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禽腺病毒4型感染原代鸡胚心脏成纤维细胞引起细胞凋亡及炎症反应的研究
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作者 张永康 韩帅博 +7 位作者 张爱琼 朱二鹏 冯孝傲 王乃秀 杜毛 郑爽 程振涛 刘江 《贵州畜牧兽医》 2025年第2期63-67,共5页
为了解禽腺病毒4型(FAdV-4)感染与心脏细胞损伤等病理现象的关系,试验以原代鸡胚心脏成纤维细胞(CF)为研究对象,构建FAdV-4感染CF细胞模型,通过TUNEL染色检测FAdV-4感染细胞后24、48、72 h的凋亡阳性细胞比,并通过qRT-PCR分别检测Caspas... 为了解禽腺病毒4型(FAdV-4)感染与心脏细胞损伤等病理现象的关系,试验以原代鸡胚心脏成纤维细胞(CF)为研究对象,构建FAdV-4感染CF细胞模型,通过TUNEL染色检测FAdV-4感染细胞后24、48、72 h的凋亡阳性细胞比,并通过qRT-PCR分别检测Caspase-3、Bax细胞凋亡基因以及炎症细胞因子IL-1β和TNF-α在24、48、72 h的转录水平。结果:FAdV-4感染细胞的凋亡率、阳性细胞百分比,以及促炎症因子IL-1β mRNA、TNF-α mRNA转录水平均高于正常CF细胞。结论:FAdV-4感染可促进CF细胞凋亡并产生炎症反应。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 原代鸡胚心脏成纤维细胞 细胞凋亡 炎症反应
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Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞
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作者 姚梓淇 廖立钦 +2 位作者 宋佳蓓 张新珩 谢青梅 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期311-320,共10页
【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增... 【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增,并与慢病毒载体重组为慢病毒质粒,在包装慢病毒并测定相对应的病毒滴度后,分组感染鸡胚成纤维细胞,在诱导的过程中对干细胞标记物进行检测。【结果】利用传统的重编程因子组合与加入Pcgf2共同诱导后的细胞都较早地表达出磷酸酶活性。加入Pcgf2诱导多能干细胞可以使细胞更早地出现类干细胞形态,且内源性基因Oct4、Sox2、Nanog和Lin28的表达得到更稳定的提高。【结论】Pcgf2在加入诱导体系后可以有效提高细胞的重编程接近干细胞状态。该研究可为选择重编程因子诱导鸡细胞完全重编程及其机制研究提供理论参考。 展开更多
关键词 慢病毒 多能转录因子 纤维细胞 细胞重编程 诱导多能干细胞
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鸡胚成纤维细胞原代培养及应用 被引量:16
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作者 朱国坡 周晓丽 +5 位作者 郭延锋 李瑞芳 高均伟 陈仕均 王丽荣 刘兴友 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期112-114,共3页
原代培养是指在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的组织细胞生存、生长和传代,并维持原有组织细胞的结构和功能特性。鸡胚成纤维细胞具有相对容易获得、增殖能力强、适应性强、良好的耐受性、性状比较稳定等特点,使得其被广泛地应用... 原代培养是指在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的组织细胞生存、生长和传代,并维持原有组织细胞的结构和功能特性。鸡胚成纤维细胞具有相对容易获得、增殖能力强、适应性强、良好的耐受性、性状比较稳定等特点,使得其被广泛地应用于分子和细胞生物学研究的许多方面。论文综述了近年来有关鸡胚成纤维细胞的培养技术,如鸡胚的取材、细胞的分离、纯化和培养,同时介绍了应用进展和未来研究方向。 展开更多
关键词 纤维细胞 原代培养 分离 纯化
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鸡胚成纤维细胞原代培养与纯化的初探 被引量:11
4
作者 刘永清 孙浩 《国外畜牧学(猪与禽)》 2008年第1期72-74,共3页
本文利用鸡胚成纤维细胞(CEF)进行原代培养与纯化,了解鸡胚成纤维细胞在一定生理状态下所需的各种条件,从而控制培养基的成分,选择最适合于鸡胚成纤维细胞生长的各种因素。在此实验中消化液的浓度及消化的时间是关键,此外实验过程的无... 本文利用鸡胚成纤维细胞(CEF)进行原代培养与纯化,了解鸡胚成纤维细胞在一定生理状态下所需的各种条件,从而控制培养基的成分,选择最适合于鸡胚成纤维细胞生长的各种因素。在此实验中消化液的浓度及消化的时间是关键,此外实验过程的无菌也是保证实验成功的重要因素。 展开更多
关键词 纤维细胞 原代培养 纯化
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鸡传染性法氏囊病毒接种鸡胚成纤维细胞工艺优化
5
作者 孙德君 《家禽科学》 2024年第7期31-34,共4页
鸡传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性传染病,主要侵害幼龄鸡。传染性法氏囊病灭活疫苗通常采用强毒接种鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒的培养。本试验采用细胞培养转瓶培养CEF方法接种病毒对转瓶内细胞接种密度、种毒接种量及收获病... 鸡传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性传染病,主要侵害幼龄鸡。传染性法氏囊病灭活疫苗通常采用强毒接种鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒的培养。本试验采用细胞培养转瓶培养CEF方法接种病毒对转瓶内细胞接种密度、种毒接种量及收获病毒时间进行了优化,筛选出传染性法氏囊病毒培养的最佳工艺参数(转瓶),为扩大生产稳定的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 纤维细胞 工艺优化
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北京油鸡胚胎成纤维细胞系建立与生物学特性研究 被引量:23
6
作者 周向梅 马月辉 +2 位作者 关伟军 文杰 李晗 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期209-215,共7页
采取组织块直接培养法,对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养,成功地建立了成纤维细胞系.并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察,以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析.结果表明,该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24 h... 采取组织块直接培养法,对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养,成功地建立了成纤维细胞系.并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察,以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析.结果表明,该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24 h;细胞染色体中二倍体占主体,为76%~88%;乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同工酶电泳图谱与本室其它细胞系有明显差别;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性.该细胞系的建立,使北京油鸡这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来,也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料. 展开更多
关键词 纤维细胞 细胞 乳酸脱氢酶 PDT 细胞染色体 北京油 生物学特性研究 继代培养
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10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响 被引量:18
7
作者 孔祥峰 胡元亮 +3 位作者 刘家国 张宝康 陈玉库 王德云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期84-87,共4页
将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 ... 将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。 展开更多
关键词 纤维细胞 细胞增殖 中药 时效关系 量效关系 免疫增强剂
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几种中药粗提物对鸡胚成纤维细胞生长的影响 被引量:12
8
作者 刘家国 胡元亮 +5 位作者 陈玉库 张宝康 钱建飞 张则斌 李银 唐余华 《江苏农业学报》 CSCD 2002年第4期228-232,共5页
 为筛选抗IBDV方剂的主药,采用组织培养方法,测试了黄芪、连翘等8种中药粗提物在体外鸡胚成纤维细胞(CEF)上的最大安全浓度及其对CEF增殖、存活时间的影响。结果显示,黄芪对CEF基本无毒性作用,最大安全浓度为25mg/ml,而连翘等其余7种...  为筛选抗IBDV方剂的主药,采用组织培养方法,测试了黄芪、连翘等8种中药粗提物在体外鸡胚成纤维细胞(CEF)上的最大安全浓度及其对CEF增殖、存活时间的影响。结果显示,黄芪对CEF基本无毒性作用,最大安全浓度为25mg/ml,而连翘等其余7种中药粗提物则表现出较大的毒性作用,最大安全浓度极低,同时,黄芪对CEF还具有较强的促生长和延长存活时间的作用。因此,筛定黄芪作为抗IBDV方剂的主药。 展开更多
关键词 中药 粗提物 纤维细胞 生长 安全浓度
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8种硫酸化多糖对新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响 被引量:13
9
作者 王君敏 胡元亮 +6 位作者 张帆 王德云 赵晓娜 张靖 刘静 赵彪 郝丽华 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期118-122,共5页
用氯磺酸-吡啶法修饰当归多糖(CAPS)和枸杞多糖(LBPS),得到4种硫酸化当归多糖sCAPS0.6、sCAPS1.1、sCAPS1.9、sCAPS2.2和4种硫酸化枸杞多糖sLBPS0.7、sLBPS1.1、sLBPS1.5和sLBPS1.9。分别以CAPS和LBPS为对照,采用MTT法比较了这8种硫酸... 用氯磺酸-吡啶法修饰当归多糖(CAPS)和枸杞多糖(LBPS),得到4种硫酸化当归多糖sCAPS0.6、sCAPS1.1、sCAPS1.9、sCAPS2.2和4种硫酸化枸杞多糖sLBPS0.7、sLBPS1.1、sLBPS1.5和sLBPS1.9。分别以CAPS和LBPS为对照,采用MTT法比较了这8种硫酸化多糖对新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响。结果表明:硫酸化修饰能显著提高当归多糖和枸杞多糖的抗病毒活性,且与硫酸基取代度有一定的相关性。sCAPS2.2、sLBPS1.5、sCAPS1.9和sLBPS1.9的活性较好,可以作为进一步研究的材料。 展开更多
关键词 硫酸化修饰 当归多糖 枸杞多糖 新城疫病毒 感染细胞能力 纤维细胞
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成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养 被引量:14
10
作者 李如君 龚开政 张振刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期67-71,共5页
目的探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法。方法采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞。波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴... 目的探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法。方法采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞。波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;倒置相差显微镜观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;CCK-8法测定细胞增殖能力、Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后细胞SMAD家族成员2/3(Smad2/3)蛋白及磷酸化水平。结果差速贴壁后在相差显微镜下可见大量球形贴壁细胞;3 d后细胞逐渐由圆形伸展为长梭形并迅速增殖,分裂象多见;5 d后细胞数量显著增多,完全汇合无空隙;细胞生长曲线近似"S"形。波形蛋白阳性率可达95%。CCK-8法显示在第3~5天细胞增殖能力最显著,给予第2代心脏成纤维细胞TGF-β1刺激显示Smad2/3蛋白磷酸化水平明显增加。结论建立了一种快速、经济、有效获取成年小鼠心脏成纤维细胞的方法。 展开更多
关键词 年小鼠 心脏纤维细胞 原代培养 细胞鉴定
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致病性鹅源新城疫病毒对鸡胚成纤维细胞的致病变特性 被引量:6
11
作者 万洪全 卢军 +3 位作者 刘秀梵 陈平 陈素娟 冀德君 《动物医学进展》 CSCD 2004年第5期89-91,共3页
选择4株鹅源新城疫病毒(NDV)接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物,研究鹅源NDV对CEF的致病变特性,并与鸡源及鸽源NDV进行比较。结果显示,鹅源NDV接种次代CEF后24h开始有病变产生,表现为少数细胞变圆、皱缩,折光性增强,随后病变缓慢进展,感染... 选择4株鹅源新城疫病毒(NDV)接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物,研究鹅源NDV对CEF的致病变特性,并与鸡源及鸽源NDV进行比较。结果显示,鹅源NDV接种次代CEF后24h开始有病变产生,表现为少数细胞变圆、皱缩,折光性增强,随后病变缓慢进展,感染细胞形成大量合胞体,到84-144 h时,CEF单层彻底破坏;鸡源和鸽源NDV接种CEF后也在24 h左右开始有病变产生,最初病变与鹅源毒株导致的病变相似,但病变进展迅速,细胞显著裂解并导致单层的严重破坏,60-84 h时细胞单层即彻底破坏。对病毒接种后不同时间段培养物上清血凝(HA)效价的测定结果表明,鹅源NDV接种后84-120h培养物上清HA效价达到高峰,为5-8 log2,鸡源和鸽源NDV接种后60-84 h HA效价即可达到高峰,但其最高效价只有4 log2。 展开更多
关键词 新城疫病毒 纤维细胞 致病变特性
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紫苏叶注射液在鸡胚成纤维细胞体系中安全浓度的测定 被引量:4
12
作者 王定坤 杜智勇 +2 位作者 徐在品 赵伟 王清宇 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第5期146-148,共3页
采用体外细胞培养法,将紫苏叶注射液与鸡胚成纤维细胞(Chick embryo fibroblast,CEF)共同培养,测定紫苏叶注射液在鸡胚成纤维细胞培养体系中的最大安全浓度,检测紫苏叶注射液的细胞毒性。结果表明,紫苏叶注射液对鸡胚成纤维细胞的最大... 采用体外细胞培养法,将紫苏叶注射液与鸡胚成纤维细胞(Chick embryo fibroblast,CEF)共同培养,测定紫苏叶注射液在鸡胚成纤维细胞培养体系中的最大安全浓度,检测紫苏叶注射液的细胞毒性。结果表明,紫苏叶注射液对鸡胚成纤维细胞的最大安全浓度为488.281μg/mL。 展开更多
关键词 紫苏叶注射液 纤维细胞 细胞毒性 安全浓度
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鸡胚成纤维细胞感染IBDV后SOD活性的变化 被引量:13
13
作者 薛春宜 毕英佐 曹永长 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1999年第1期3-5,共3页
鸡胚成纤维细胞(CEFs)用传染性囊病病毒(IBDV)感染后,采用邻苯三酚自氧化法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性。CEFs感染IBDV后8h,细胞SOD活性有所上升。之后,随着时间的延长,细胞SOD活性逐渐下... 鸡胚成纤维细胞(CEFs)用传染性囊病病毒(IBDV)感染后,采用邻苯三酚自氧化法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性。CEFs感染IBDV后8h,细胞SOD活性有所上升。之后,随着时间的延长,细胞SOD活性逐渐下降。试验结果表明,SOD活性降低是CEFs感染IBDV之后发生的重要生化变化,在IBDV诱导细胞凋亡的过程中可能起关键作用。 展开更多
关键词 传染性囊病病毒 纤维细胞 SOD
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16种四川道地药材对鸡胚成纤维细胞生长的影响 被引量:3
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作者 封海波 刘娟 +5 位作者 曾宪垠 赵冰 唐静 王振华 杜林林 吕雪 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期6-11,共6页
该实验通过MTT法观察丹参、川木香、菊花、川郁金、川黄柏、川佛手、川牛膝、川莪术、川明参、川续断、川麦冬、川白芷、川芎、杜仲、川党参和乌梅等16种四川产道地药材对体外培养的鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全体积质量分数,并观察各种... 该实验通过MTT法观察丹参、川木香、菊花、川郁金、川黄柏、川佛手、川牛膝、川莪术、川明参、川续断、川麦冬、川白芷、川芎、杜仲、川党参和乌梅等16种四川产道地药材对体外培养的鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全体积质量分数,并观察各种中药提取液对CEF增殖的影响.结果表明以上各种药材的最大安全体积质量分数:川黄柏为3.907mg/L,丹参、川木香、川续断和川党参均为7.813mg/L,菊花为15.625mg/L,杜仲、川佛手、川麦冬、川芎和白芷均为31.25mg/L,川郁金、杜仲、川乌梅和川牛膝均为62.5mg/L,川明参为1 000mg/L.当川郁金在1.954~31.25mg/L,川牛膝在3.907~31.25mg/L,川明参在1.954~500mg/L,川续断在1.954~3.907mg/L,川麦冬在1.954~15.625mg/L,杜仲在1.954~31.25mg/L的体积质量分数范围内可显著促进细胞生长. 展开更多
关键词 四川道地药材 纤维细胞 细胞增殖 安全体积质量分数
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鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定 被引量:3
15
作者 张改平 朱礼倩 +6 位作者 杨艳艳 赵绪永 乔松林 张红 王丽 李清州 王选年 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期216-219,共4页
为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin col... 为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小。构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%。从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。 展开更多
关键词 纤维细胞 CDNA表达文库 传染性法氏囊病毒受体
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siRNA对鸡胚成纤维细胞中GAPDH基因表达的抑制作用 被引量:4
16
作者 陈学辉 孟和 +1 位作者 潘玉春 崔芳岩 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第2期199-203,共5页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是通过短双链RNA(small interference RNA,siRNA)介导的特异性抑制相应基因表达的新技术。作为研究基因功能的有效手段,该技术已在线虫、果蝇、斑马鱼和鼠等动物中进行了应用。本研究利用体外转录合成的... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是通过短双链RNA(small interference RNA,siRNA)介导的特异性抑制相应基因表达的新技术。作为研究基因功能的有效手段,该技术已在线虫、果蝇、斑马鱼和鼠等动物中进行了应用。本研究利用体外转录合成的短双链干扰RNA(siRNA),针对鸡的管家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH),在鸡胚成纤维细胞中对其表达进行干扰。结果显示siGAPDH能有效阻断GAPDH基因在鸡胚成纤维细胞中的表达,而不相关的siRNA则对该基因的表达没有影响,证明在鸡细胞中也存在RNA干扰现象,为利用RNAi技术对鸡的基因功能研究奠定了一定基础。 展开更多
关键词 RNAI 纤维细胞:GAPDH
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siRNA干涉禽流感病毒PA基因在鸡胚成纤维细胞中的表达 被引量:2
17
作者 马莉 朱金凤 +3 位作者 汤承 李明义 李定霏 岳华 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期438-441,共4页
用阳离子脂体质转染试剂将人工合成的小干扰RNA(Small interference RNA,siRNA)转染鸡胚成纤维细胞(CEF).结果表明,针对禽流感病毒(AIV)H5N1亚型核蛋白(NP)基因的siRNA能在AIV感染后1,2,3 h显著抑制NP基因的表达,表达水平分别降低3,1.4... 用阳离子脂体质转染试剂将人工合成的小干扰RNA(Small interference RNA,siRNA)转染鸡胚成纤维细胞(CEF).结果表明,针对禽流感病毒(AIV)H5N1亚型核蛋白(NP)基因的siRNA能在AIV感染后1,2,3 h显著抑制NP基因的表达,表达水平分别降低3,1.4和2.5倍. 展开更多
关键词 RNA干涉 SIRNA 禽流感病毒 实时荧光定量RT-PCR 纤维细胞
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不同方法制备鸡胚成纤维细胞的比较试验 被引量:2
18
作者 牛家强 支海兵 +2 位作者 徐业芬 陈国先 吴华伟 《中国家禽》 北大核心 2003年第5期11-12,共2页
采用传统法、半胚法和全胚法制备鸡胚成纤维细胞(CEF)单层。结果表明:在同等条件下,均以成纤维细胞为主,并伴有少量的上皮细胞,仅有全胚法含有极少量的肝细胞;培养时细胞贴壁和生长状况无明显差异,其产量稍有差异(全胚法>半胚法>... 采用传统法、半胚法和全胚法制备鸡胚成纤维细胞(CEF)单层。结果表明:在同等条件下,均以成纤维细胞为主,并伴有少量的上皮细胞,仅有全胚法含有极少量的肝细胞;培养时细胞贴壁和生长状况无明显差异,其产量稍有差异(全胚法>半胚法>传统法)。 展开更多
关键词 上皮细胞 细胞 产量 制备方法 传统法 半胫法 纤维细胞
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聚肌胞诱导鸡胚成纤维细胞和鸡胚及肉鸡抵抗新城疫病毒感染的研究 被引量:2
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作者 吕英军 倪嘉宁 鲍恩东 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期97-101,共5页
为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验。结果显示:125和250μg.mL-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍TC ID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;... 为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验。结果显示:125和250μg.mL-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍TC ID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;5 mg.mL-1的聚肌胞溶液(每个胚0.1 mL)能明显抑制NDV在SPF鸡胚中的繁殖,减轻NDV对鸡胚生长的抑制作用,降低病毒血凝效价和鸡胚死亡数。聚肌胞对肉鸡抵抗NDV感染试验结果显示,肌肉注射0.01 mg.kg-1的聚肌胞注射液能明显提高治愈率和显效率。但反映细胞活性状态的中性红染色(D570值)随着聚肌胞浓度的增大而变小的结果说明,聚肌胞对鸡胚成纤维细胞的增殖有一定程度的抑制。 展开更多
关键词 多聚核苷酸(聚肌胞) 新城疫病毒 抗病毒 纤维细胞
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鸡胚成纤维细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建和鉴定 被引量:3
20
作者 赵绪永 张改平 +1 位作者 朱礼倩 李清州 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第7期100-103,共4页
构建鸡胚成纤维细胞(CEF)T7噬菌体表达型cDNA文库,为筛选和研究CEF上病毒受体分子奠定基础。提取纯化CEF的mRNA,反转录合成双链cDNA,补平末端,连接EcoRⅠ/HindⅢ接头,双酶切,凝胶过滤层析除去小于400bp的cDNA片段,合成双链cDNA定向与T7... 构建鸡胚成纤维细胞(CEF)T7噬菌体表达型cDNA文库,为筛选和研究CEF上病毒受体分子奠定基础。提取纯化CEF的mRNA,反转录合成双链cDNA,补平末端,连接EcoRⅠ/HindⅢ接头,双酶切,凝胶过滤层析除去小于400bp的cDNA片段,合成双链cDNA定向与T7噬菌体左右臂连接,体外包装后建成cDNA表达文库。测定文库大小、重组率,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果表明,构建的cDNA文库滴度为2.2×107pfu/mL、扩增后滴度为3.5×1010pfu/mL,重组效率达98%、插入片段多在0.4~3kb之间,平均插入片段长约1.3kb。表明所建文库具有很高的质量,从而为筛选目的cDNA克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 纤维细胞(CEF) T7噬菌体 CDNA表达文库
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