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胆茶碱通过PI3K/Akt信号通路促进小鼠原始卵泡激活
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作者 郝恬恬 张文博 +1 位作者 王维勇 张美佳 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1145-1152,共8页
目的:探讨平滑肌松弛类药物胆茶碱(choline theophyllinate,CT)在小鼠原始卵泡激活中的作用及机制。方法:通过新生3 d SPF级雌性小鼠卵巢培养、腹腔注射和21 d雌性小鼠口服给药三种方式开展研究。小鼠被随机分为对照组和CT组。分离新生... 目的:探讨平滑肌松弛类药物胆茶碱(choline theophyllinate,CT)在小鼠原始卵泡激活中的作用及机制。方法:通过新生3 d SPF级雌性小鼠卵巢培养、腹腔注射和21 d雌性小鼠口服给药三种方式开展研究。小鼠被随机分为对照组和CT组。分离新生3 d小鼠卵巢进行体外培养,采用苏木素染色统计原始卵泡和生长卵泡数量,每组10只;qPCR分析与卵泡生长及增殖凋亡相关分子生长分化因子9(growth differentiation factor 9,Gdf9)、透明带糖蛋白3(zona pellucida glycoprotein 3,Zp3)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki-67、B细胞淋巴瘤蛋白2(B-cell lymphoma 2,BCL2)、BCL2相关X蛋白(BCL2-associated X protein,BAX)和caspase-3的表达水平,每组9只;免疫荧光染色检测增殖和凋亡相关分子PCNA、Ki-67、5-溴-2'-脱氧尿苷(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)、cleaved caspase-3和叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a,FOXO3a)的表达,每组15只;Western blot检测DEAD-box解旋酶4(DEAD-box helicase 4,DDX4)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)和磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)的表达,每组9只。对新生3d小鼠腹腔注射CT后进行卵泡计数,每组10只;Western blot检测p-mTOR和p-Akt表达,每组9只;免疫荧光检测FOXO3a出核,每组15只。对21 d小鼠进行CT饮水给药,利用免疫荧光染色和苏木素染色统计卵泡数量,每组9只。结果:与对照组相比,CT体外培养、腹腔注射及口服给药后,卵巢中生长卵泡数量显著升高;Gdf9、Zp3、Ki-67、PCNA和DDX4 mRNA和(或)蛋白水平均显著升高;进一步研究显示CT显著升高了卵巢内p-Akt水平,但对p-mTOR水平没有明显影响。此外,PI3K/Akt抑制剂LY294002可以逆转CT导致的生长卵泡数量增加。结论:CT通过激活PI3K/Akt信号通路促进了小鼠原始卵泡激活。 展开更多
关键词 胆茶碱 小鼠 原始卵泡激活 PI3K/AKT信号通路
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