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甘蓝型油菜异三聚体G蛋白原生质体瞬时表达体系的建立: 1; 作者陈云于一帆 +3 位作者潘淑芬周研葛会敏刘立军《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期21-25,共5页; 为建立甘蓝型油菜异三聚体G蛋白各组分原生质体瞬时表达体系,以油菜叶片为试材,从试材选取、平摇时间和聚乙二醇浓度方面优化了油菜原生质体制备条件和转化条件。结果表明,选取30 d苗龄叶片、平摇10 min时原生质体游离状态最佳,产量为10... 展开更多; 关键词油菜原生质体瞬时表达异三聚体G蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

拟南芥原生质体瞬时表达快速验证重组酶外源基因删除: 2; 作者池俊杰戴绍军 +1 位作者魏建华王宏芝《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期86-92,共7页; 通过在拟南芥原生质体中瞬时表达重组酶删除系统,以拟南芥热激蛋白Hsp18.2基因的启动子诱导加入马铃薯StLs1基因第2个内含子的重组酶表达,证明瞬时转化质粒DNA中位于识别位点之间的基因元件可以被有效删除。建立了一种快速验证重组酶外... 展开更多; 关键词位点特异性重组系统热激蛋白Hsp18 2启动子拟南芥原生质体瞬时表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

玉米转录因子ABP9瞬时表达体系的建立被引量：1: 3; 作者陈晓晶潘振赵军《安徽农业科学》 CAS 2014年第9期2554-2558,共5页; [目的]研究玉米抗逆相关转录因子ABP9在玉米抗逆应答中的功能及其表达调控机理。[方法]以2叶期玉米叶片为材料分离原生质体,通过PEG介导的转化方法,建立玉米叶肉原生质体瞬时表达ABP9的系统。利用该系统,通过反转录PCR和Western blot分... 展开更多; 关键词玉米(Zea mays L ) 转录因子 ABP9(ABRE BINDING PROTEIN 9) 原生质体瞬时表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

参与ABA诱导的水稻OsCaMs基因鉴定及其功能分析被引量：1: 4; 作者李闻博蔡翔蒋明义《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1474-1485,共12页; 以‘徐稻4号’为材料,构建OsCaMs的瞬时表达载体,利用生物信息学和RT-PCR方法设计OsCaMs定量引物5个,鉴定参与ABA诱导的OsCaMs基因并分析其生理功能,为进一步揭示ABA信号转导核心组分的研究奠定基础。结果显示:(1)水稻OsCaMs的5个家族... 展开更多; 关键词 OsCaM ABA 基因克隆抗氧化防护原生质体瞬时表达亚细胞定位; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蓝型油菜异三聚体G蛋白原生质体瞬时表达体系的建立: 1; 作者陈云于一帆潘淑芬周研葛会敏刘立军; 机构扬州大学江苏省作物遗传生理重点实验室; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期21-25,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31371562 30970249); 文摘为建立甘蓝型油菜异三聚体G蛋白各组分原生质体瞬时表达体系,以油菜叶片为试材,从试材选取、平摇时间和聚乙二醇浓度方面优化了油菜原生质体制备条件和转化条件。结果表明,选取30 d苗龄叶片、平摇10 min时原生质体游离状态最佳,产量为10.73×10~6/m L,活力可达96.4%。采用30%PEG转化原生质体时,目的蛋白表达量最高。Western Bolt的检测分析表明,异三聚体G蛋白各组分均参与了甘蓝型油菜对ABA的应答反应,当ABA浓度分别为100,150,100,50 mmol/L时,Bn GA1、Bn GB1、Bn GG2和BnRGS1蛋白的表达量最高。; 关键词油菜原生质体瞬时表达异三聚体G蛋白; Keywords Brassica napus Protoplast transient expression Heterotrimeric G protein; 分类号 S565.03 [农业科学—作物学] Q819 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名拟南芥原生质体瞬时表达快速验证重组酶外源基因删除: 2; 作者池俊杰戴绍军魏建华王宏芝; 机构东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心北京农业生物技术研究中心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期86-92,共7页; 基金国家高技术研究发展计划(2013AA102702); 文摘通过在拟南芥原生质体中瞬时表达重组酶删除系统,以拟南芥热激蛋白Hsp18.2基因的启动子诱导加入马铃薯StLs1基因第2个内含子的重组酶表达,证明瞬时转化质粒DNA中位于识别位点之间的基因元件可以被有效删除。建立了一种快速验证重组酶外源基因删除系统的方法。; 关键词位点特异性重组系统热激蛋白Hsp18 2启动子拟南芥原生质体瞬时表达; Keywords Site-specific recombination system Promoter for heat-shock proteins Hspl$.2 Transient gene expression system of Arabidopsis protoplast; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名玉米转录因子ABP9瞬时表达体系的建立被引量：1: 3; 作者陈晓晶潘振赵军; 机构西南科技大学生命科学与工程学院中国农业科学院生物技术研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程; 出处《安徽农业科学》 CAS 2014年第9期2554-2558,共5页; 基金国家转基因生物新品种培育重大专项(编号:2013ZX08003004); 文摘 [目的]研究玉米抗逆相关转录因子ABP9在玉米抗逆应答中的功能及其表达调控机理。[方法]以2叶期玉米叶片为材料分离原生质体,通过PEG介导的转化方法,建立玉米叶肉原生质体瞬时表达ABP9的系统。利用该系统,通过反转录PCR和Western blot分别检测ABP9genomic∷FLAG融合基因在原生质体中的转录和翻译;并通过转化ABP9∷GFP融合表达载体和GFP荧光检测,对ABP9进行亚细胞定位。[结果]玉米原生质体瞬时表达ABP9系统中,ABP9genomic∷FLAG融合基因能够正确转录出mRNA并翻译出蛋白质;利用该系统进行亚细胞定位结果显示ABP9定位于细胞核中。[结论]玉米原生质体瞬时表达ABP9体系的建立,为进一步探究玉米中ABP9的表达和调控提供了良好的实验系统。; 关键词玉米(Zea mays L ) 转录因子 ABP9(ABRE BINDING PROTEIN 9) 原生质体瞬时表达; Keywords Maize Transcription factor ABP9 Protoplast transient expression; 分类号 S513 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名参与ABA诱导的水稻OsCaMs基因鉴定及其功能分析被引量：1: 4; 作者李闻博蔡翔蒋明义; 机构南京农业大学生命科学学院; 出处《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1474-1485,共12页; 基金基金项目:中央高校基本业务费(KYZ201157); 文摘以‘徐稻4号’为材料,构建OsCaMs的瞬时表达载体,利用生物信息学和RT-PCR方法设计OsCaMs定量引物5个,鉴定参与ABA诱导的OsCaMs基因并分析其生理功能,为进一步揭示ABA信号转导核心组分的研究奠定基础。结果显示:(1)水稻OsCaMs的5个家族基因的CDS等长,均为450bp,ABA(100μmol·L^(-1))处理能够明显诱导OsCaM1-1和OsCaM1-2的表达。(2)利用瞬时表达载体将表达荧光蛋白的OsCaM1-1-YFP和OsCaM1-2-YFP通过PEG方法转化到原生质体中,激光共聚焦分析显示,这2个基因均定位于细胞核、细胞质和细胞膜中;并构建了OsCaM1-1和OsCaM1-2的干扰载体dsOsCaM1-1和dsOsCaM1-2。(3)经ABA诱导的水稻原生质体抗氧化保护酶APX和SOD活性分别显著提高35%和31%;原生质体瞬时表达和瞬时沉默体系分析表明,OsCaM1-1和OsCaM1-2均能够影响抗氧化保护酶APX和SOD的活性,其中原生质体中瞬时过表达这2个基因对APX和SOD活性上调达到1.15~1.45倍,瞬时干扰这2个基因对APX和SOD活性下调达到25%~30%。(4)外源H_2O_2(10mmol·L^(-1))预处理水稻幼苗可诱导OsCaM1-1和OsCaM1-2基因表达量上调,并且OsCaM1-2能够诱导水稻原生质体中H_2O_2的积累。(5)原生质体瞬时表达分析发现,在水稻原生质体中瞬时表达OsCaM1-1和OsCaM1-2可分别诱导OsrbohB和OsrbohE的表达;而且在水稻原生质体中瞬时表达OsrbohB和OsrbohE可分别诱导OsCaM1-1和OsCaM1-2的表达,表明OsCaMs与Osrbohs之间存在正反馈调节机制。研究表明,OsCaM1-1和OsCaM1-2为水稻参与ABA信号转导中具有调控抗氧化保护作用的同源基因;OsCaM1-1和OsCaM1-2不仅受ABA诱导,也受H_2O_2诱导,而且ABA是通过H_2O_2进行调控。; 关键词 OsCaM ABA 基因克隆抗氧化防护原生质体瞬时表达亚细胞定位; Keywords OsCaMs ABA gene cloning antioxidant protection plasma transient expression subcellular localization; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甘蓝型油菜异三聚体G蛋白原生质体瞬时表达体系的建立	陈云于一帆潘淑芬周研葛会敏刘立军	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	拟南芥原生质体瞬时表达快速验证重组酶外源基因删除	池俊杰戴绍军魏建华王宏芝	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	玉米转录因子ABP9瞬时表达体系的建立	陈晓晶潘振赵军	《安徽农业科学》 CAS	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	参与ABA诱导的水稻OsCaMs基因鉴定及其功能分析	李闻博蔡翔蒋明义	《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料