工程技术。方法:以芦荟无菌苗为材料,用化学酶解法处理芦荟幼叶得到原生质体,并且进行电融合。结果:在交流电电场强度(E)1.60×10^5V/m作用时间20s,直流脉冲强度... 目的:探讨芦荟原生质体电融合条件,为芦荟种质改良提供细胞工程技术。方法:以芦荟无菌苗为材料,用化学酶解法处理芦荟幼叶得到原生质体,并且进行电融合。结果:在交流电电场强度(E)1.60×10^5V/m作用时间20s,直流脉冲强度(E)0.90×10^6V/m、脉冲宽幅30μs,施加1次脉冲后,可使细胞有效融合率达到17.78%。结论:芦荟原生质体经过一定电场刺激,可实现原生质体的融合,供抗感染药用植物资源的种质改良提供参考。 展开更多
关键词 芦荟 原生质 电融合
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香蕉原生质体的电融合研究 被引量:1
10
作者 刘代 魏岳荣 胡家金 《湖南农业科学》 2010年第8期128-130,共3页
以香蕉栽培种"过山香"(Musa AAB Silk cv.Guoshanxiang)和野生阿宽蕉(Musa itinerans Cheesm.AB Group)原生质体为融合试材,进行香蕉高效融合的电融合参数优化。研究表明,在交变电场(AC)200 V/cm、AC作用时间30 s、直流脉冲电... 以香蕉栽培种"过山香"(Musa AAB Silk cv.Guoshanxiang)和野生阿宽蕉(Musa itinerans Cheesm.AB Group)原生质体为融合试材,进行香蕉高效融合的电融合参数优化。研究表明,在交变电场(AC)200 V/cm、AC作用时间30 s、直流脉冲电压(DC)1500 V/cm、DC脉冲时间40μs、脉冲次数为2次时,融合效率最佳,融合率可达32.4%以上,原生质体活力达81.4%。 展开更多
关键词 香蕉 原生质 电融合
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野生茄子原生质体制备及电融合条件研究 被引量:6
11
作者 郭欢欢 陈钰辉 +3 位作者 杨锦坤 刘富中 张映 连勇 《中国蔬菜》 北大核心 2019年第7期51-55,共5页
以野生茄子蒜芥茄(Solanum sisymbriifolium)和水茄(S.torvum)叶片为原生质体融合材料,对原生质体制备中酶解液浓度、酶解时间和电融合参数进行研究。结果显示:在0.3%(m/V)纤维素酶+0.1%(m/V)离析酶浓度条件下镜检观测到的单细胞数量最... 以野生茄子蒜芥茄(Solanum sisymbriifolium)和水茄(S.torvum)叶片为原生质体融合材料,对原生质体制备中酶解液浓度、酶解时间和电融合参数进行研究。结果显示:在0.3%(m/V)纤维素酶+0.1%(m/V)离析酶浓度条件下镜检观测到的单细胞数量最多;蒜芥茄酶解最适时间为14h,原生质体产量达最大值15.06×10^6个·g^-1,水茄酶解最适时间为13h,原生质体产量达最大值15.92×10^6个·g^-1;最适电融合参数为交流电场强度80V·cm^-1,作用时间10s,直流脉冲强度1250V·cm^-1,作用时间45μs,次数1次时,显微镜观测到融合效果最佳。 展开更多
关键词 野生茄子 原生质 电融合
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米根霉原生质体电融合条件研究
12
作者 王凤美 罗水忠 +1 位作者 姜绍通 郑志 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第S1期47-51,共5页
以米根霉突变株mut-A、mut-B为亲本,采用双亲灭活标记筛选融合子,对亲本灭活条件、原生质体电融合条件进行了研究。实验结果表明,0.6mol/L山梨醇溶液为最适的渗透压缓冲液,mut-A、mut-B的灭活条件分别为50℃加热6min及紫外照射180s。原... 以米根霉突变株mut-A、mut-B为亲本,采用双亲灭活标记筛选融合子,对亲本灭活条件、原生质体电融合条件进行了研究。实验结果表明,0.6mol/L山梨醇溶液为最适的渗透压缓冲液,mut-A、mut-B的灭活条件分别为50℃加热6min及紫外照射180s。原生质体在电场中排队所需的细胞浓度为1×107/mL,交变电场电压为8V;最佳的电融合参数为直流脉冲电压260V,脉冲持续时间40μs,脉冲次数2次;最高融合率可达7.29±0.71%。 展开更多
关键词 米根霉 原生质 双亲灭活 电融合
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糙皮侧耳与酿酒酵母原生质体电融合条件的研究
13
作者 燕晓翠 刘西周 +4 位作者 涂苑楠 孟繁瑞 马蕊 郭成金 范寰 《中国饲料》 北大核心 2015年第14期17-21,共5页
为构建兼取木质素降解能力强和生长速度快的新型菌株,以糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体为亲本,采用双亲灭活标记方法,通过L16(45)正交试验研究交变电压、交变电场频率、脉冲场强、脉冲个数和脉冲间隔对两亲本电融合率的影响,利用拮抗试验... 为构建兼取木质素降解能力强和生长速度快的新型菌株,以糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体为亲本,采用双亲灭活标记方法,通过L16(45)正交试验研究交变电压、交变电场频率、脉冲场强、脉冲个数和脉冲间隔对两亲本电融合率的影响,利用拮抗试验和菌丝形态学比较方法对再生菌株进行筛选,RAPD分子标记方法对疑似融合株进行鉴定。结果表明:糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体的最佳融合条件为交变电压30 V,交变电场频率1100 k Hz,脉冲场强6 k V/cm,脉冲次数4个,脉冲间隔10μs,融合率达到4.396×10-5。筛选出的3株疑似融合株均为亲本原生质体融合产物。 展开更多
关键词 糙皮侧耳 酿酒酵母 原生质 电融合
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灵芝菌原生质体融合条件研究 被引量:11
14
作者 陈合 胡云红 +1 位作者 秦俊哲 谷珅睿 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期173-176,共4页
通过化学方法和电融合法对白芝(Ganoderma applanatum,GA)和赤芝(Ganoderma lucidum,GL)两种大型真菌原生质体融合条件进行了研究,实验得出:化学方法对灵芝菌原生质体融合的最佳条件:PEG浓度30%、CaCl20.02mol/L、融合时间30min、温度30... 通过化学方法和电融合法对白芝(Ganoderma applanatum,GA)和赤芝(Ganoderma lucidum,GL)两种大型真菌原生质体融合条件进行了研究,实验得出:化学方法对灵芝菌原生质体融合的最佳条件:PEG浓度30%、CaCl20.02mol/L、融合时间30min、温度30℃,融合率可达0.4%;电融合法对灵芝菌原生质体融合的最佳条件:交变电流频率2MHz、电压40V、直流脉冲脉幅10kV/cm、脉宽25μs、直流电压为500V,融合率可达40%。 展开更多
关键词 灵芝菌 原生质 电融合 化学融合 育种
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米曲霉和酱油曲霉种间原生质体的电融合
15
作者 江青彦 方自若 《中国调味品》 CAS 北大核心 1992年第11期27-28,30,共3页
近年原生质体融合已成为曲霉、青霉、毛霉等工业菌种改良的极有价值的技术方法。已有报告、通常采用的聚乙二醇(PEG)促融剂的融合方法与新开创的电融合方法相比,仍有某些缺点。特别指出的是当用PEG处理时,获得的种间融合率比种内融合率... 近年原生质体融合已成为曲霉、青霉、毛霉等工业菌种改良的极有价值的技术方法。已有报告、通常采用的聚乙二醇(PEG)促融剂的融合方法与新开创的电融合方法相比,仍有某些缺点。特别指出的是当用PEG处理时,获得的种间融合率比种内融合率更低。本文作者通过米曲霉与酱油曲霉种间电融合,不仅增加了融合株的生成率。 展开更多
关键词 米曲霉 酱油曲霉 原生质 电融合
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双亲灭活原生质体电诱导融合法选育高漆酶活性菌株 被引量:3
16
作者 任轩 贾乐 +1 位作者 宋振 邓鹏 《山东农业科学》 2008年第8期66-69,共4页
以杏鲍菇和平菇为亲本菌株,采用双亲灭活原生质体融合技术选育高漆酶活性且遗传稳定的融合菌株。结果表明:杏鲍菇原生质体采用紫外灭活,在30 W紫外灯、照射距离30 cm条件下处理20 min,灭活率达100%。平菇原生质体采用热灭活,65℃处理30 ... 以杏鲍菇和平菇为亲本菌株,采用双亲灭活原生质体融合技术选育高漆酶活性且遗传稳定的融合菌株。结果表明:杏鲍菇原生质体采用紫外灭活,在30 W紫外灯、照射距离30 cm条件下处理20 min,灭活率达100%。平菇原生质体采用热灭活,65℃处理30 min,灭活率达100%。两菌株按1∶1混合,施加1 MHz、250 V/cm的成串脉冲电压,5.5 kV/cm的融合脉冲电压的电场诱导下使其电融合,原生质体成对率达到70%,融合率为3.2×10-3。从147株融合菌株中筛选出1株高漆酶活性菌株F49,其漆酶和TTC-脱氢酶酶活比双亲分别提高20.6%和25.3%,遗传稳定性分别达到92.0%和92.7%以上。从菌落特征、菌丝形态、菌丝生长量、拮抗试验等方面对融合子进行鉴定,证实为具有双亲性状的融合株。 展开更多
关键词 杏鲍菇 平菇 双亲灭活 原生质 电融合
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应用电融合法诱导桑和楮原生质体的融合
17
作者 大西敏夫 田边宏至 谈建中 《国外农学(蚕业)》 1991年第2期61-62,共2页
在细胞融合方面聚乙二醇法一直被广泛采用,而电融合法具有融合率高、重复性好的特点,最近广为采用,对植物、动物的各种细胞进行了试验。作者也采用电融合法就桑与楮的原生质体融合作了尝试,探讨适宜的融合条件,其概要报告如下。一、材... 在细胞融合方面聚乙二醇法一直被广泛采用,而电融合法具有融合率高、重复性好的特点,最近广为采用,对植物、动物的各种细胞进行了试验。作者也采用电融合法就桑与楮的原生质体融合作了尝试,探讨适宜的融合条件,其概要报告如下。一、材料与方法供试的桑、楮原生质体均有两种,分别由叶肉细胞和来自幼茎的培养细胞分离获得,融合组合为叶肉细胞×叶肉细胞、培养细胞×培养细胞。桑和楮叶肉细胞、培养细胞的分离分别根据大西、木山的方法(1987)和Oka、Ohyama的方法(1985)进行。 展开更多
关键词 电融合 原生质 融后
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利用电场诱导原生质体融合技术选育高产耐高温酵母融合株 被引量:1
18
作者 王金 盛宫明 李春波 《中国调味品》 CAS 北大核心 1998年第9期11-13,共3页
本实验以酒精生产菌株sb724的呼吸缺陷突变株rho-和1300(His-)及耐高温菌株y-w(Aps-)(假丝酵母)为出发菌株,采用电场诱导原生质体融合技术,经发酵筛选获得了2株稳定的单核融合子F16和F19。同时... 本实验以酒精生产菌株sb724的呼吸缺陷突变株rho-和1300(His-)及耐高温菌株y-w(Aps-)(假丝酵母)为出发菌株,采用电场诱导原生质体融合技术,经发酵筛选获得了2株稳定的单核融合子F16和F19。同时对两株融合子的生物学特性、倍性遗传稳定性及耐高温和发酵性能的测试结果表明:F16为三倍体,不生假丝;F19为非整倍体,也不生假丝。它们在38℃下比生产菌株sb724的酒精生产率分别增加122%和467%。 展开更多
关键词 原生质 耐高温酵母 电融合 酒精生产 酵母
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双亚5号亚麻与罗布麻原生质体解离及体细胞杂交 被引量:1
19
作者 姜丽 苗书魁 +1 位作者 计巧灵 朱国丽 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1336-1342,F0002,共8页
【目的】探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础。【方法】以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养。【... 【目的】探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础。【方法】以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养。【结果】制备亚麻和罗布麻原生质体的最佳渗透剂分别是5.6%蔗糖和0.7mol/L甘露醇;游离亚麻和罗布麻原生质体的最适酶组合都是0.5%CellulaseOnozukaR-10+1.0%CellulaseOnozukaRS+0.2%PectolyaseY-23;最佳酶解时间分别是4和3h;亚麻细胞最佳继代时间是转瓶后的第3d,在此条件下原生质体存活率均为92.0%,产量分别达到1.24×106和22.4×106个/mL;2种原生质体电融合的最佳参数依次为:AC8v/cm,持续25s—DC1500v/cm,脉冲宽度为60μs,脉冲次数1次—交流电时间为9s,重复次数2次。在此条件下融合率达到20.5%。【结论】亚麻与罗布麻原生质体在一定的条件下可实现体细胞杂交。 展开更多
关键词 亚麻 罗布麻 胚性细胞系 原生质 电融合 再生愈伤组织
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青花菜非对称体细胞杂交研究 被引量:4
20
作者 戴永娟 和兆荣 +5 位作者 胡靖锋 汪骞 杨红丽 刁玉华 李春慧 和江明 《湖南农业科学》 2012年第3期9-12,16,共5页
以具有良好再生能力的"玉皇"青花菜下胚轴原生质体为供体、"优秀"下胚轴原生质体为受体,进行非对称体细胞杂交,获得再生植株。结果表明:供体原生质体UV射线的最大辐射剂量为0.10 J/cm;受体原生质体R-6G的最大处理... 以具有良好再生能力的"玉皇"青花菜下胚轴原生质体为供体、"优秀"下胚轴原生质体为受体,进行非对称体细胞杂交,获得再生植株。结果表明:供体原生质体UV射线的最大辐射剂量为0.10 J/cm;受体原生质体R-6G的最大处理剂量为40μg/mL;PEG-6000 250 g/L,CaCl2.2H2O 1.025 g/L,甘露醇45.5 g/L,山梨醇45.5 g/L,附加15%DMSO,可获得14%的融合率。综合改良的融合体培养基最适激素浓度为:6-BA 0.3 mg/L,NAA 0.2 mg/L,2,4-D 0.5 mg/L。 展开更多
关键词 青花菜 原生质 非对称细胞融合
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