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猪轮状病毒JL94株vp4全基因克隆及原核表达载体构建: 1; 作者于晓龙宋岩 +1 位作者李宝贤李一经《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期54-57,共4页; 根据GenBank已发表的猪轮状病毒vp4基因保守序列,设计一对引物扩增猪轮状病毒地方株JL94株vp4全基因;将扩增产物与载体pMD-18T连接进行序列测定并将测序结果同国外分离株进行序列比较。用限制性内切酶BamHI和SalI将vp4基因从pMD-18T-vp... 展开更多; 关键词猪轮状病毒 VP4基因克隆原核表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

肠道病毒71 VP1基因的克隆与原核表达载体构建: 2; 作者王欢薛健《农业与技术》 2017年第1期27-28,共2页; 手足口病是由人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病,主要由肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型引起。近年来,尤其是肠道病毒71引发的手足口病在亚太地区呈上升趋势。本研究采用RT-PCR技术,设计特异性引物扩增EV71 VP1基因序列,克隆至原核... 展开更多; 关键词手足口病 EV71 原核表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

中华大蟾蜍galectin-3 cDNA的克隆、序列分析及原核表达载体的构建被引量：9: 3; 作者徐跃宋敏国 +1 位作者杨仙玉袁进强《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期46-52,共7页; 通过PCR扩增出中华大蟾蜍Bufo gargarizans半乳糖凝聚素3(gal-3)cDNA全长开放读码框(ORF)并克隆至pGM-T载体,经DNA测序确定获得全长ORF序列(GenBank登录号为JN993733).序列分析表明中华大蟾蜍gal-3的ORF是由789个碱基组成,编码262个氨... 展开更多; 关键词中华大蟾蜍半乳糖凝聚素3 基因克隆原核表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断及ORF5基因原核表达载体的构建: 4; 作者袁东波汤德元 +2 位作者黄涛徐健王彬《猪业科学》 2009年第5期98-100,共3页; 参照GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒核苷酸序列,利用生物软件,设计1对ORF5基因的特异性引物,用Trizol法提取病料的总RNA,进行RT-PCR扩增后获得目的基因,将其连接到PMD18-T载体后转入大肠杆菌Top10细胞中,抽提质粒并双酶切,回收... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因克隆原核表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

北沙参补骨脂素合成酶基因 GlPS1 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达被引量：2: 5; 作者张馨方宋洁洁 +3 位作者徐瑶田雪梅谭玲玲高婷《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2023年第2期118-123,共6页; 北沙参(Glehniae Radix)为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis)的干燥根,具有良好的药用价值和较高的经济价值。补骨脂素(psoralen)是北沙参香豆素类化合物主要的活性成分之一,对白血病细胞有较强的杀伤作用,对支气管平滑肌有舒张作... 展开更多; 关键词北沙参 GlPS1基因原核表达载体构建蛋白诱导表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪轮状病毒JL94株vp4全基因克隆及原核表达载体构建: 1; 作者于晓龙宋岩李宝贤李一经; 机构东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期54-57,共4页; 基金黑龙江省"十五"攻关项目(GC01B510); 文摘根据GenBank已发表的猪轮状病毒vp4基因保守序列,设计一对引物扩增猪轮状病毒地方株JL94株vp4全基因;将扩增产物与载体pMD-18T连接进行序列测定并将测序结果同国外分离株进行序列比较。用限制性内切酶BamHI和SalI将vp4基因从pMD-18T-vp4切下;同样用BamHI和SalI双酶切表达载体pGEX-6P-1;将这2个双酶切产物连接并转化,通过酶切鉴定和PCR鉴定证明完成了vp4原核表达载体的构建。测序结果表明:vp4全基因长2362bp,JL94株同国外分离株BEN307株、Gottfried株vp4全基因片段核苷酸同源性分别为93.44%和69.43%;氨基酸同源性分别为96.06%和71.88%。说明JL94株同BEN-307株属同一VP4血清型,而同Gottfried株属于不同血清型。重组原核表达载体pGEX-6P1-vp4的构建为表达VP4蛋白,研制诊断性抗原和病毒重组活载体疫苗奠定了基础。; 关键词猪轮状病毒 VP4基因克隆原核表达载体构建; Keywords porcine rotavirus (PRV) clone vector construction for prokaryotic expression; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肠道病毒71 VP1基因的克隆与原核表达载体构建: 2; 作者王欢薛健; 机构吉林农业科技学院生物工程学院; 出处《农业与技术》 2017年第1期27-28,共2页; 基金吉林省教育厅"十二五"科学技术研究项目(项目编号:吉教科合字[2015]第381号)资助吉林农业科技学院科研项目(项目编号:吉农院合字[2012第306号]); 文摘手足口病是由人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病,主要由肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型引起。近年来,尤其是肠道病毒71引发的手足口病在亚太地区呈上升趋势。本研究采用RT-PCR技术,设计特异性引物扩增EV71 VP1基因序列,克隆至原核表达载体p ET32a(+)中,以期为今后肠道病毒EV71新型疫苗的开发提供技术基础。; 关键词手足口病 EV71 原核表达载体构建; 分类号 R725.1 [医药卫生—儿科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中华大蟾蜍galectin-3 cDNA的克隆、序列分析及原核表达载体的构建被引量：9: 3; 作者徐跃宋敏国杨仙玉袁进强; 机构浙江农林大学林业与生物技术学院; 出处《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期46-52,共7页; 基金 2006年浙江省留学人员科技活动择优基金资助项目 2011年度浙江省科技创新活动计划(新苗人才计划)基金资助项目(2011R412042) 2010年度浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)基金资助项目(2010R412003); 文摘通过PCR扩增出中华大蟾蜍Bufo gargarizans半乳糖凝聚素3(gal-3)cDNA全长开放读码框(ORF)并克隆至pGM-T载体,经DNA测序确定获得全长ORF序列(GenBank登录号为JN993733).序列分析表明中华大蟾蜍gal-3的ORF是由789个碱基组成,编码262个氨基酸残基组成的蛋白质.推导氨基酸序列同源性比较发现,中华大蟾蜍与非洲爪蟾Xenopus lavis同源性最高,为51%,与其他10种动物的同源性在41%～50%之间.SMART分析显示gal-3蛋白在136-259位氨基酸存在保守的半乳糖结合域.Net Phos预测gal-3在Ser-6和Ser-186有潜在的丝氨酸磷酸化位点.gal-3氨基酸序列构建的进化树符合传统动物分类学特点.经菌落PCR、双酶切和DNA测序确认gal-3的ORF正确插入原核表达载体pET-28b,表明原核表达用重组质粒构建成功,为研究其蛋白功能和生物学功能奠定了基础.; 关键词中华大蟾蜍半乳糖凝聚素3 基因克隆原核表达载体构建; Keywords Bufo gargarizans galectin-3 gene cloning construction of the prokaryotic expression vector; 分类号 Q959.53 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断及ORF5基因原核表达载体的构建: 4; 作者袁东波汤德元黄涛徐健王彬; 机构贵州大学动物科学学院; 出处《猪业科学》 2009年第5期98-100,共3页; 文摘参照GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒核苷酸序列,利用生物软件,设计1对ORF5基因的特异性引物,用Trizol法提取病料的总RNA,进行RT-PCR扩增后获得目的基因,将其连接到PMD18-T载体后转入大肠杆菌Top10细胞中,抽提质粒并双酶切,回收目的基因,然后克隆于原核表达载体PET-32a(+)中,通过抗性筛选、酶切鉴定和序列测定,证实得到含有目的基因的阳性克隆,本实验成功构建了猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达载体PET-ORF5,为进一步研究ORF5基因的原核表达及猪繁殖与呼吸综合征的基因工程疫苗的研究奠定了基础。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因克隆原核表达载体构建; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名北沙参补骨脂素合成酶基因 GlPS1 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达被引量：2: 5; 作者张馨方宋洁洁徐瑶田雪梅谭玲玲高婷; 机构青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室山东省鄄城县第二中学; 出处《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2023年第2期118-123,共6页; 基金国家自然科学基金(81903748)。; 文摘北沙参(Glehniae Radix)为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis)的干燥根,具有良好的药用价值和较高的经济价值。补骨脂素(psoralen)是北沙参香豆素类化合物主要的活性成分之一,对白血病细胞有较强的杀伤作用,对支气管平滑肌有舒张作用。补骨脂素合成酶(GlPS)是北沙参补骨脂素生物合成途径的最后一步关键酶。本试验通过PCR扩增获得对北沙参补骨脂素合成酶基因GlPS1,通过酶切、连接、转化、平板培养和提取质粒构建原核表达载体;将构建好的表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3)中,实现GlPS1基因的IPTG诱导原核表达。该研究表明被诱导表达的GlPS1蛋白存在于菌体沉淀中,不溶于上清液。研究结果为验证GlPS1基因的功能及使用基因工程方法调控GlPS1蛋白表达奠了基础。; 关键词北沙参 GlPS1基因原核表达载体构建蛋白诱导表达; Keywords Glehniae Radix GlPS1 gene construction of prokaryotic expression vector protein induced expression; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪轮状病毒JL94株vp4全基因克隆及原核表达载体构建	于晓龙宋岩李宝贤李一经	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	肠道病毒71 VP1基因的克隆与原核表达载体构建	王欢薛健	《农业与技术》	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	中华大蟾蜍galectin-3 cDNA的克隆、序列分析及原核表达载体的构建	徐跃宋敏国杨仙玉袁进强	《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	9	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断及ORF5基因原核表达载体的构建	袁东波汤德元黄涛徐健王彬	《猪业科学》	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	北沙参补骨脂素合成酶基因 GlPS1 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达	张馨方宋洁洁徐瑶田雪梅谭玲玲高婷	《青岛农业大学学报（自然科学版）》	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料