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过表达SATB1对人原发性肝癌细胞HepG2增殖的促进作用 被引量：3
1
作者 罗敏 涂炜 +7 位作者 刘永健 邓欢 周珍珍 朱倩 林海华 夏丽敏 晏维 田德安 《医药导报》 CAS 2011年第2期196-199,共4页
目的研究核基质结合蛋白SATB1对人原发性肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法脂质体介导pEGFP1-SATB1真核表达全长基因质粒转染人原发性肝癌HepG2细胞,分为实验组(pEGFP1-SATB1)、对照组(pEGFP1空载体)及空白对照组。RT-PCR、Western blot检... 目的研究核基质结合蛋白SATB1对人原发性肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法脂质体介导pEGFP1-SATB1真核表达全长基因质粒转染人原发性肝癌HepG2细胞,分为实验组(pEGFP1-SATB1)、对照组(pEGFP1空载体)及空白对照组。RT-PCR、Western blot检测转染后SATB1mRNA和蛋白表达变化情况,噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪检测SATB1全长基因转染对人原发性肝癌HepG2细胞生长、增殖的影响。结果与空白对照组及对照组比较,转染pEGFP1-SATB1后,HepG2中SATB1mRNA和蛋白表达明显增加,细胞生长曲线检测结果表明转导入pEGFP1-SATB1细胞增殖明显加快,细胞数明显增多;流式细胞仪检测结果表明,细胞周期中G0/G1期细胞明显减少,S、G2/M期细胞明显增多。结论 SATB1能明显促进HepG2细胞增殖,其机制可能与参与调控细胞周期各期DNA复制、转录有关。 展开更多
关键词 SATB1 肝癌 原发性 细胞增殖
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Plk1、Chk1/2在原发性肝癌组织及HepG2细胞中的表达研究 被引量：6
2
作者 杨大刚 王众 +1 位作者 王惠群 孙诚谊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期758-760,763,共4页
目的:研究保罗样激酶1(Polo-like kinase1,Plk1)、细胞周期检测点激酶1、2(Checkpoint kinase 1/2,Chk1/2)在原发性肝癌组织与人肝癌细胞Hep G2中的表达情况。方法:使用免疫组织化学Envision法检测40例原发性肝癌组织及16例肝非肿瘤组织... 目的:研究保罗样激酶1(Polo-like kinase1,Plk1)、细胞周期检测点激酶1、2(Checkpoint kinase 1/2,Chk1/2)在原发性肝癌组织与人肝癌细胞Hep G2中的表达情况。方法:使用免疫组织化学Envision法检测40例原发性肝癌组织及16例肝非肿瘤组织中Plk1、Chk1/2蛋白的表达。提取培养后的Hep G2细胞蛋白。利用蛋白免疫印记(Western blot)技术定性分析Plk1、Chk1/2蛋白在Hep G2细胞中的表达情况,并测定灰度值进行定量分析。结果:原发性肝癌组织中Plk1、Chk1蛋白的阳性表达率分别是57.5%、75%,高于它们在肝非瘤组织中的表达率0%、25.0%(P<0.05)。Chk2在原发性肝癌组织中的表达阳性率22.5%,低于肝非肿瘤组织中的表达率56.3%(P<0.05)。Plk1、Chk1/2蛋白在Hep G2细胞中均有表达。其相对表达量分别是:0.39±0.022 6、0.08±0.024 9、0.01±0.006 6,三者之间的差异均有统计学意义,其表达的顺序依次为Plk1>Chk1>Chk2。结论:Plk1、Chk1蛋白在原发性肝癌组织中表达上调,而Chk2蛋白在原发性肝癌组织中表达下调。Plk1、Chk1/2基因作为细胞周期调控中的重要激酶在Hep G2细胞中均有表达,其表达顺序为Plk1>Chk1>Chk2。Plk1、Chk1具有相对意义的肿瘤选择性表达,可能成为肝癌生物治疗中新的治疗靶点。 展开更多
关键词 PLK1 CHK1/2 hepg2 原发性肝癌
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葡萄籽原花青素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及自噬性死亡 被引量：18
3
作者 王威 陈景红 +3 位作者 王新宁 李强 陈庆 蒋建伟 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期181-187,共7页
目的:探讨原花青素对肝癌HepG2细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法:改良MTT法(WST-8法)及克隆形成抑制实验观察原花青素对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测... 目的:探讨原花青素对肝癌HepG2细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法:改良MTT法(WST-8法)及克隆形成抑制实验观察原花青素对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,激光共聚焦显微镜观察和Western blotting检测细胞自噬发生。结果:原花青素作用HepG2细胞后,不同质量浓度的原花青素对肝癌细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应关系(P<0.01),原花青素作用于人肝癌HepG2细胞48 h的IC50为1.304×10-1g/L;与对照组相比随着原花青素作用于HepG2细胞的浓度增加,细胞克隆逐渐减少;随着原花青素浓度的增加,人肝癌HepG2细胞出现明显G1期阻滞,且高浓度原花青素组出现明显的亚二倍体峰,当原花青质量素浓度达到1.6×10-1g/L时,亚二倍体百分率为81%;不同质量浓度原花青素作用后,出现明显的凋亡细胞及坏死细胞、自噬性死亡和非特异性死亡细胞群;经原花青素处理转染GFP-LC3质粒的HepG2细胞胞浆内,LC3呈现明显的点状聚集;细胞自噬标志蛋白LC3-II的蛋白表达水平随着原花青素浓度增加逐渐增多。结论:原花青素通过诱导细胞凋亡及自噬性死亡的方式抑制人肝癌细胞的生长。 展开更多
关键词 原花青素 人肝癌hepg2细胞 凋亡 自噬
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紫甘薯汁抗肿瘤活性及诱导人肝癌细胞HepG2凋亡机制研究 被引量：16
4
作者 陈永强 刘金娟 +2 位作者 曹成亮 卞光凯 蒋继宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期263-267,共5页
目的:研究紫甘薯汁的抗肿瘤活性及其诱导肝癌细胞HepG2凋亡机制。方法:采用Alamar Blue、倒置显微镜、荧光显微镜、扫描电镜、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR和Western blotting法检测不同体积分数的紫甘薯汁对SGC-7901、HO-8910和HepG2细胞的... 目的:研究紫甘薯汁的抗肿瘤活性及其诱导肝癌细胞HepG2凋亡机制。方法:采用Alamar Blue、倒置显微镜、荧光显微镜、扫描电镜、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR和Western blotting法检测不同体积分数的紫甘薯汁对SGC-7901、HO-8910和HepG2细胞的增殖抑制作用及诱导人肝癌细胞HepG2凋亡机制研究。结果:与对照组相比,体积分数5%和10%的紫甘薯汁对SGC-7901、HO-8910和HepG2细胞具有抑制作用,呈体积分数依赖性;作用HepG2细胞48h后,能观察到细胞皱缩和凋亡小体以及凋亡细胞典型的梯状DNA条带。RT-PCR和Western blotting法检测结果显示,紫甘薯汁可以诱导HepG2细胞中Fas、FADD、Caspase-3、Caspase-8和p53 mRNA表达水平上调和蛋白表达量增加,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性裂解片段明显增高且Caspase-3酶活性显著提高。结论:紫甘薯汁体外对肿瘤细胞的增殖具有一定抑制作用且通过细胞表面死亡受体途径诱导HepG2细胞凋亡,同时p53在此凋亡过程中也起着重要的作用。 展开更多
关键词 紫甘薯 人肝癌细胞hepg2 抗肿瘤活性 细胞凋亡
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水飞蓟宾诱导人肝癌HepG2细胞凋亡并提高对5-FU、顺铂的敏感性 被引量：8
5
作者 陈景红 张鹏 +3 位作者 陈庆 刘萍莉 王莉 蒋建伟 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期138-143,共6页
目的:探讨水飞蓟宾诱导人肝癌HepG2细胞凋亡并提高5-FU、顺铂的敏感性。方法:采用MTT法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的水飞蓟宾对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258染色法检测水飞蓟宾作用于人肝癌HepG2细胞后其细胞核形态... 目的:探讨水飞蓟宾诱导人肝癌HepG2细胞凋亡并提高5-FU、顺铂的敏感性。方法:采用MTT法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的水飞蓟宾对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258染色法检测水飞蓟宾作用于人肝癌HepG2细胞后其细胞核形态的改变;Western blotting检测凋亡相关蛋白(Caspase-3,Caspase-9)的表达;采用水飞蓟宾联合5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP),观察对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用。结果:MTT法检测显示,水飞蓟宾对肝癌HepG2细胞有明显的增殖抑制作用,并随着水飞蓟宾浓度的增大而增强,作用于肝癌HepG2细胞48 h的IC50为195.38μmol/L;克隆形成抑制实验表明随着水飞蓟宾药物浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与对照组相比有显著差异;其细胞核固缩、边聚、裂解等细胞凋亡形态学变化;存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解;150μmol/L的水飞蓟宾与不同质量浓度的化疗药物(5-FU,DDP)联合作用于HepG2细胞48h,可提高HepG2细胞对这些化疗药物的敏感性,增敏倍数分别为39.63和21.54倍。结论:水飞蓟宾通过诱导人肝癌HepG2细胞凋亡抑制细胞增殖,并提高HepG2细胞对5-FU,DDP的敏感性。 展开更多
关键词 水飞蓟宾 hepg2细胞 细胞凋亡 敏感性
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5-脱氧杂氮胞苷对HepG2肝癌细胞恶性表型及caspase-3和bcl-2表达的影响 被引量：6
6
作者 张翠娟 周庚寅 +3 位作者 喻芳 李丽 林晓燕 马超 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期103-106,共4页
目的　观察5-脱氧杂氮胞苷(5-aza-CdR)对HepG2细胞株生长抑制和凋亡的影响。方法　采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的生长抑制;通过Giemsa染色观察细胞贴壁克隆形成率;用流式细胞术分析5-aza-CdR对细胞凋亡的影响;... 目的　观察5-脱氧杂氮胞苷(5-aza-CdR)对HepG2细胞株生长抑制和凋亡的影响。方法　采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的生长抑制;通过Giemsa染色观察细胞贴壁克隆形成率;用流式细胞术分析5-aza-CdR对细胞凋亡的影响;用免疫细胞化学方法检测caspase-3和bcl-2蛋白的表达变化。结果　5-aza-CdR可抑制HepG2细胞 株生长,并呈剂量依赖性,第4天时的抑制率最大,可达60.2%,细胞贴壁克隆形成率从36.3%下将至17.3%;流式细胞术结 果表明8μmol/L5-aza-CdR作用第4天凋亡率为10.26%,与对照相比差异有统计学意义;caspase-3蛋白表达明显增加,而 bcl 2蛋白表达则明显下调。结论　5-aza-CdR可抑制HepG2细胞增殖并能促进凋亡,其机制可能是通过恢复某些抑癌基因表 达,上调caspase-3蛋白并下调bcl-2蛋白表达。 展开更多
关键词 hepg2细胞 CASPASE-3蛋白 bcl-2蛋白表达 恶性表型 BCL-2表达 克隆形成率 肝癌细胞 结论 天时 目的
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基于电喷雾电离质谱的人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02的N-糖链的定性定量比较 被引量：8
7
作者 潘丽英 王承健 +3 位作者 袁江北 张英 黄琳娟 王仲孚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期237-243,共7页
以培养的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,采用细胞裂解液提取总蛋白,用PNGase F酶解释放N-糖链,以微晶纤维素柱结合石墨碳柱纯化分离N-糖链,通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对N-糖链进行序列鉴定,以β-环... 以培养的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,采用细胞裂解液提取总蛋白,用PNGase F酶解释放N-糖链,以微晶纤维素柱结合石墨碳柱纯化分离N-糖链,通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对N-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精为内标对2种细胞系的N-糖链进行了定量比较分析.结果表明,在肝癌细胞系HepG2和正常细胞系L02中共检测到26种N-糖链,与L02相比,HepG2的大多数高甘露糖型糖链、唾液酸化糖链和岩藻糖基化糖链的数量都明显升高,其中有15种糖链在数量上具有极显著性差异(p<0.01),1种糖链具有显著性差异(p<0.05).本研究为进一步探索肝癌中各类N-糖链的表达特点及发现早期肝癌糖链标志物提供了参考. 展开更多
关键词 原发性肝癌细胞(hepg2) 正常肝细胞(L02) N-糖链 电喷雾电离质谱
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原发性肝癌患者血清TGFβ1、IL-12、IFNγ等细胞因子水平及临床演变的关系 被引量：5
8
作者 孔丽 姚树坤 +2 位作者 张瑞星 殷飞 王娜 《临床肝胆病杂志》 CAS 2006年第4期247-249,共3页
观察原发性肝癌(Primary hepatic carcinoma,PHC)患者血清TGFβ1及IL-2、IL-12、TNF-α、IFNγ水平及与临床演变的关系。采用酶联免疫法测定。PHC患者血清TGFβ1和TNF—α水平显著高于正常对照(P= 0．014,P=0．0001),IFNγ、IL-2和IL-1... 观察原发性肝癌(Primary hepatic carcinoma,PHC)患者血清TGFβ1及IL-2、IL-12、TNF-α、IFNγ水平及与临床演变的关系。采用酶联免疫法测定。PHC患者血清TGFβ1和TNF—α水平显著高于正常对照(P= 0．014,P=0．0001),IFNγ、IL-2和IL-12低于正常对照(P=0．008,P=0．018,P=0．007);血清TGFβ1与TNF-α和IL-2呈负相关(P<0．05,P<0．01),IL-12与IFNγ和总胆红素(TBil)呈正相关(P<0．01,P<0．01);将PHC患者分成I～Ⅱa期和Ⅱb～Ⅲ期两组,Ⅱb～III期患者血清TGFα1、TNF—α水平高于I～IIa期患者(P<0．05),而IFNγ、IL-2和IL—12显著低于I～Ⅱa期患者(P<0．05)。提示PHC患者存在多种细胞因子异常,细胞因子网络失衡,尤其中晚期患者更为明显,这可能是肿瘤逃脱免疫监控,不断进展的原因之一。 展开更多
关键词 原发性肝癌 细胞因子 细胞因子网络
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miR-127-3p靶向MAPK4对肝癌HepG2细胞株生物学特性的影响 被引量：9
9
作者 张玉蓉 贾俊枝 +1 位作者 徐国明 郭红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1330-1337,共8页
目的:探究miR-127-3p与MAPK4的靶向关系及其对肝癌HepG2细胞生长转移能力的影响。方法:生物信息预测miR-127-3p与MAPK4间靶向关系,荧光素酶实验验证,qRT-PCR检测两者在肝细胞中的基因表达。miR-127-3p mimic及pcDNA-MAPK4(pc-MAPK4)分... 目的:探究miR-127-3p与MAPK4的靶向关系及其对肝癌HepG2细胞生长转移能力的影响。方法:生物信息预测miR-127-3p与MAPK4间靶向关系,荧光素酶实验验证,qRT-PCR检测两者在肝细胞中的基因表达。miR-127-3p mimic及pcDNA-MAPK4(pc-MAPK4)分别或同时转染HepG2细胞,qRT-PCR检测miR-127-3p表达,BrdU及Hoechst检测细胞增殖及凋亡,Transwell及划痕实验检测侵袭及迁移,Western blot(WB)检测Ki67、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、MMP-9、VEGF、MAPK4、MAPKAPK5、HSPB1表达。miR-127-3p mimic转染HepG2细胞后,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录肿瘤体积,免疫组化及Tunel检测其增殖凋亡水平,WB检测MMP-9及MAPKAPK5表达。结果:与HL-7702比较,HepG2中miR-127-3p表达下调而MAPK4上调。HepG2中,miR-127-3p mimic上调miR-127-3p并下调MAPK4表达及MAPK4 wt荧光素酶活性,pc-MAPK4上调MAPK4并减弱miR-127-3p mimic的作用;miR-127-3p mimic减少BrdU阳性细胞及Ki67、Bcl-2表达,增加凋亡细胞及Bax、cleaved Caspase-3表达,pc-MAPK4增加BrdU阳性细胞及Ki67、Bcl-2表达,减少凋亡细胞及Bax、cleaved Caspase-3表达,减弱miR-127-3p mimic的抑增殖促凋亡作用;miR-127-3p mimic减少侵袭细胞数、划痕闭合率及MMP-9、VEGF表达,pc-MAPK4增加侵袭细胞数、划痕闭合率及MMP-9、VEGF表达并减弱miR-127-3p mimic的抗侵袭迁移作用;miR-127-3p mimic降低MAPKAPK5及HSPB1磷酸化比值,pc-MAPK4升高其比值并减弱miR-127-3p mimic的影响。miR-127-3p mimic减小HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤体积,减少组织中Ki67阳性细胞、MMP-9表达及MAPKAPK5磷酸化比值并增加凋亡细胞。结论:miR-127-3p靶向MAPK4可抑制肝癌HepG2细胞生长及转移。 展开更多
关键词 miR-127-3p MAPK4 肝癌hepg2细胞 生长转移
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葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性研究 被引量：7
10
作者 汤俊 毕永红 +1 位作者 万能 胡征宇 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第33期18643-18645,18656,共4页
[目的]研究葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性。[方法]采用二甲基四氮唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,形态学法观察凋亡的特征性变化,AnnexinV/PI双染及PI单染流式细胞术法检测凋亡率。[结果]经不同浓度提取物作用后,HepG2细胞的生... [目的]研究葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性。[方法]采用二甲基四氮唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,形态学法观察凋亡的特征性变化,AnnexinV/PI双染及PI单染流式细胞术法检测凋亡率。[结果]经不同浓度提取物作用后,HepG2细胞的生长受到显著抑制,并呈现时间-浓度依赖关系趋势。观察细胞形态,发现有凋亡特征性变化。AnnexinV/PI双染结果显示,癌细胞早期凋亡率随提取物浓度的升高而显著增高,最高可达79.2%。PI法同样显示凋亡的发生,其凋亡峰最大比率为9.6%,显著高于对照组。[结论]葛仙米甲醇提取物能够诱导肝癌细胞HepG2的凋亡。 展开更多
关键词 葛仙米 肝癌细胞hepg2 凋亡
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肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌患者后sIL-2R T淋巴细胞亚群改变 被引量：11
11
作者 毛华 赵敏芳 宋卫生 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1999年第1期48-50,共3页
为了解原发性肝癌患者经肝动脉化疗栓塞（ＴＡＥ）治疗后免疫功能状态，我们检测２９例原发性肝癌患者血液可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ２Ｒ）、辅助Ｔ淋巴细胞、抑制Ｔ淋巴细胞。发现原发性肝癌患者Ｔｈ细胞显著下降，Ｐ＜０．０５... 为了解原发性肝癌患者经肝动脉化疗栓塞（ＴＡＥ）治疗后免疫功能状态，我们检测２９例原发性肝癌患者血液可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ２Ｒ）、辅助Ｔ淋巴细胞、抑制Ｔ淋巴细胞。发现原发性肝癌患者Ｔｈ细胞显著下降，Ｐ＜０．０５。ｓＩＬ２Ｒ、Ｔｓ细胞比健康对照组明显增高，Ｐ＜０．０５；ＴＡＥ治疗后原发性肝癌患者Ｔｈ细胞明显增高，Ｐ＜０．０５，ｓＩＬ２Ｒ、Ｔｓ细胞显著降低Ｐ＜０．０５。测定原发性肝癌患者血液中ｓＩＬ２Ｒ、Ｔｈ、Ｔｓ细胞对判断患者免疫功能状态、疗效、预后有一定的价值。 展开更多
关键词 原发性 肝肿瘤 栓塞疗法 T细胞 SIL-2R
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36种蔬菜抑制肝癌HepG2和结肠腺癌Caco-2细胞增殖活性评价 被引量：3
12
作者 万红霞 刘仁斌 +1 位作者 孙海燕 刘冬 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期995-1001,共7页
为明确36种中国主要消费蔬菜多酚提取物的总酚含量和抑制人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖活性,分别采用Folin-Ciocalteu法确定了蔬菜提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法确定了其抗Hep G2和Caco-2细胞增殖的活性,分析了总酚含... 为明确36种中国主要消费蔬菜多酚提取物的总酚含量和抑制人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖活性,分别采用Folin-Ciocalteu法确定了蔬菜提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法确定了其抗Hep G2和Caco-2细胞增殖的活性,分析了总酚含量与抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性之间的相关性。结果表明,36种蔬菜每百克中没食子酸当量:芥蓝(973.09±31.29)μmol/hg,莲藕(920.55±29.00)μmol/hg,它们的总酚含量最高;丝瓜(44.94±4.16)μmol/hg,其总酚含量最低。在可测出抗增殖EC50值的蔬菜中,韭菜(15.96±0.88)mg/m L和蒜苔(17.54±0.03)mg/m L,它们的抗Hep G2细胞增殖的活性最强;上海青(390.52±17.63)mg/m L和空心菜(394.25±11.89)mg/m L,它们的活性最弱。韭菜抗Caco-2细胞增殖的活性最强,为(21.08±1.67)mg/m L;青尖椒的活性最弱,为(390.17±4.78)mg/m L。这些蔬菜的抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性与其总酚含量相关性均不显著(R2=0.027 1,p>0.05;R2=0.151 3,p>0.05),表明蔬菜的抗肿瘤活性不能单从其多酚含量的高低来推测。 展开更多
关键词 蔬菜 多酚 人结肠腺癌Caco-2细胞 人肝癌hepg2细胞 抗增殖活性
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过表达外源性Cyr61对人肝癌细胞株HepG2生长和迁移的影响 被引量：3
13
作者 丁伟 司维柯 +2 位作者 孙世俊 潘静 李招权 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期378-381,共4页
目的采用AdEasy系统构建的带有标记基因RFP的重组腺病毒Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,并观察外源性Cyr61对肿瘤细胞生长和迁移的影响。方法Ad-Cyr61与Ad-RFP分别感染人肝癌细胞株HepG2,荧光倒置显微镜观察荧光表达,通过RT-PCR、免疫... 目的采用AdEasy系统构建的带有标记基因RFP的重组腺病毒Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,并观察外源性Cyr61对肿瘤细胞生长和迁移的影响。方法Ad-Cyr61与Ad-RFP分别感染人肝癌细胞株HepG2,荧光倒置显微镜观察荧光表达,通过RT-PCR、免疫组化实验分别检测Ad-Cyr61的mRNA和蛋白的表达;通过MTT实验、细胞计数实验、克隆形成实验和划痕愈合实验,观察Cyr61对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖和迁移的影响。结果Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,与对照组比较细胞数量增多,集落形成增加,细胞划痕逐渐愈合。结论Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2后可促进细胞增殖和迁移,提示Cyr61在肿瘤发生和转移中可能起到重要作用。 展开更多
关键词 富半胱氨酸蛋白61 重组腺病毒 人肝癌hepg2细胞 增殖 迁移
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原发性肝癌患者CD8^+CD28^-和CD8^+CD28^+细胞亚群的分析 被引量：18
14
作者 裘宇容 杨春莉 +1 位作者 陈炼波 王前 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期72-73,共2页
目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达。方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28-)的表达进行检测。结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD... 目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达。方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28-)的表达进行检测。结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD8+CD28+细胞百分率降低,CD8+ CD28-细胞百分率升高,与对照组相比具有显著性差异。CD8+CD28+、CD8+CD28-细胞百分率与CD8+T细胞百分率的相关性研究表明,CD8+CD28-细胞数与CD8+T细胞数之间呈正相关。结论HCC病人CD8+细胞升高,CD8+细胞上CD28分子的表达是异常的,即CD8+CD28细胞数升高,CD8+CD28+细胞数降低;CD8+T细胞的升高是CD8+CD28-细胞亚群升高的结果。+++- 展开更多
关键词 原发性肝癌 CD8^+CD28^+ CD8^+CD28^- 细胞亚群
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Lin28对肝癌HepG2细胞5-Fu敏感性的影响及其分子机制 被引量：3
15
作者 陈少坚 林拥华 +2 位作者 吴友谊 魏剑锋 廖政戎 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期261-266,共6页
目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化... 目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化并计算5-Fu对细胞作用的IC50,流式细胞术检测5-Fu处理后细胞凋亡情况、WB法检测凋亡相关蛋白的表达变化,qPCR法检测转染后耐药相关miRNA(let-7a和let-7b)及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的mRNA表达水平。结果:与空载对照组(HepG2/Vector)相比,HepG2/Lin28组细胞中Lin28 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),过表达Lin28可显著抑制HepG2细胞对5-Fu作用的敏感性(IC50明显升高,P<0.05)和增强细胞增殖活性、使细胞凋亡率和凋亡相关蛋白caspase-3表达明显降低(均P<0.01)。与阴性对照组(si-control)相比,si-Lin28细胞中Lin28表达水平显著下降(P<0.01);敲减Lin28可使细胞增殖活性及5-Fu的IC50显著降低(均P<0.01),凋亡率及凋亡蛋白表达明显增加(P<0.01)。与HepG2/Vector组比较,HepG2/Lin28细胞中let-7a、let-7b及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的表达水平明显上调(均P<0.01),而si-Lin28细胞中let-7a、let-7b及Oct4、Nanog、Sox2的表达水平较si-control组明显下调(均P<0.01)。结论:Lin28可通过调节miRNAs的表达及肿瘤干细胞的形成从而调节肝癌HepG2细胞对化疗的敏感性,靶向调节Lin28表达有望成为提高肝癌化疗疗效的手段。 展开更多
关键词 肝细胞癌 hepg2细胞 Lin28 5-氟尿嘧啶 化疗敏感性 肿瘤干细胞 凋亡
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IL12基因多态性与原发性肝细胞肝癌遗传易感性的关联研究 被引量：4
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作者 刘莉 刘政 +3 位作者 徐研 董静 沈洪兵 胡志斌 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期34-38,共5页
目的:探讨IL12A和IL12B基因多态性与江苏人群原发性肝细胞肝癌的遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究,对明确诊断的原发性肝细胞肝癌新发病例538例按年龄和城乡频数匹配正常对照535例,以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-R... 目的:探讨IL12A和IL12B基因多态性与江苏人群原发性肝细胞肝癌的遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究,对明确诊断的原发性肝细胞肝癌新发病例538例按年龄和城乡频数匹配正常对照535例,以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对IL12A基因的rs568408(3'UTRG>A)、rs2243115(5'UTRT>G)和IL12B基因的rs3212227(3'UTRA>C)进行多态性检测,比较不同基因型与原发性肝细胞肝癌发病风险的关系。结果:携带IL12Ars568408变异等位基因的个体(rs568408AG/AA)发生原发性肝细胞肝癌的风险较携带野生纯合子(rs568408GG)增加了35%(调整OR=1.35,95%CI=1.03～1.79)。进一步对IL12Ars568408位点的作用按年龄、性别、吸烟情况、饮酒情况、HBsAg和抗HCVAb携带情况进行分层分析,结果发现rs568408位点对原发性肝细胞肝癌发病风险的影响在男性和有饮酒史患者中更为显著(调整OR分别为1.46和1.53,95%CI分别为1.08～1.98和1.07～2.18)。结论:IL12A rs568408可能影响江苏人群原发性肝细胞肝癌发病风险。 展开更多
关键词 IL12 单核苷酸多态性 原发性肝细胞肝癌 分子流行病学
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原发性肝癌患者CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞的检测及意义 被引量：8
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作者 刘辉 朱争艳 +4 位作者 王鹏 骆莹 王凤梅 王芳 杜智 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第22期1376-1379,共4页
目的:探讨CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞(Tregs)在原发性肝细胞性肝癌(HCC)患者外周血中的变化及其临床意义。方法:采集40例乙型肝炎病毒(HBV)相关的HCC患者[巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期A期患者7例、B期患者8例、C期患者20例、D期... 目的:探讨CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞(Tregs)在原发性肝细胞性肝癌(HCC)患者外周血中的变化及其临床意义。方法:采集40例乙型肝炎病毒(HBV)相关的HCC患者[巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期A期患者7例、B期患者8例、C期患者20例、D期患者5例]、35例慢性乙型肝炎(CHB)患者及28例正常健康人的外周抗凝血,应用CD4(PE-CY5)、CD25(FITC)、CD127(PE)三种特异性荧光抗体标记后,通过流式细胞术对CD4^+CD25^+CDl27^(low)Tregs水平进行三色荧光抗体检测。结果:HCC患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)Tregs占CD4^+T细胞的百分比显著高于正常健康人(P<0.001)和CHB患者(P=0.017),CHB患者外周血CD4^+CD25^+CDl27^(low)Tregs占CD4^+T细胞的百分比高于正常健康人(P=0.035);HCC中BCLC分期为C期的患者外周血CD4^+CD25+CD127^(low)Tregs占CD4^+T细胞的百分比显著高于A期患者(P=0.020)和B期患者(P=0.019)。结论:CD4^+CD25^+CD127^(low)Tregs水平异常增高可能是HCC免疫逃逸的一个重要机制,且其变化水平与临床病情的进展存在一定的相关性。 展开更多
关键词 原发性肝癌 乙型肝炎病毒CD4+CD25+调节性T细胞CDl27
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MDM2和P53蛋白表达与原发性肝细胞肝癌发生的关系 被引量：2
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作者 潘运龙 覃莉 +2 位作者 蒋光愉 严林 王华曦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期72-75,共4页
目的 :研究MDM2和突变型P53蛋白表达与原发性肝细胞肝癌 (HCC)发生的关系。方法 :用免疫组织化学SP法 ,检测 55例HCC癌组织、2 3例癌旁组织、10例正常肝组织MDM2和突变型P53蛋白表达情况。结果 :55例HCC中MDM2蛋白阳性表达 17例 (3 0 9... 目的 :研究MDM2和突变型P53蛋白表达与原发性肝细胞肝癌 (HCC)发生的关系。方法 :用免疫组织化学SP法 ,检测 55例HCC癌组织、2 3例癌旁组织、10例正常肝组织MDM2和突变型P53蛋白表达情况。结果 :55例HCC中MDM2蛋白阳性表达 17例 (3 0 9% ) ,突变型P53蛋白阳性表达 2 3例 (41 8% ) ,二者均阳性表达 11例(2 0 % ) ,MDM2和突变型P53蛋白表达有相关性 (r=0 3 10 ,P <0 0 5)。 2 3例癌旁组织MDM2蛋白阳性 1例 ,突变型P53蛋白阳性表达 2例 ,肝癌组织和癌旁组织MDM2和突变型P53蛋白表达有差异 (P <0 0 5)。 10例正常肝组织无MDM2和突变型P53蛋白表达。结论 :肝细胞癌组织有MDM2和突变型P53过量表达 ,MDM2蛋白和 展开更多
关键词 原发性肝细胞肝癌 MDM2蛋白质 P53蛋白质 基因表达 免疫组织化学 发病机制
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载脂蛋白C1表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制 被引量：2
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作者 宋慧娟 徐振华 何东宁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期128-135,共8页
目的:探讨载脂蛋白C1 (APOC1)表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步阐明其相关分子机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平及其与患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测不... 目的:探讨载脂蛋白C1 (APOC1)表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步阐明其相关分子机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平及其与患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测不同肝癌细胞中APOC1mRNA表达水平,筛选APOC1低表达的人肝癌HepG2细胞作为研究对象。将pcDNA3.1-APOC1质粒转染至HepG2细胞过表达APOC1 (APOC1过表达组),以转染空载体pcDNA3.1的HepG2细胞为对照组,采用MTS法和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测2组细胞增殖活性和增殖率,Transwell小室实验检测2组细胞中迁移细胞数,流式细胞术和TUNEL法检测2组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率,Western blotting法检测2组细胞中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、蛋白激酶B (AKT)、磷酸化AKT (p-AKT)、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:TCGA数据库分析,肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平低于正常肝组织(P<0.05),并且APOC1 mRNA低表达组肝癌患者预后较差。RT-qPCR法检测,HepG2细胞中APOC1 mRNA表达水平最低,选取该细胞作为后续研究对象。与对照组比较,APOC1过表达组细胞增殖活性和增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),迁移细胞数明显减少(P<0.01), S期细胞百分率和细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与对照组比较,APOC1过表达组细胞中p-ERK、 p-AKT和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:APOC1高表达能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其机制可能与其抑制p-ERK、p-AKT、Bcl-2蛋白表达和促进cleaved caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 载脂蛋白C1 肝肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 人肝癌hepg2细胞
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虎蝎化积膏对裸鼠HepG2细胞移植性肝癌的抑制作用 被引量：1
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作者 蔡媛 杜青 +2 位作者 曾普华 沈冰冰 彭艳梅 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4019-4023,共5页
目的探讨虎蝎化积膏对裸鼠HepG2细胞移植性肝癌的抑制作用。方法建立BALB/c裸鼠HepG2细胞移植性肿瘤模型,造模成功后随机分为模型组、虎蝎化积膏组(20 mL/kg)、阳性组(顺铂,4 mg/kg),各组给予相应药物干预,14 d后记录各组裸鼠体质量及... 目的探讨虎蝎化积膏对裸鼠HepG2细胞移植性肝癌的抑制作用。方法建立BALB/c裸鼠HepG2细胞移植性肿瘤模型,造模成功后随机分为模型组、虎蝎化积膏组(20 mL/kg)、阳性组(顺铂,4 mg/kg),各组给予相应药物干预,14 d后记录各组裸鼠体质量及生存状况,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,HE染色观察肿瘤组织细胞形态的变化,免疫组化法和Western blot法检测肿瘤组织Bcl-2、caspase-3、Cyt-C、p53蛋白表达。结果与模型组比较,阳性组与虎蝎化积膏组裸鼠肿瘤生长受到抑制,肿癌组织Bcl-2蛋白表达降低,Cyt-C、p53、caspase-3蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),虎蝎化积膏组裸鼠血清TNFα、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论虎蝎化积膏能抑制裸鼠HepG2细胞移植性肿瘤生长,其机制可能与降低血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,升高Cyt-C、p53、caspase-3蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,进而诱导肝癌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 虎蝎化积膏 肝癌 hepg2细胞 凋亡
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