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斜带石斑鱼抗菌肽hepcidin基因克隆及其成熟肽的原核融合表达被引量：11: 1; 作者陈大玮邓利 +2 位作者刘志刚孟铂渊马一见《南方水产科学》 CAS 2011年第1期1-7,共7页; 文章根据已报道的硬骨鱼类hepcidin cDNA序列设计简并引物，通过RT—PCR从重要海水经济鱼类斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）肝脏中扩增出1条具有完整开放阅读框的246bpcDNA序列，Blast分析表明该序列是鱼类hepcidin基因家族的一员... 展开更多; 关键词斜带石斑鱼抗菌肽 HEPCIDIN 分子克隆原核融合表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达被引量：5: 2; 作者胡延春张乃生 +3 位作者邓俊良左之才廖玉辉欧阳红生《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期463-469,共7页; 根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列推导出其DNA序列,设计并人工合成两两互补的14条寡核苷酸片段。经片段延伸、PCR、克隆,成功构建α-银环蛇毒素基因克隆质粒;质粒经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切回收后连接于表达载体pET28a(+)中,分别转化B... 展开更多; 关键词 Α-银环蛇毒素基因克隆非融合原核表达免疫原性生物学活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究被引量：2: 3; 作者张桂红林海波 +7 位作者詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚江经纬辛朝安《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期474-477,共4页; 用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达,表达量约占总蛋白的20%。表达的... 展开更多; 关键词猪白细胞介素-6基因非融合原核表达 SDS-PAGE ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

人MT-1E融合蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：2: 4; 作者杨芳贺智敏 +4 位作者孙颖陈主初严斌黄宏科李廷宝《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期583-586,共4页; 目的 :体外表达人源性MT 1E融合蛋白并进行纯化。方法 :采用RT PCR方法获得人MT 1E基因的编码区 ,将其克隆入原核表达载体pQE4 0 ,并在大肠杆菌M15中表达 ,对蛋白的表达形式及诱导条件进行分析 ,用Ni NTagarose亲和层析柱纯化目的蛋白... 展开更多; 关键词金属硫蛋白原核融合表达载体重组融合蛋白亲和层析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名斜带石斑鱼抗菌肽hepcidin基因克隆及其成熟肽的原核融合表达被引量：11: 1; 作者陈大玮邓利刘志刚孟铂渊马一见; 机构深圳大学生命科学学院; 出处《南方水产科学》 CAS 2011年第1期1-7,共7页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2006AA100308) 深圳市重点实验室提升项目"石斑鱼抗菌肽基因表达研究"; 文摘文章根据已报道的硬骨鱼类hepcidin cDNA序列设计简并引物，通过RT—PCR从重要海水经济鱼类斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）肝脏中扩增出1条具有完整开放阅读框的246bpcDNA序列，Blast分析表明该序列是鱼类hepcidin基因家族的一员，被命名为斜带石斑鱼hepcidin样抗菌肽前体，该cDNA所推导的氨基酸序列有如下特点：1）信号肽序列与多数鱼类hepcidin信号肽的同源性在67％～87％之间；2）C端20个氨基酸序列具有绝大多数动物hepcidin成熟肽的共同典型保守序列特征，即在对应位置具有8个Cys；3）序列中不具有已报道的hepcidin前体肽转化酶作用典型基序[RX（K／R）R]；4）与GenBank中已注册的2条斜带石斑鱼hepcidincDNA序列（GU391241和GU391242）所推导的氨基酸序列同源性分别为36％和33％，且NJ进化树显示不与这2条序列聚为一枝，表明该序列是斜带石斑鱼hepcidin基因家族中一种新亚型，其预测成熟肽融合表达载体成功在大肠杆菌（Escherichiacoli）中表达，为后续研究奠定基础。; 关键词斜带石斑鱼抗菌肽 HEPCIDIN 分子克隆原核融合表达; Keywords Epinephelus coioides antimicrobial peptide hepcidin molecular cloning prokaryotic fusion expression; 分类号 Q516 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达被引量：5: 2; 作者胡延春张乃生邓俊良左之才廖玉辉欧阳红生; 机构四川农业大学动物科技学院吉林大学畜牧兽医学院; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期463-469,共7页; 文摘根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列推导出其DNA序列,设计并人工合成两两互补的14条寡核苷酸片段。经片段延伸、PCR、克隆,成功构建α-银环蛇毒素基因克隆质粒;质粒经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切回收后连接于表达载体pET28a(+)中,分别转化BL21(DE3)、BL21(DE3)Codon plus、BL21(DE3)plysS进行诱导表达,表达产物经Tris/tricine系统进行SDS-PAGE分析。结果表明:该基因已在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中进行了非融合表达,其表达量占细菌总蛋白的11.98%,主要以包涵体形式存在;同时对表达条件进行了优化,其表达量可达16.28%。经Western blot分析,在大约8 kDa处出现明显的目的带,与预计蛋白分子量大小一致,说明表达产物与天然α-银环蛇毒素具有相似的免疫原性。表达产物纯化、复性后经动物毒性试验表明:表达的α-银环蛇毒素蛋白具有生物学活性,小鼠腹腔注射其LD50约为1.28μg/g。; 关键词 Α-银环蛇毒素基因克隆非融合原核表达免疫原性生物学活性; Keywords alpha-bungarotoxin gene cloning non-fusion prokaryotic expressions immunogenicity biological activity; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S852 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究被引量：2: 3; 作者张桂红林海波詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚江经纬辛朝安; 机构华南农业大学兽医学院禽病室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期474-477,共4页; 基金广东省科技攻关项目(粤科计字【2003】292号) 华南农业大学校长基金(K03005); 文摘用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达,表达量约占总蛋白的20%。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经过变性溶解和复性后用酶联免疫吸附试验(ELISA)做定性定量检测。ELISA结果证实了所表达的蛋白为猪IL-6,复性后具有一定活性,并测出了复性后活性蛋白的浓度。; 关键词猪白细胞介素-6基因非融合原核表达 SDS-PAGE ELISA; Keywords swine interleukin-6 gene non-fusion prokaryotic expression SDS-PAGE ELISA; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人MT-1E融合蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：2: 4; 作者杨芳贺智敏孙颖陈主初严斌黄宏科李廷宝; 机构中南大学湘雅医学院肿瘤研究所湖南润农实业有限公司; 出处《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期583-586,共4页; 基金湖南社会发展科研基金资助课题 (OISSY2 0 0 8 4); 文摘目的 :体外表达人源性MT 1E融合蛋白并进行纯化。方法 :采用RT PCR方法获得人MT 1E基因的编码区 ,将其克隆入原核表达载体pQE4 0 ,并在大肠杆菌M15中表达 ,对蛋白的表达形式及诱导条件进行分析 ,用Ni NTagarose亲和层析柱纯化目的蛋白。结果 :重组蛋白在原核细胞中以可溶和不可溶两种表达形式存在 ,但以不可溶性形式为主 ,表达量随诱导时间延长而增加 ,在诱导 8h时目的蛋白约占菌体总蛋白的 32 %。经亲和层析获得较高纯度的人MT 1E融合蛋白。结论 :利用基因重组原核表达技术获得较纯的人源性MT 1E融合蛋白 ,为进一步研究金属硫蛋白的功能及特异性抗体的制备奠定了基础。; 关键词金属硫蛋白原核融合表达载体重组融合蛋白亲和层析; Keywords metallothionein prokaryotic fusion expression vector recombinant fusion protein affinity chromatograph; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	斜带石斑鱼抗菌肽hepcidin基因克隆及其成熟肽的原核融合表达	陈大玮邓利刘志刚孟铂渊马一见	《南方水产科学》 CAS	2011	11	在线阅读下载PDF 职称材料
2	α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达	胡延春张乃生邓俊良左之才廖玉辉欧阳红生	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究	张桂红林海波詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚江经纬辛朝安	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人MT-1E融合蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化	杨芳贺智敏孙颖陈主初严斌黄宏科李廷宝	《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料