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苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1致裸小鼠原位肺癌模型的构建及血清人源神经纤维网蛋白2对该模型的诊断价值
1
作者
邢云昆
马雪
+3 位作者
姚碧云
付娟玲
赵鹏
祁妍敏
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2023年第11期853-860,共8页
目的建立苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)的裸小鼠原位肺癌模型,评估血清人源神经纤维网蛋白2(NRP2)对该模型的诊断价值。方法12只雄性ICR小鼠随机分为3组,右肺分别一次性注射无菌生理盐水20,30和40μL,观察1...
目的建立苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)的裸小鼠原位肺癌模型,评估血清人源神经纤维网蛋白2(NRP2)对该模型的诊断价值。方法12只雄性ICR小鼠随机分为3组,右肺分别一次性注射无菌生理盐水20,30和40μL,观察14 d内小鼠死亡数,以确定小鼠肺内注射安全体积。16只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机分为4组:对照组[皮下和肺内同时一次性接种人支气管上皮16HBE(HBE)细胞,皮下1×10^(6),肺内2×10^(5)]、皮下荷瘤模型组(皮下一次性接种THBEc1细胞1×10^(6))、原位肺癌模型组(肺内一次性接种THBEc1细胞2×10^(5)或5×10^(5))。接种后每7 d监测小鼠体重和皮下肿瘤体积;HE染色检测肺肿瘤和皮下肿瘤组织病理特征,计算成瘤率;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测裸小鼠血清和胸水中人源NRP2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线确定血清人源NRP2对THBEc1细胞导致的裸小鼠原位肺癌模型的诊断价值。结果肺内注射40μL无菌生理盐水可致2/4小鼠死亡,20和30μL组未见小鼠死亡,但整体表现欠佳,故后续实验注射体积选择20μL。对照组裸小鼠均未在接种部位检出肿瘤,小鼠体重持续增长;皮下荷瘤模型组祼小鼠全部成瘤,体重显著低于对照组(P<0.05)。接种细胞后第10天,原位肺癌模型5×10^(5)细胞组裸小鼠全部成瘤(4/4);第14天,原位肺癌模型2×10^(5)细胞组裸小鼠3/4成瘤,且2个剂量组小鼠体重均低于对照组(P<0.01,P<0.05),肿瘤组织均呈鳞状细胞癌特征。ELISA结果显示,对照组裸小鼠血清人源NRP2水平均显著低于皮下荷瘤模型(4只)和原位肺癌模型(7只)裸小鼠(P<0.05)。原位肺癌模型组(4只)裸小鼠胸水中均可检出高水平的人源NRP2。ROC曲线显示,血清人源NRP2水平能有效区分THBEc1细胞在裸小鼠肺内是否成瘤,最佳截断值为123.00 ng·L^(-1)。结论通过肺内注射接种THBEc1细胞建立了裸小鼠原位肺癌模型,血清人源NRP2可用于该模型诊断。
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关键词
原位肺癌模型
BALB/c-nu裸小鼠
神经纤维网蛋白2
THBEc1细胞
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职称材料
天门冬汤敷贴通过IL-1β/STAT3信号通路调控髓源抑制性细胞抑制小鼠肺癌的机制研究
2
作者
梁馨月
苏琳
+5 位作者
李伟
朱杨壮壮
阎学伟
祝晓雯
胥孜杭
邹纯朴
《辽宁中医杂志》
北大核心
2025年第3期194-198,F0003,共6页
目的研究天门冬汤敷贴(以下均称TD敷贴)对肺癌原位模型小鼠的治疗作用及作用机制。方法依据课题组前期构建的小鼠肺癌原位模型方法,在小鼠左侧肺叶内注射荧光素酶标记的小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC-luc)建立小鼠肺癌原...
目的研究天门冬汤敷贴(以下均称TD敷贴)对肺癌原位模型小鼠的治疗作用及作用机制。方法依据课题组前期构建的小鼠肺癌原位模型方法,在小鼠左侧肺叶内注射荧光素酶标记的小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC-luc)建立小鼠肺癌原位模型。将造模小鼠随机分为对照组、TD敷贴组;分别在小鼠背部以肺俞穴为中心,0.5 cm×0.5 cm为范围贴敷敷贴,对照组贴敷空白敷贴,TD敷贴组贴敷含药敷贴,每日更换敷贴,连续治疗25 d。观察小鼠体征,记录小鼠体质量及生存期。流式细胞术检测小鼠肿瘤内主要免疫细胞的变化。通过网络药理学预测天门冬汤药物作用于髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的潜在靶点。实时荧光定量聚合酶链式反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)检测小鼠白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、信号转导和转录活化因子3(signal transduction and transcription activator 3,STAT3)、精氨酸酶(arginase 1,Arg1)、一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)基因表达。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测小鼠Arg1、iNOS、S100A9、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果TD敷贴治疗可延长肺癌小鼠生存期(P<0.05);TD敷贴对小鼠体质量无直接影响(P>0.05);TD敷贴治疗后肺癌小鼠肿瘤中MDSCs显著降低(P<0.001),T细胞数量增加(P<0.05),其余免疫细胞如自然杀伤细胞、巨噬细胞、树突状细胞、调节性T细胞无明显变化(P>0.05)。网络药理学预测天门冬汤药物靶点通过IL-1β靶向MDSCs发挥作用。TD敷贴治疗后与MDSCs活化相关的Arg1、iNOS、S100A9 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);IL-1β、STAT3 mRNA表达降低(P<0.01);STAT3、p-STAT3及MDSCs活化相关的Arg1、iNOS、S100A9蛋白表达下调(P<0.05)。结论天门冬汤敷贴通过IL-1β/STAT3信号通路抑制MDSCs的增殖与活化从而延长肺癌荷瘤小鼠的生存期。
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关键词
天门冬汤
敷贴
髓源抑制性细胞
肺癌
原位
模型
肿瘤外治
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职称材料
题名
苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1致裸小鼠原位肺癌模型的构建及血清人源神经纤维网蛋白2对该模型的诊断价值
1
作者
邢云昆
马雪
姚碧云
付娟玲
赵鹏
祁妍敏
机构
北京大学公共卫生学院毒理学系
中国民用航空局民用航空医学中心
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2023年第11期853-860,共8页
基金
国家自然科学基金(81370079)
国家自然科学基金(81001253)
北京市自然科学基金(7132122)。
文摘
目的建立苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)的裸小鼠原位肺癌模型,评估血清人源神经纤维网蛋白2(NRP2)对该模型的诊断价值。方法12只雄性ICR小鼠随机分为3组,右肺分别一次性注射无菌生理盐水20,30和40μL,观察14 d内小鼠死亡数,以确定小鼠肺内注射安全体积。16只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机分为4组:对照组[皮下和肺内同时一次性接种人支气管上皮16HBE(HBE)细胞,皮下1×10^(6),肺内2×10^(5)]、皮下荷瘤模型组(皮下一次性接种THBEc1细胞1×10^(6))、原位肺癌模型组(肺内一次性接种THBEc1细胞2×10^(5)或5×10^(5))。接种后每7 d监测小鼠体重和皮下肿瘤体积;HE染色检测肺肿瘤和皮下肿瘤组织病理特征,计算成瘤率;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测裸小鼠血清和胸水中人源NRP2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线确定血清人源NRP2对THBEc1细胞导致的裸小鼠原位肺癌模型的诊断价值。结果肺内注射40μL无菌生理盐水可致2/4小鼠死亡,20和30μL组未见小鼠死亡,但整体表现欠佳,故后续实验注射体积选择20μL。对照组裸小鼠均未在接种部位检出肿瘤,小鼠体重持续增长;皮下荷瘤模型组祼小鼠全部成瘤,体重显著低于对照组(P<0.05)。接种细胞后第10天,原位肺癌模型5×10^(5)细胞组裸小鼠全部成瘤(4/4);第14天,原位肺癌模型2×10^(5)细胞组裸小鼠3/4成瘤,且2个剂量组小鼠体重均低于对照组(P<0.01,P<0.05),肿瘤组织均呈鳞状细胞癌特征。ELISA结果显示,对照组裸小鼠血清人源NRP2水平均显著低于皮下荷瘤模型(4只)和原位肺癌模型(7只)裸小鼠(P<0.05)。原位肺癌模型组(4只)裸小鼠胸水中均可检出高水平的人源NRP2。ROC曲线显示,血清人源NRP2水平能有效区分THBEc1细胞在裸小鼠肺内是否成瘤,最佳截断值为123.00 ng·L^(-1)。结论通过肺内注射接种THBEc1细胞建立了裸小鼠原位肺癌模型,血清人源NRP2可用于该模型诊断。
关键词
原位肺癌模型
BALB/c-nu裸小鼠
神经纤维网蛋白2
THBEc1细胞
Keywords
orthotopic lung cancer model
BALB/c-nu nude mouse
neuropilin-2
THBEc1 cells
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
天门冬汤敷贴通过IL-1β/STAT3信号通路调控髓源抑制性细胞抑制小鼠肺癌的机制研究
2
作者
梁馨月
苏琳
李伟
朱杨壮壮
阎学伟
祝晓雯
胥孜杭
邹纯朴
机构
上海中医药大学中医学院
上海市皮肤病医院
出处
《辽宁中医杂志》
北大核心
2025年第3期194-198,F0003,共6页
基金
国家自然科学基金项目(82274229)
上海市青年科技启明星项目(23QA1409100)
上海中医药大学杏林青年学者人才计划项目(B1-GY21-409-04-37)。
文摘
目的研究天门冬汤敷贴(以下均称TD敷贴)对肺癌原位模型小鼠的治疗作用及作用机制。方法依据课题组前期构建的小鼠肺癌原位模型方法,在小鼠左侧肺叶内注射荧光素酶标记的小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC-luc)建立小鼠肺癌原位模型。将造模小鼠随机分为对照组、TD敷贴组;分别在小鼠背部以肺俞穴为中心,0.5 cm×0.5 cm为范围贴敷敷贴,对照组贴敷空白敷贴,TD敷贴组贴敷含药敷贴,每日更换敷贴,连续治疗25 d。观察小鼠体征,记录小鼠体质量及生存期。流式细胞术检测小鼠肿瘤内主要免疫细胞的变化。通过网络药理学预测天门冬汤药物作用于髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的潜在靶点。实时荧光定量聚合酶链式反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)检测小鼠白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、信号转导和转录活化因子3(signal transduction and transcription activator 3,STAT3)、精氨酸酶(arginase 1,Arg1)、一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)基因表达。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测小鼠Arg1、iNOS、S100A9、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果TD敷贴治疗可延长肺癌小鼠生存期(P<0.05);TD敷贴对小鼠体质量无直接影响(P>0.05);TD敷贴治疗后肺癌小鼠肿瘤中MDSCs显著降低(P<0.001),T细胞数量增加(P<0.05),其余免疫细胞如自然杀伤细胞、巨噬细胞、树突状细胞、调节性T细胞无明显变化(P>0.05)。网络药理学预测天门冬汤药物靶点通过IL-1β靶向MDSCs发挥作用。TD敷贴治疗后与MDSCs活化相关的Arg1、iNOS、S100A9 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);IL-1β、STAT3 mRNA表达降低(P<0.01);STAT3、p-STAT3及MDSCs活化相关的Arg1、iNOS、S100A9蛋白表达下调(P<0.05)。结论天门冬汤敷贴通过IL-1β/STAT3信号通路抑制MDSCs的增殖与活化从而延长肺癌荷瘤小鼠的生存期。
关键词
天门冬汤
敷贴
髓源抑制性细胞
肺癌
原位
模型
肿瘤外治
Keywords
Tianmendong Decoction(天门冬汤)
application
myeloid suppressor cells
lung cancer in situ model
external treatment of tumor
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1致裸小鼠原位肺癌模型的构建及血清人源神经纤维网蛋白2对该模型的诊断价值
邢云昆
马雪
姚碧云
付娟玲
赵鹏
祁妍敏
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2023
0
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2
天门冬汤敷贴通过IL-1β/STAT3信号通路调控髓源抑制性细胞抑制小鼠肺癌的机制研究
梁馨月
苏琳
李伟
朱杨壮壮
阎学伟
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胥孜杭
邹纯朴
《辽宁中医杂志》
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