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家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2的诱导表达条件优化及原核重组蛋白纯化: 1; 作者王玮王丽 +3 位作者国果修江帆尚小丽张昌容《贵州农业科学》 2025年第4期66-72,共7页; 【目的】通过诱导表达获取大量纯化的家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白,为后续深入分析模式昆虫家蝇的Serpin体内外免疫调节功能奠定基础。【方法】使用pET-28a(+)作为表达载体构建家蝇Serpin2的原核表达系统并导入到大肠杆菌(BL... 展开更多; 关键词家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂2 原核表达优化蛋白纯化重组质粒重组蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化被引量：1: 2; 作者简子健马素贞 +2 位作者申卫红翟少华赵森《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期336-340,共5页; 【目的】提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量。【方法】研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST-CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件... 展开更多; 关键词犬瘟热病毒 N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

革胡子鲶GH成熟肽在大肠杆菌中表达条件的优化被引量：1: 3; 作者杨学明何荆洲 +3 位作者张立黄雄军郭亚芬蒋和生《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期182-184,共3页; 将携带革胡子鲶(Clarias lazera)生长激素(GH)成熟肽cDNA序列的重组表达载体pRSET-mGH转化入大肠杆菌Escherichia.coliBL21(DE3)pLysS中进行融合蛋白的表达。表达条件优化试验表明,表达菌株接种SOB培养基,培养2-3h后可用IPTG进行融合蛋... 展开更多; 关键词革胡子鲶生长激素原核表达优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

拟除虫菊酯类农药降解酯酶EstA融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化被引量：4: 4; 作者刘娜徐汉卿 +2 位作者崔健茆灿泉许雷《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第2期72-79,共8页; 以前期克隆得到的拟除虫菊酯类农药降解基因estA(GenBank:DQ906143)为出发基因,构建表达系统,获得可溶性融合蛋白,并通过优化诱导表达条件,获得具有实际应用价值的相关应用参数。结果表明,成功构建了重组表达载体pMal-c2X-estA并转化至... 展开更多; 关键词拟除虫菊酯类农药生物降解酯酶 estA基因可溶性蛋白原核表达条件优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2的诱导表达条件优化及原核重组蛋白纯化: 1; 作者王玮王丽国果修江帆尚小丽张昌容; 机构贵州省感染免疫与抗体工程特色实验室贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色实验室贵州省生物技术研究所; 出处《贵州农业科学》 2025年第4期66-72,共7页; 基金 2022年贵州省大学生创新创业训练计划项目(S202210660058) 国家重点研发计划项目“重大病虫害防控综合技术研发与示范”专项“天敌昆虫资源发掘利用与新产品创制”(2023YFD1400603) +1 种基金国家重点研发计划“政府间国际科技创新合作”重点专项“中欧农作物病虫害综合治理关键技术创新合作研究”(2023YFE0104800)。; 文摘【目的】通过诱导表达获取大量纯化的家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白,为后续深入分析模式昆虫家蝇的Serpin体内外免疫调节功能奠定基础。【方法】使用pET-28a(+)作为表达载体构建家蝇Serpin2的原核表达系统并导入到大肠杆菌(BL21)中,设置不同IPTG浓度、不同诱导温度和不同诱导时间以探索最佳诱导条件,在此条件下进行Serpin2原核重组蛋白大量诱导表达和纯化,并通过SDS-PAGE凝胶电泳和蛋白质谱对纯化的Serpin2重组蛋白进行鉴定。【结果】成功构建了pET28a(+)-Serpin2的重组质粒并转化至感受态细胞中,明确在30℃条件下以终浓度为0.2 mmol/L的IPTG诱导表达15 h,可使家蝇Serpin2重组蛋白在大肠杆菌BL21中获得较优表达,且在上清和包涵体内均有表达,经鉴定纯化后的蛋白即为家蝇Serpin2重组蛋白。【结论】最佳诱导条件(30℃、0.2mmol/LIPTG、15h)下可获得大量纯化的家蝇Serpin2重组蛋白。; 关键词家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂2 原核表达优化蛋白纯化重组质粒重组蛋白; Keywords Musca domestica Serpin2 prokaryotic expression optimization protein purification recombinant plasmid recombinant protein; 分类号 S433.2 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化被引量：1: 2; 作者简子健马素贞申卫红翟少华赵森; 机构新疆农业大学动物医学学院; 出处《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期336-340,共5页; 基金新疆维吾尔自治区高技术项目(200611107); 文摘【目的】提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量。【方法】研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST-CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定。【结果】大肠杆菌BL21(DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600=1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8 h,GST-CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL。【结论】确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 关键词犬瘟热病毒 N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化纯化; Keywords canine distemper virus N protein gene fusion protein optimization of prokaryotic expression condition purification; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名革胡子鲶GH成熟肽在大肠杆菌中表达条件的优化被引量：1: 3; 作者杨学明何荆洲张立黄雄军郭亚芬蒋和生; 机构广西水产研究所广西大学动物科技学院贵港扬翔饲料有限公司; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期182-184,共3页; 基金广西自然科学基金项目(桂科自0542035); 文摘将携带革胡子鲶(Clarias lazera)生长激素(GH)成熟肽cDNA序列的重组表达载体pRSET-mGH转化入大肠杆菌Escherichia.coliBL21(DE3)pLysS中进行融合蛋白的表达。表达条件优化试验表明,表达菌株接种SOB培养基,培养2-3h后可用IPTG进行融合蛋白诱导表达;IPTG最佳诱导浓度为1.5 mmol/L,最佳诱导时间为4 h。本试验构建的原核表达体系为下一步革胡子鲶生长激素促生长制剂的研制奠定了基础。; 关键词革胡子鲶生长激素原核表达优化; Keywords Clarias lazera Growth hormone Prokaryotic expression Optimization; 分类号 S917.4 [农业科学—水产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名拟除虫菊酯类农药降解酯酶EstA融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化被引量：4: 4; 作者刘娜徐汉卿崔健茆灿泉许雷; 机构西南交通大学生命科学与工程学院中国农业科学院研究生院; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第2期72-79,共8页; 基金国家863计划项目(2011AA10A205); 文摘以前期克隆得到的拟除虫菊酯类农药降解基因estA(GenBank:DQ906143)为出发基因,构建表达系统,获得可溶性融合蛋白,并通过优化诱导表达条件,获得具有实际应用价值的相关应用参数。结果表明,成功构建了重组表达载体pMal-c2X-estA并转化至宿主菌BL21(DE3),获得酯酶estA基因诱导表达系统;通过SDS-PAGE凝胶电泳、以α-乙酸萘酯为底物的酶活性检测及Western blot方法,确认外源蛋白EstA在大肠杆菌宿主菌中成功表达并具有酯酶活性。重组基因工程菌可溶性原核表达诱导条件的优化试验表明,其最佳诱导表达条件是:Ca2+浓度1.0mmol/L、诱导初始OD600值0.7、诱导剂IPTG浓度0.1mmol/L、诱导初始pH值7、诱导温度26℃、诱导时间17.5h,优化后的酯酶活性(92.03U/mg)较优化前(44.64U/mg)提高了1倍多。; 关键词拟除虫菊酯类农药生物降解酯酶 estA基因可溶性蛋白原核表达条件优化; Keywords pyrethroid pesticides biodegradation esterase estA gene soluble protein optimiza-tion of prokaryotic expression conditions; 分类号 S482.35 [农业科学—农药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2的诱导表达条件优化及原核重组蛋白纯化	王玮王丽国果修江帆尚小丽张昌容	《贵州农业科学》	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化	简子健马素贞申卫红翟少华赵森	《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	革胡子鲶GH成熟肽在大肠杆菌中表达条件的优化	杨学明何荆洲张立黄雄军郭亚芬蒋和生	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	拟除虫菊酯类农药降解酯酶EstA融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化	刘娜徐汉卿崔健茆灿泉许雷	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2014	4	在线阅读下载PDF 职称材料