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犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化
被引量：
1
1
作者
简子健
马素贞
+2 位作者
申卫红
翟少华
赵森
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期336-340,共5页
【目的】提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量。【方法】研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST-CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件...
【目的】提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量。【方法】研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST-CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定。【结果】大肠杆菌BL21(DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600=1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8 h,GST-CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL。【结论】确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础。
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关键词
犬瘟热病毒
N蛋白基因
融合蛋白
原核表达条件的优化
纯化
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职称材料
题名
犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化
被引量：
1
1
作者
简子健
马素贞
申卫红
翟少华
赵森
机构
新疆农业大学动物医学学院
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期336-340,共5页
基金
新疆维吾尔自治区高技术项目(200611107)
文摘
【目的】提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量。【方法】研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST-CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定。【结果】大肠杆菌BL21(DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600=1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8 h,GST-CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL。【结论】确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础。
关键词
犬瘟热病毒
N蛋白基因
融合蛋白
原核表达条件的优化
纯化
Keywords
canine distemper virus
N protein gene
fusion protein
optimization of prokaryotic expression condition
purification
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化
简子健
马素贞
申卫红
翟少华
赵森
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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