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K氏酵母与糖化酵母原生质体的形成与再生条件 被引量：3
1
作者 张华山 余响华 李亚芳 《酿酒科技》 北大核心 2005年第12期29-31,共3页
对影响K氏酵母及糖化酵母形成与再生的因素菌龄、酶浓度、温度、酶解时间、预处理剂的浓度和作用时间及渗透压稳定剂的选择进行了研究,确定了原生质体形成与再生的最佳条件:菌龄为14～16h,0.1%β-巯基乙醇作用10min;在30℃下,2.0%的蜗... 对影响K氏酵母及糖化酵母形成与再生的因素菌龄、酶浓度、温度、酶解时间、预处理剂的浓度和作用时间及渗透压稳定剂的选择进行了研究,确定了原生质体形成与再生的最佳条件:菌龄为14～16h,0.1%β-巯基乙醇作用10min;在30℃下,2.0%的蜗牛酶对K氏酵母酶解1.5h,对糖化酵母酶解1.0h;配制酶解液时渗透压稳定剂采用0.8MKCl,在稀释及配制再生培养基时则采用0.53M蔗糖。 展开更多
关键词 K氏酵母 糖化酵母 原生质体的形成与再生
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一株小菇属天麻萌发菌原生质体的制备、再生和应用
2
作者 李宏敬 李锡琴 +2 位作者 粟忠祥 仇全雷 雷云霆 《陕西科技大学学报》 北大核心 2025年第1期58-66,共9页
小菇属真菌(Mycena spp.)遗传转化体系是研究其促进天麻种子萌发机制的重要基础,而其原生质体的制备和再生是该体系构建的必要条件.以小菇菌株MY004为实验材料,通过单因素分析和正交试验策略,探究其原生质体制备和再生的影响因素,构建... 小菇属真菌(Mycena spp.)遗传转化体系是研究其促进天麻种子萌发机制的重要基础,而其原生质体的制备和再生是该体系构建的必要条件.以小菇菌株MY004为实验材料,通过单因素分析和正交试验策略,探究其原生质体制备和再生的影响因素,构建小菇原生质体制备和再生体系.结果表明,在含10 mM MES和0.7 M甘露醇的酶解缓冲液(pH=6)中,小菇MY004菌丝被10 mg/mL真菌溶壁酶在24℃条件下酶解3 h,其原生质体的释放率较高;经液体再生培养基(pH=5)培养3天,其原生质体再生效率可达2%.利用该体系,高效地完成了含报告基因eGFP转基因小菇的菌株纯化.小菇原生质体制备和再生体系可用于小菇遗传转化体系的快速构建,也将为小菇与天麻互作分子机制的研究提供基础平台. 展开更多
关键词 小菇 原生质体制备 原生质体再生 转基因菌株纯化
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果胶酶产生菌ZH-g的原生质体形成与再生研究 被引量：9
3
作者 朱宏莉 宋纪蓉 +4 位作者 张嘉 杨彬彬 徐抗震 黄洁 杨明琰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期68-71,共4页
本文通过研究酶浓度、酶的作用时间、菌龄、菌体预处理等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了果胶酶产生菌ZH-g原生质体制备和再生的最佳条件:加入0.6μg/ml的氨苄青霉素进行菌体预处理,选用对数生长期的菌株,以1.2mg/ml溶菌酶3... 本文通过研究酶浓度、酶的作用时间、菌龄、菌体预处理等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了果胶酶产生菌ZH-g原生质体制备和再生的最佳条件:加入0.6μg/ml的氨苄青霉素进行菌体预处理,选用对数生长期的菌株,以1.2mg/ml溶菌酶37℃保温处理2h,原生质体形成率为92%,再生率达50.7%。 展开更多
关键词 果胶酶 细菌 原生质体制备 原生质体再生
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2株酵母菌单倍体原生质体形成与再生条件的研究 被引量：6
4
作者 易弋 赵东玲 +3 位作者 黎娅 龚熠 黄翠姬 伍时华 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第11期42-46,共5页
对酒精高产酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体原生质体的形成与再生条件进行了研究。结果表明,在菌龄8h、0.2%β-巯基乙醇和0.1%EDTA-Na2预处理20min、1.5%的蜗牛酶37℃处理30min以及使用浓度170g/L的蔗糖作为渗透压稳定剂的条件下,GGFS16和... 对酒精高产酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体原生质体的形成与再生条件进行了研究。结果表明,在菌龄8h、0.2%β-巯基乙醇和0.1%EDTA-Na2预处理20min、1.5%的蜗牛酶37℃处理30min以及使用浓度170g/L的蔗糖作为渗透压稳定剂的条件下,GGFS16和GJ2008单倍体原生质体的形成率和再生率均达到最大。形成率分别是98.14%和97.19%,再生率分别是17.29%和15.78%。 展开更多
关键词 酿酒酵母 酒精高产 原生质体 形成率:再生率
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枯草芽孢杆菌Bx-4原生质体形成与再生条件优化 被引量：4
5
作者 肖怀秋 李玉珍 +1 位作者 兰立新 林亲录 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第9期30-32,共3页
为优化枯草芽孢杆菌Bx-4原生质体形成与再生条件,研究了甘氨酸、青霉素、溶菌酶等因素对原生质体形成与再生的影响。结果表明,在最佳形成与再生条件下,原生质体形成率与再生率分别达到77.44%和88.03%。
关键词 原生质体 形成 再生 枯草芽孢杆菌
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红曲霉M_(9x)的原生质体形成与再生条件的研究 被引量：5
6
作者 戴德慧 蒋家新 黄光荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期97-100,共4页
对红曲霉M9x用混合酶制取原生质体及原生质体再生条件进行了探索。其原生质形成和再生最佳条件为:以豆芽汁培养液为菌丝培养基,采用60h菌龄的菌丝体,以0.6mol/LMgSO4作为渗稳剂,用1.5%混合酶(蜗牛酶:纤维素酶=7:3)在30℃处理2h,原生质... 对红曲霉M9x用混合酶制取原生质体及原生质体再生条件进行了探索。其原生质形成和再生最佳条件为:以豆芽汁培养液为菌丝培养基,采用60h菌龄的菌丝体,以0.6mol/LMgSO4作为渗稳剂,用1.5%混合酶(蜗牛酶:纤维素酶=7:3)在30℃处理2h,原生质体形成数可以达到1.61×107个/ml,再生率为8.49%。 展开更多
关键词 红曲霉 原生质体 形成 再生
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青稞酒曲中酿酒酵母与假丝酵母原生质体形成与再生条件的研究 被引量：6
7
作者 杜木英 陈娟 +3 位作者 阚建全 BATA-VIDACS Ildiko BECZNER Judit 陈宗道 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第9期378-383,共6页
本实验通过研究酶种类、菌龄、酶浓度及酶的作用时间、菌体预处理及渗透压稳定剂等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了青稞酒曲酵母ZY2,ZY8原生质体制备和再生的最佳条件:酵母ZY2在菌龄为10h,0.1mol/LEDTA+0.1%β-巯基乙醇为预... 本实验通过研究酶种类、菌龄、酶浓度及酶的作用时间、菌体预处理及渗透压稳定剂等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了青稞酒曲酵母ZY2,ZY8原生质体制备和再生的最佳条件:酵母ZY2在菌龄为10h,0.1mol/LEDTA+0.1%β-巯基乙醇为预处理剂作用10min;30℃下用1.5%的蜗牛酶酶解1h;酵母ZY8在菌龄为10h,0.1mol/LEDTA+20mmol/L2-硫苏糖醇混合于蜗牛酶1.5%+溶壁酶1%的酶解体系中,30℃下酶解1h;配制酶解液时渗透压稳定剂采用0.7mol/LKC1,在稀释及配制再生培养基时采用17%蔗糖的条件下,酵母ZY2形成率达94.15%,再生率达13.85%;酵母ZY8形成率达88.78%,再生率达23.02%。 展开更多
关键词 青稞酒曲 酿酒酵母 假丝酵母 原生质体制备 原生质体再生
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球毛壳菌原生质体形成与再生研究 被引量：3
8
作者 李梅 辛平 杨谦 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期595-598,共4页
采用酶解法制备球毛壳原生质体 .确定酶解条件为 :菌龄 2 .5d ,渗稳剂为S/C .采用 5、15、15mg/mL的Novozym 2 34、蜗牛酶 ,溶壁酶混合酶液 ,30℃下酶解 1.5h .再生率可达 2 9.11% .研究了渗稳剂对原生质体制备与再生的影响 ,并对球毛... 采用酶解法制备球毛壳原生质体 .确定酶解条件为 :菌龄 2 .5d ,渗稳剂为S/C .采用 5、15、15mg/mL的Novozym 2 34、蜗牛酶 ,溶壁酶混合酶液 ,30℃下酶解 1.5h .再生率可达 2 9.11% .研究了渗稳剂对原生质体制备与再生的影响 ,并对球毛壳原生质体的释放和再生过程进行了观察 .结果表明 :山梨醇可促进原生质体的释放和再生 ;Ca2 + 对原生质体的再生有促进作用 ;葡萄糖对再生菌株生长的促进作用优于山梨醇 . 展开更多
关键词 球毛壳菌 原生质体 再生 渗透压稳定剂 形成机理 植物病原菌 综合防治
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红发夫酵母原生质体的形成和再生 被引量：2
9
作者 王殿夫 麻丽丹 +1 位作者 孟宪军 王东明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第12期52-55,共4页
研究了用NOVOZYME234酶,制备红发夫酵母的原生质体和再生的条件。
关键词 形成 再生 红发夫酵母 原生质体 NOVOZYME234酶 育种
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钝齿棒杆菌AS1.998原生质体形成与再生条件的研究 被引量：1
10
作者 刘晓波 李宗伟 +2 位作者 丁晓兵 闫世梁 秦广雍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期55-58,共4页
研究了影响L-异亮氨酸(L-Isoleucine)产生菌钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)AS1.998原生质体形成和再生的各个因素。结果表明:菌体培养至对数生长期,0.8 U/mL青霉素G处理3 h后,1.0mg/mL的蛋清溶菌酶37℃,150 r/min酶解15 h,原生... 研究了影响L-异亮氨酸(L-Isoleucine)产生菌钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)AS1.998原生质体形成和再生的各个因素。结果表明:菌体培养至对数生长期,0.8 U/mL青霉素G处理3 h后,1.0mg/mL的蛋清溶菌酶37℃,150 r/min酶解15 h,原生质体形成率可达98.0%以上,在含8.5%蔗糖的再生完全培养基上,再生率可达20.0%～30.0%。 展开更多
关键词 钝齿棒杆菌AS1.998 原生质体 形成率与再生率 L-异亮氨酸
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出芽短梗霉原生质体形成和再生研究 被引量：2
11
作者 靳挺 武玉学 王建平 《食品与发酵科技》 CAS 2012年第2期32-35,共4页
本文旨在研究出芽短梗霉原生质体形成和再生的条件。考察了渗透压稳定剂、菌龄、酶解时间、再生培养基等因素对原生质体形成和再生的影响,得到了出芽短梗霉原生质体形成及再生优化工艺条件:渗透压稳定剂为柠檬酸-磷酸缓冲液含0.6mol/L K... 本文旨在研究出芽短梗霉原生质体形成和再生的条件。考察了渗透压稳定剂、菌龄、酶解时间、再生培养基等因素对原生质体形成和再生的影响,得到了出芽短梗霉原生质体形成及再生优化工艺条件:渗透压稳定剂为柠檬酸-磷酸缓冲液含0.6mol/L KCl,菌龄43.5h,酶解时间60min,再生培养基为完全培养基含0.5mol/L甘露醇。在此工艺条件下,出芽短梗霉原生质体形成率达99.8%,再生率为20.3%。 展开更多
关键词 出芽短梗霉 原生质体 形成 再生
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扣囊拟内孢霉原生质体形成与再生条件的研究 被引量：1
12
作者 张伟 袁耀武 +2 位作者 李英军 檀建新 石敬伟 《酿酒》 CAS 北大核心 2003年第3期22-24,共3页
研究了一株产淀粉酶酵母-扣囊拟内孢霉的原生质体形式与再生条件,通过正交实验研究了菌龄、酶浓度、酶解时间、酶解温度、稳渗剂种类等对原生质体形成与再生的影响。结果表明,对数生长期早期的细胞(18～24h),用1.5％的蜗牛酶液,0.7mol/L... 研究了一株产淀粉酶酵母-扣囊拟内孢霉的原生质体形式与再生条件,通过正交实验研究了菌龄、酶浓度、酶解时间、酶解温度、稳渗剂种类等对原生质体形成与再生的影响。结果表明,对数生长期早期的细胞(18～24h),用1.5％的蜗牛酶液,0.7mol/L的KCl做渗透压稳定剂,30℃水浴酶解60min,可获得最佳的形成率与再生率。 展开更多
关键词 扣囊拟内孢霉 原生质体形成 再生条件 产淀粉酶酵母 酒精 原生质体融合 育种
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产酯酵母和耐高温酵母原生质体形成与再生条件研究 被引量：2
13
作者 方尚玲 刘源才 +2 位作者 郭圣祥 李锐利 陈茂彬 《酿酒》 CAS 2011年第2期44-46,共3页
选取脱壁预处理时间、蜗牛酶浓度、酶解时间三因素设计三因素三水平正交试验来研究产酯酵母和耐高温酵母原生质体形成与再生条件。结果表明,产酯酵母原生质体形成与再生最佳条件为:预处理20min、1%蜗牛酶酶解30min;耐高温酵母为:预处理1... 选取脱壁预处理时间、蜗牛酶浓度、酶解时间三因素设计三因素三水平正交试验来研究产酯酵母和耐高温酵母原生质体形成与再生条件。结果表明,产酯酵母原生质体形成与再生最佳条件为:预处理20min、1%蜗牛酶酶解30min;耐高温酵母为:预处理10min,1.5%蜗牛酶酶解60min。 展开更多
关键词 产酯酵母 耐高温酵母 原生质体形成与再生 正交试验
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原生质体融合技术选育赖氨酸高产菌株的研究 Ⅰ.原生质体形成与再生条件的研究 被引量：1
14
作者 周婉冰 周惠 云逢霖 《发酵科技通讯》 CAS 1990年第4期1-6,共6页
原生质体融合作为一种新的基因重组手段正日益广泛为国内外微生物育种工作者所采用。原生质体融合包括原生质体制备与再生,以及实现融合这两个关键环节,要获得理想的融合效果首先必须有较高的原生质体形成率和再生率,不同的细菌其细胞... 原生质体融合作为一种新的基因重组手段正日益广泛为国内外微生物育种工作者所采用。原生质体融合包括原生质体制备与再生,以及实现融合这两个关键环节,要获得理想的融合效果首先必须有较高的原生质体形成率和再生率,不同的细菌其细胞壁对溶菌酶的敏感性不同。本试验以北京棒杆菌和乳糖发酵短杆菌为材料,详细地探索了原生质体形成和再生的条件。 展开更多
关键词 原生质体融合 再生条件 微生物育种 原生质体制备 乳糖发酵短杆菌 再生培养基 形成率 原生质体再生 对数生长期 琼脂粉
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几种捕食线虫真菌原生质体的形成和再生 被引量：3
15
作者 龚跃武 张克勤 周薇 《贵州农学院学报》 1993年第1期24-31,共8页
采用1.5％粗纤维素酶加1.5％纤维素酶的混合酶,自Arthrobotrys guizhouense36-15,A. oligospora GA001, A.sp. Z307, A.dactyloides Z279,Monacrosporium eudermata Z326等5种捕食线虫真菌中获得了大量原生质体。比较了不同酶系统、渗... 采用1.5％粗纤维素酶加1.5％纤维素酶的混合酶,自Arthrobotrys guizhouense36-15,A. oligospora GA001, A.sp. Z307, A.dactyloides Z279,Monacrosporium eudermata Z326等5种捕食线虫真菌中获得了大量原生质体。比较了不同酶系统、渗透稳定液、菌丝生长培养基、菌龄、酶解温度等因素对Arthrobotrys guizhouense 36-15原生质体形成的影响。有机物渗透稳定液较无机渗透稳定液适合于从A.guizhouense 36-15菌株释放原生质体。0.6M葡萄糖稳定液配制的察氏培养基上,A.guizhouense 36-15菌株原生质体再生率可达48.9％。对原生质体释放和再生进行了详细的形态发生学观察和描述。 展开更多
关键词 线虫 真菌 原生质体 再生
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酿酒酵母和马克斯克鲁维酵母原生质体制备与再生研究 被引量：4
16
作者 包伟霞 王静洁 +2 位作者 王晓斐 陈由强 许旭萍 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第9期42-44,共3页
研究了菌龄、酶浓度、渗透压稳定剂及酶解时间等因素对酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)和马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)原生质体形成与再生的影响。实验结果表明,原生质体形成与再生的最佳条件为酿酒酵母菌龄9h,采... 研究了菌龄、酶浓度、渗透压稳定剂及酶解时间等因素对酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)和马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)原生质体形成与再生的影响。实验结果表明,原生质体形成与再生的最佳条件为酿酒酵母菌龄9h,采用1.5%蜗牛酶+0.5%纤维素酶,30℃酶解70min;马克斯克鲁维酵母菌龄8h,采用1.0%蜗牛酶+0.5%纤维素酶,30℃酶解时间50min;配制酶液时渗透压稳定剂采用4%氯化钠高渗缓冲液,在稀释和配制再生培养基时则采用15%的蔗糖高渗缓冲液。 展开更多
关键词 酿酒酵母 马克斯克鲁维酵母 原生质体的形成与再生
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一株木霉菌SWFC1511原生质体形成及再生条件的研究
17
作者 程立君 陈玉惠 +2 位作者 彭述敏 李永艳 胡志芳 《现代农业科技》 2010年第22期35-37,共3页
研究了一株木霉菌SWFC1511菌株原生质体的制备及再生条件,并观察其原生质体释放过程。结果表明:木霉菌SWFC1511原生质体制备的最佳条件为:菌丝培养20 h后,用比例为1∶3的2%溶菌酶与2%蜗牛酶为酶解液,在35℃下酶解3 h后,原生质体的产量... 研究了一株木霉菌SWFC1511菌株原生质体的制备及再生条件,并观察其原生质体释放过程。结果表明:木霉菌SWFC1511原生质体制备的最佳条件为:菌丝培养20 h后,用比例为1∶3的2%溶菌酶与2%蜗牛酶为酶解液,在35℃下酶解3 h后,原生质体的产量较高。所形成的原生质体在再生培养基1上的再生率较高。 展开更多
关键词 木霉菌 原生质体 形成 再生
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提高红曲菌9903A原生质体形成数量和再生率的研究 被引量：5
18
作者 张垸帼 段开红 +1 位作者 牛丹丹 许赣荣 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2006年第8期54-58,共5页
采用酶解法制备红曲菌9903A原生质体。研究红曲菌菌丝体的菌龄、酶种类、酶解温度、酶解时间、稳渗剂和几种再生培养基对原生质体形成和再生的影响。确定酶解最佳条件为:菌龄50h～60h,组合酶(蜗牛酶(0.6%)+溶菌酶(0.4%)+纤维素酶(0.8%))... 采用酶解法制备红曲菌9903A原生质体。研究红曲菌菌丝体的菌龄、酶种类、酶解温度、酶解时间、稳渗剂和几种再生培养基对原生质体形成和再生的影响。确定酶解最佳条件为:菌龄50h～60h,组合酶(蜗牛酶(0.6%)+溶菌酶(0.4%)+纤维素酶(0.8%)),酶解温度31℃,酶解时间1.5h。研究了稳渗剂对原生质体制备与再生的影响,并对红曲菌9903A原生质体的释放和再生过程进行了观察。结果表明:山梨醇可促进原生质体的释放;蔗糖对原生质体的再生有促进作用。在此条件下原生质体的形成为4.24×108/mL,再生率为52%。 展开更多
关键词 红曲霉 原生质体 形成 再生
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淡紫拟青霉菌IPC菌株原生质体形成和再生条件 被引量：2
19
作者 张延新 刘开启 +1 位作者 夏振远 李天飞 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期42-45,共4页
研究了菌龄、渗透压稳定剂、酶的种类及浓度、酶解时间和再生培养基等因素对淡紫拟青霉菌IPC菌株原生质体形成和再生的影响,结果表明,IPC菌株原生质体形成的最适宜条件为:菌龄20h,用5 mg/mL蜗牛酶,0.8 mol/L NaCl的渗透压稳定剂,酶解2～... 研究了菌龄、渗透压稳定剂、酶的种类及浓度、酶解时间和再生培养基等因素对淡紫拟青霉菌IPC菌株原生质体形成和再生的影响,结果表明,IPC菌株原生质体形成的最适宜条件为:菌龄20h,用5 mg/mL蜗牛酶,0.8 mol/L NaCl的渗透压稳定剂,酶解2～3 h;原生质体涂布于含0.6 mol/L NaCl、0.5%琼脂的再生培养基上,再生率最高. 展开更多
关键词 生物工程 淡紫拟青霉菌 原生质体再生
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茶树菇与鸡腿菇原生质体融合及再生 被引量：9
20
作者 江力 黄健威 +1 位作者 慈凌坤 卢云峰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期141-144,共4页
研究茶树菇与鸡腿菇原生质体制备、融合及再生。以菌龄4d的菌丝体为原料,采用1%果胶酶和1%蜗牛酶混合酶液(体积比1:1),酶解4h,酶解温度为30℃,pH6.0的0.6mol/L甘露醇溶液为渗透压稳定剂,制备得到茶树菇与鸡腿菇原生质体。两种原生质体... 研究茶树菇与鸡腿菇原生质体制备、融合及再生。以菌龄4d的菌丝体为原料,采用1%果胶酶和1%蜗牛酶混合酶液(体积比1:1),酶解4h,酶解温度为30℃,pH6.0的0.6mol/L甘露醇溶液为渗透压稳定剂,制备得到茶树菇与鸡腿菇原生质体。两种原生质体融合的最佳条件为:使用35%聚乙二醇(PEG4000)和0.2mol/L CaCl2溶液(pH10)为助融剂,30℃融合30min。利用灭活原生质体作为标记筛选出融合子,融合的细胞在培养基中实现再生,通过菌落表型的比较和拮抗实验验证再生出的为融合子。 展开更多
关键词 茶树菇 鸡腿菇 原生质体 融合 再生
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