电镜核酸分子原位杂交技术的探索

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作者 焦仁杰 于文斗 +1 位作者 丁明孝 翟中和 《电子显微学报》 CAS CSCD 1990年第3期111-111,共1页

显微水平的核酸分子原位杂交技术已广泛地应用于基因在染色体上的定位,发育过程中的基因表达等方面,但电镜水平的原位杂交技术却仍在探索之中,主要因为剧烈的核酸分子杂交条件与样品精细结构的保存之间存在着矛盾,为此,我们分别在分级... 显微水平的核酸分子原位杂交技术已广泛地应用于基因在染色体上的定位,发育过程中的基因表达等方面,但电镜水平的原位杂交技术却仍在探索之中,主要因为剧烈的核酸分子杂交条件与样品精细结构的保存之间存在着矛盾,为此,我们分别在分级抽提的整装细胞,L-K_4包埋或Epon812包埋的超薄切片样品以及DGD包埋-去包埋样品中对进行电镜分子原位杂交研究的可行性和杂交条件进行了一些探索,目前在整装细胞样品中已取得初步的结果。 展开更多

关键词 核酸分子 原位杂交技术 电镜

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白细胞核酸分子原位杂交技术的建立

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作者 申庆红 朱金风 +2 位作者 寇平原 王滨 买凯 《河南医科大学学报》 1989年第3期253-255,共3页

近年来,国内外不少学者利用斑点杂交和墨迹杂交法证实白细胞内存在HBV-DNA,用原位杂交技术研究白细胞内HBV-DNA存在状态尚未见报道。我们近二年来开展了此项研究,获得了初步结果。现报告如下: 材料慢性HBV感染经斑点杂交证实白细胞HBV-... 近年来,国内外不少学者利用斑点杂交和墨迹杂交法证实白细胞内存在HBV-DNA,用原位杂交技术研究白细胞内HBV-DNA存在状态尚未见报道。我们近二年来开展了此项研究,获得了初步结果。现报告如下: 材料慢性HBV感染经斑点杂交证实白细胞HBV-DNA阳性的患者。 展开更多

关键词 白细胞 核酸分子 杂交技术

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原位分子杂交技术的几点体会 被引量：3

3

作者 张新华 黄进 钱源澄 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期339-339,共1页

非同位素标记探针应用于原位分子杂交,虽取得了很大进展,但因其操作步骤较多,时间较长等因素,仍存在一些问题有待克服。以下介绍我们在实际操作中得到的一点初步体会。 1 减少或避免组织掉片的方法 除非蛋白性防脱片胶外,还需注意以下几... 非同位素标记探针应用于原位分子杂交,虽取得了很大进展,但因其操作步骤较多,时间较长等因素,仍存在一些问题有待克服。以下介绍我们在实际操作中得到的一点初步体会。 1 减少或避免组织掉片的方法 除非蛋白性防脱片胶外,还需注意以下几点:(1)载玻片一定要干净。 展开更多

关键词 原位分子杂交 技术

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核酸杂交技术及其在分子病理学研究中的应用 被引量：1

4

作者 刘纯杰 李普霖 《吉林畜牧兽医》 1992年第5期32-36,共5页

核酸杂交技术最初是在1961年建立的。Hall等利用核酸能变性与复性的原理使核酸探针与靶序列在液相中杂交,然后通过平衡密度梯度离心分离到杂交体建立了核酸杂交技术。随后,于1962年Bautz等将糖苷化DNA吸附在硝化纤维素柱上,Bolton等将... 核酸杂交技术最初是在1961年建立的。Hall等利用核酸能变性与复性的原理使核酸探针与靶序列在液相中杂交,然后通过平衡密度梯度离心分离到杂交体建立了核酸杂交技术。随后,于1962年Bautz等将糖苷化DNA吸附在硝化纤维素柱上,Bolton等将变性的单链DNA固定在琼脂中。 展开更多

关键词 核酸杂交技术 分子病理学

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荧光原位杂交技术在人参属药用植物研究中的应用 被引量：1

5

作者 梁韶 雷秀娟 +5 位作者 宋娟 姚丽娜 侯志芳 郑惠元 商丽煌 王英平 《特产研究》 2017年第2期63-66,共4页

荧光原位杂交技术在研究基因定位、染色体结构变异、起源进化以及物种间亲缘关系等方面具有重要作用。本文简要介绍了荧光原位杂交技术中靶DNA制片、探针种类和标记方法,对目前该技术在人参属药用植物研究中的应用进行了综述。

关键词 荧光原位杂交技术 人参属药用植物 染色体 脱氧核糖核酸

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弓形虫病分子诊断技术研究进展 被引量：5

6

作者 任庆娥 周春香 +2 位作者 菅复春 冯超 张龙现 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第5期66-71,共6页

弓形虫病是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,严重危害人类健康并给世界各国的畜牧业造成巨大的经济损失,但弓形虫病缺乏特异性临床症状,给该病的诊断带来很大困难。分子诊断技术的迅速发展为弓形虫病的诊断提供了快速、灵敏、特异... 弓形虫病是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,严重危害人类健康并给世界各国的畜牧业造成巨大的经济损失,但弓形虫病缺乏特异性临床症状,给该病的诊断带来很大困难。分子诊断技术的迅速发展为弓形虫病的诊断提供了快速、灵敏、特异及稳定的检测方法。笔者从核酸分子杂交技术、聚合酶链反应(PCR)、单克隆抗体(McAb)技术及生物芯片技术几个方面介绍了用于诊断弓形虫病的分子诊断技术的研究进展。 展开更多

关键词 弓形虫 核酸分子杂交技术 PCR McAb技术 基因芯片

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利用FISH技术检测多发性骨髓瘤不同类型标本分子细胞遗传学异常 被引量：7

7

作者 王艳芳 王化 +4 位作者 郤连永 刘彦 董菲 王继军 克晓燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1352-1356,共5页

目的:应用荧光原位杂交(FISH)技术,以骨髓细胞涂片和骨髓活检病理组织为标本,检测多发性骨髓瘤(MM)患者分子细胞遗传学异常情况。方法:在确诊的58例初发MM患者中对48例患者取骨髓细胞进行CD138磁珠分选浆细胞后滴片、10例取骨髓制成病... 目的:应用荧光原位杂交(FISH)技术,以骨髓细胞涂片和骨髓活检病理组织为标本,检测多发性骨髓瘤(MM)患者分子细胞遗传学异常情况。方法:在确诊的58例初发MM患者中对48例患者取骨髓细胞进行CD138磁珠分选浆细胞后滴片、10例取骨髓制成病理组织石蜡切片,采用多个探针(d13s319、RB1、p53、1q21、IgH、IgH/FGFR3、IgH/MAF)对两种不同类型标本进行FISH检测。结果:对骨髓细胞和病理组织两种标本进行FISH检测后都出现可供分析的荧光信号,58例MM患者中,有30例检测出分子遗传学异常,总检出率为51.7%(30/58),其中d13s319缺失17例(占29.3),RB1缺失17例(占29.3),P53缺失7例(占12%),1q21扩增16例(占27.6%),IgH重排12例(20.7%),对IgH重排患者进一步检测发现IgH/FGFR3融合6例(占10.3%),IgH/MAF融合1例(占1.7%)。在这30例遗传学异常患者中,仅有7例患者检出1种异常,占23.3%(7/30),其余23例患者均具有2-5种遗传学异常,占76.7%(23/30)。结论:半数以上MM患者都存在染色体改变,而且大部分均为复杂畸变,利用不同类型标本进行FISH检测,可以扩大FISH的应用范围,为MM预后判断提供更多的分子细胞遗传学信息。 展开更多

关键词 荧光原位杂交技术 多发性骨髓瘤 分子细胞遗传学异常

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分子生物学技术在马铃薯病毒检测中的应用 被引量：13

8

作者 吴兴泉 陈士华 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《中国马铃薯》 2003年第3期175-179,共5页

直接应用于马铃薯病毒检测的分子生物学技术主要有 :RT PCR检测技术、指示分子 NASBA检测技术、核酸杂交检测技术三大类 ,以RT PCR技术应用最为广泛。另外病毒外壳蛋白基因的克隆与表达、DNA介导的抗体制备及病毒单链抗体片段筛选等技... 直接应用于马铃薯病毒检测的分子生物学技术主要有 :RT PCR检测技术、指示分子 NASBA检测技术、核酸杂交检测技术三大类 ,以RT PCR技术应用最为广泛。另外病毒外壳蛋白基因的克隆与表达、DNA介导的抗体制备及病毒单链抗体片段筛选等技术在马铃薯病毒免疫学检测技术中也有成功的应用 ,并解决了传统免疫学方法难以解决的抗原制备问题 ,使后者更具应用前景。 展开更多

关键词 分子生物学技术 马铃薯 病毒检测 应用 RT-PCR 核酸杂交 指示分子-NASBA

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马铃薯病毒病分子检测技术研究进展 被引量：7

9

作者 袁青 殷幼平 王中康 《中国马铃薯》 2003年第1期33-36,共4页

快速、准确地定性或定量检测马铃薯植株中病毒、类病毒的种类和数量是有效地控制马铃薯病毒病害的需要 ,也是马铃薯种薯品质的重要保证。

关键词 病毒病 分子检测技术 马铃薯 病毒 RT-PCR 核酸斑点杂交技术 聚合酶链式反应

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核酸检测技术在水产养殖病原诊断中的应用 被引量：2

10

作者 范文辉 黄倢 包振民 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第3期21-25,共5页

目前核酸检测技术在水产养殖疾病诊断中已广泛应用。现就国内外研究发展动向,对分子杂交技术、PCR技术、PCR分子杂交联用技术、PCR免疫学联用技术、16SrRNA技术和限制性酶切技术等方法进行综述,详细阐明了各个技术的原理、特点及应用。... 目前核酸检测技术在水产养殖疾病诊断中已广泛应用。现就国内外研究发展动向,对分子杂交技术、PCR技术、PCR分子杂交联用技术、PCR免疫学联用技术、16SrRNA技术和限制性酶切技术等方法进行综述,详细阐明了各个技术的原理、特点及应用。病原体遗传背景的研究状况为决定是否应用这些方法的关键。 展开更多

关键词 核酸检测技术 水产养殖动物 病原诊断 分子杂交技术 PCR技术 16SrRNA技术 限制性酶切技术

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手工制作组织芯片在HPV原位杂交中的应用与体会 被引量：2

11

作者 黄卡特 杨开颜 张虎祥 《实用医学杂志》 CAS 2007年第6期932-932,共1页

组织芯片亦称组织微阵列是近年发展起来的以形态学为基础的分子生物学新技术。其具有高通量、可比性强等优点．在实验研究过程中得到一定范围的应用。由于组织阵列仪价格昂贵，限制了组织芯片在临床广泛应用。在实践常规病理工作中。我... 组织芯片亦称组织微阵列是近年发展起来的以形态学为基础的分子生物学新技术。其具有高通量、可比性强等优点．在实验研究过程中得到一定范围的应用。由于组织阵列仪价格昂贵，限制了组织芯片在临床广泛应用。在实践常规病理工作中。我们在无芯片制作仪情况下．利用组织芯片技术原理反复多次摸索．得到了一种简易可行的手工制作方法．并用于本科室开展最多的HPV原位杂交实验上取得了满意的效果，现介绍体会如下。 展开更多

关键词 组织芯片技术 HPV原位杂交 手工制作 实验研究 分子生物学 组织微阵列 病理工作 形态学

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家禽传染病的现代分子生物学诊断技术 被引量：1

12

作者 刘新平 《中国家禽》 北大核心 2005年第24期40-41,共2页

关键词 现代分子生物学技术 家禽传染病 诊断技术 限制性片段长度多态性分析 聚合酶链式反应 核苷酸序列分析 分子生物技术 核酸杂交技术 诊断方法 基因芯片

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原位杂交法检测太行山猕猴食管癌的人乳头瘤病毒

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作者 赵进英 常福聚 +3 位作者 祝庆蕃 朱东明 仉怀林 张红绪 《中国比较医学杂志》 CAS 1991年第2期68-68,共1页

乳头瘤病毒(简称PV)是一组DNA致瘤病毒,可感染人和高等动物的鳞状上皮,引起疣状增生性病变。运用分子生物学技术,目前已发现人类许多器官发生人乳头瘤病毒(简称HPV)感染。周健等用分子杂交技术证实了人食管是HPV感染的多发部位之一,并... 乳头瘤病毒(简称PV)是一组DNA致瘤病毒,可感染人和高等动物的鳞状上皮,引起疣状增生性病变。运用分子生物学技术,目前已发现人类许多器官发生人乳头瘤病毒(简称HPV)感染。周健等用分子杂交技术证实了人食管是HPV感染的多发部位之一,并在食管癌高发区的人食管癌标本中检测到HPV。最近,在食管癌高发区太行山生长的太行山猕猴发现两例自发性食管癌。猕猴的食管癌是否也与HPV感染有关,国内外尚未见报道。我们用人乳头瘤病毒探针对这两例太行山猕猴自发食管鳞状细胞癌标本进行了检测。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 原位杂交法 分子杂交技术 致瘤病毒 增生性病变 DNA 食管鳞状细胞癌 阳性病例 疣状 器官发生

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分子生物技术在厌氧氨氧化工艺研究中的应用 被引量：8

14

作者 户海燕 瞿思宜 +2 位作者 张正哲 施曼玲 金仁村 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期20-26,43,共8页

厌氧氨氧化(anaerobic ammonium oxidation,anammox)工艺是一种高效低耗的新型废水生物脱氮工艺,具有广阔的应用前景。但迄今为止该工艺的主要承载者厌氧氨氧化菌未获得纯培物,因此传统的微生物学方法不足以研究其生物学特性。分子生物... 厌氧氨氧化(anaerobic ammonium oxidation,anammox)工艺是一种高效低耗的新型废水生物脱氮工艺,具有广阔的应用前景。但迄今为止该工艺的主要承载者厌氧氨氧化菌未获得纯培物,因此传统的微生物学方法不足以研究其生物学特性。分子生物技术的发展改变了传统的微生物学研究方法,其中,变性梯度凝胶电泳(DGGE)、荧光原位杂交(FISH)、实时荧光定量PCR(q PCR)、高通量测序和基因芯片技术脱颖而出。文章重点介绍了这些技术在氧氨氧化工艺研究中的应用,以及其主要的优点和缺点。将分子生物技术应用到厌氧氨氧化工艺研究中,对于全面认识厌氧氨氧化菌的性质、解析厌氧氨氧化工艺的微生物学机理、确保工艺的长期高效稳定运行具有重要意义。 展开更多

关键词 厌氧氨氧化工艺 分子生物技术 荧光原位杂交 实时荧光定量PCR 高通量测序 基因芯片

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分子生物学新技术在疫苗生产和疫病诊断中的应用

15

作者 程泽华 《养殖技术顾问》 2003年第9期44-45,共2页

关键词 分子生物学技术 疫苗生产 疫病诊断 应用 基因工程疫苗 PCR RT-PCR 基因芯片 荧光原位杂交技术

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分子生物学技术在水产领域的应用 被引量：3

16

作者 魏爱泓 徐虹 《水产养殖》 CAS 2000年第6期36-38,共3页

关键词 分子生物学技术 水产业 应用 核酸杂交技术

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应用分子生物学方法检测植原体研究进展 被引量：7

17

作者 蔡红 杨根华 +1 位作者 孔宝华 陈海如 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期188-191,共4页

从血清学、核酸杂交技术以及PCR技术等方面综述了国内外植原体检测研究的概况及最新进展。

关键词 应用 分子生物学 检测 植原体 血清学 核酸杂交技术 PCR

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体外培养中川芎嗪对大鼠血管平滑肌细胞血管细胞粘附分子-1表达的影响 被引量：4

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作者 朱敏 阮秋蓉 +3 位作者 朱大和 任新瑜 瞿智玲 路军 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期122-124,128,239,共5页

目的　观察川芎嗪对血管平滑肌细胞 (VSMC)表达血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)的影响。方法　在建立血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的VSMC表达粘附分子模型的基础上 ,将培养的细胞分为 3组 :正常对照组、AngⅡ刺激组、川芎嗪治疗组。分别在 6、... 目的　观察川芎嗪对血管平滑肌细胞 (VSMC)表达血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)的影响。方法　在建立血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的VSMC表达粘附分子模型的基础上 ,将培养的细胞分为 3组 :正常对照组、AngⅡ刺激组、川芎嗪治疗组。分别在 6、 12、 2 4h 3个时段 ,利用免疫细胞化学技术和原位杂交技术检测各组细胞中VCAM 1的蛋白表达及mRNA转录水平。结果　①各时段正常对照组即有VCAM 1的基础表达 ;②与正常对照组比较 ,AngⅡ能够明显诱导VCAM 1的表达 ,而且其诱导作用在 6h即已出现 (P <0 0 5 ) ,12h表达增强 (P <0 0 1) ,2 4h有所回降 (P <0 0 5 ) ;③川芎嗪在各个时段均能抑制VCAM 1蛋白和mRNA的转录水平 (P <0 0 5 )。结论　AngⅡ能够明显诱导VSMC中VCAM 1的表达 ,而川芎嗪能够通过抑制VSMC中VCAM 展开更多

关键词 体外培养 川芎嗪 大鼠 血管平滑肌细胞 细胞粘附分子-1 免疫细胞化学技术 原位杂交技术

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黄花苜蓿和紫花苜蓿分子核型比较 被引量：5

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作者 窦全文 雷云霆 王海庆 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期718-723,共6页

黄花苜蓿(Medicago falcata L.2n=32)是一种重要的野生豆科牧草,由于其突出的抗逆特性,被认为是用来进行苜蓿改良的优异遗传资源。本研究利用染色体荧光原位杂交技术(FISH),以不同荧光物标记的3种重复序列(5SrDNA,45SrDNA和C0t-1DNA),... 黄花苜蓿(Medicago falcata L.2n=32)是一种重要的野生豆科牧草,由于其突出的抗逆特性,被认为是用来进行苜蓿改良的优异遗传资源。本研究利用染色体荧光原位杂交技术(FISH),以不同荧光物标记的3种重复序列(5SrDNA,45SrDNA和C0t-1DNA),对黄花苜蓿和和紫花苜蓿(Medicago sativa L.2n=32)染色体进行了FISH分析和分子核型比较,以期在染色体水平上揭示二者之间的亲缘关系。结果表明:利用上述重复序列可以较好的将苜蓿32条染色体区分为16对特征不同的染色体。黄花苜蓿和紫花苜蓿绝大多数染色体FISH杂交特征表现一致或高度相似性,分子核型无显著区别,因此二者间在遗传上具有高度的相似性。 展开更多

关键词 黄花苜蓿 紫花苜蓿 分子核型 染色体荧光原位杂交技术

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PCR和核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究 被引量：15

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作者 代敏 王红宁 吴琦 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期482-485,共4页

对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%,对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率。用光... 对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%,对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率。用光生物素对PCR产物进行标记,制备核酸探针,采用菌落原位杂交的方法对沙门氏菌进行检测,结果表明13株阳性、3株阴性,杂交结果与PCR结果阳性符合率为93.75%,具有较高的特异性。通过条件的优化,建立的四环素耐药基因tetC的PCR和核酸探针检测技术,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。 展开更多

关键词 沙门氏菌 TETC 耐药基因 核酸探针 PCR 四环素类抗生素 流行病学监测 PCR产物 耐药性 试验结果 原位杂交 检测技术 特异性 符合率 猪 耐药率 阳性 检出率 生物素 药敏

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