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应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究 被引量:16
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作者 布日额 李宝臣 +2 位作者 马波 王君伟 Ulrich Neumann 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期199-203,共5页
利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅Ig... 利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1:200,检测血清的最适稀释度是1:400,阳性判定标准为OD492≥0.20,且P/N≥2.0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清,其抗体滴度在1:400~1:51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 VP3基因重组原核表达产物 间接-ELISA Dot—ELISA
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日本血吸虫线粒体相关蛋白基因原核表达产物的纯化 被引量:1
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作者 胡雪梅 张兆松 +5 位作者 王祝鸣 吴海玮 苏川 季珺 王勇 吴观陵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第5期53-56,共4页
目的 建立日本血吸虫线粒体相关蛋白原核表达产物的纯化方法 ,获得理想的表达产物。方法 菌体经冻融、超声破菌及提取包涵体后 ,用分子筛层析纯化蛋白质并使之复性 ,再用Western -blot方法对纯化蛋白的抗原性进行分析。经动物免疫后采... 目的 建立日本血吸虫线粒体相关蛋白原核表达产物的纯化方法 ,获得理想的表达产物。方法 菌体经冻融、超声破菌及提取包涵体后 ,用分子筛层析纯化蛋白质并使之复性 ,再用Western -blot方法对纯化蛋白的抗原性进行分析。经动物免疫后采用dot-ELISA方法检测兔血清中抗体滴度 ,分析纯化蛋白的抗原活性。结果 经分子筛纯化后的融合蛋白rSj3 3 8/ 2 6GST经SDS -PAGE电泳鉴定达电泳纯 ,Westernblot显示纯化蛋白能够被日本血吸虫重感染兔血清及rSj3 3 8/2 6GST免疫兔血清识别。dot-ELISA法检测结果表明经分子筛纯化并复性的rSj3 3 8/ 2 6GST融合蛋白免疫兔血清中特异性抗体的滴度最高 ,为 1∶5 12 0 0。结论 纯化后的融合蛋白rSj3 3 8/ 2 6GST具有较高的纯度及较强的免疫活性 ,可望作为日本血吸虫病疫苗候选分子进一步深入研究。 展开更多
关键词 日本血吸虫 线粒体相关蛋白 配合蛋白 纯化 原核表达产物
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汉滩病毒S基因0.7kb片段与M基因G2片段不同拼接方式嵌合基因原核表达产物的初步比较 被引量:1
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作者 张芳琳 徐志凯 +6 位作者 罗雯 阎岩 吴兴安 刘勇 白文涛 胡刚 王海涛 《科学技术与工程》 2002年第5期21-25,共5页
比较汉滩病毒S、M基因部分片段的嵌合基因不同拼接方式表达产物的活性。构建了嵌合基因原核表达载体pGEX-4T-1-S0.7G2,并与已构建的pGEX-4T-1-G2S0.7的诱导表达产物进行了比较。结果表明,融合蛋白同时保持亲本蛋白的结合活性,且前者表... 比较汉滩病毒S、M基因部分片段的嵌合基因不同拼接方式表达产物的活性。构建了嵌合基因原核表达载体pGEX-4T-1-S0.7G2,并与已构建的pGEX-4T-1-G2S0.7的诱导表达产物进行了比较。结果表明,融合蛋白同时保持亲本蛋白的结合活性,且前者表达产物的结合活性始终比后者低。研究表明,嵌合基因的不同拼接方式对融合蛋白的活性可能有一定的影响。 展开更多
关键词 汉滩病毒 S基因 0.7kb片段 M基因 G2片段 接接方式 基因表达 肾综合征出血热 嵌合基因 原核表达产物
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人结缔组织生长因子研究有创新
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《世界科学技术-中医药现代化》 2005年第4期119-119,共1页
中国医学科学院医学生物学研究所重组人结缔组织生长因子研究,经过多年来的探索,已经成功克隆得到与国外发表序列在5”一端编码有一定差异的CTGF基因,并经特定修饰、重组表达了具有生物学活性的CTGF原核表达产物。
关键词 人结缔组织生长因子 中国医学科学院 有创 原核表达产物 CTGF 重组表达 医学生物学 生物学活性 研究所
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