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阳离子脂质体转染人类骨骼肌原代细胞的初步研究
被引量：
2
1
作者
李华玲
周晓霞
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第6期8-10,共3页
探讨不同脂质体介导基因转染人类骨骼肌原代细胞的转染效率和基因的表达。将含有β-半乳糖苷酶LacZ结构基因的质粒,用三种不同的阳离子脂质体导入人类骨骼肌原代细胞中,通过X-Gal染色观察不同的转染效率。结果发现,Fugene 6转染效率最高...
探讨不同脂质体介导基因转染人类骨骼肌原代细胞的转染效率和基因的表达。将含有β-半乳糖苷酶LacZ结构基因的质粒,用三种不同的阳离子脂质体导入人类骨骼肌原代细胞中,通过X-Gal染色观察不同的转染效率。结果发现,Fugene 6转染效率最高,蓝染细胞达10%,其脂质体与DNA的最佳比例为3∶2。Fugene 6可有效地将外源基因导入骨骼肌原代细胞,而且外源基因可以长效高效地表达,有望用来作为基因治疗的载体。
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关键词
脂质体
转染
人
骨骼肌
原代
细胞
LACZ基因
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职称材料
3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化
被引量：
4
2
作者
陈明明
李燕
+5 位作者
张晓娟
张林林
李新
丁向彬
刘新峰
郭宏
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019年第1期62-71,共10页
为了选择适合牛原代骨骼肌卫星细胞的转染试剂与条件,本研究以带有绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3.1-EGFP和pEGFP-C1作为外源基因,分别用Lipofectamine 3000、X-tremeGENE HP和FuGENE HD转染牛原代骨骼肌卫星细胞,通过荧光显微镜观察...
为了选择适合牛原代骨骼肌卫星细胞的转染试剂与条件,本研究以带有绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3.1-EGFP和pEGFP-C1作为外源基因,分别用Lipofectamine 3000、X-tremeGENE HP和FuGENE HD转染牛原代骨骼肌卫星细胞,通过荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR及Hoechst 33342染色评价转染效率。结果表明,对于同一时期、同一转染试剂,pcDNA3.1-EGFP转染效果优于pEGFP-C1;不同转染试剂之间,Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染效果优于FuGENE HD。Lipofectamine 3000转染后分化72h肌管最明显,FuGENE HD次之,X-tremeGENE HP转染后细胞死亡较多。采用1.0μL Lipofectamine 3000、1.5μL Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染细胞后EGFP表达量极显著高于FuGENE HD (P<0.01),但这三者之间差异不显著(P>0.05)。细胞转染效率与EGFP定量结果基本一致,1.0、1.5μL Lipofectamine 3000转染效率较高,分别达26.07%和24.77%,极显著高于FuGENE HD(5.59%)和X-tremeGENE HP(10.87%)的转染效率(P<0.01),但二者之间无显著差异(P>0.05);X-tremeGENE HP的转染效率极显著高于FuGENE HD (P<0.01)。综合考虑转染试剂的用量、细胞毒性及经济效益,本试验初步认为牛原代骨骼肌卫星细胞转染宜采用Lipofectamine 3000,其与质粒DNA的比例为1∶1时转染效率最高。本试验结果可为原代细胞的转染提供重要的参考价值。
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关键词
牛
原代
骨骼肌
卫星
细胞
转染
LIPOFECTAMINE
3000
X-tremeGENE
HP
FuGENE
HD
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职称材料
微囊化转基因肌细胞治疗帕金森病大鼠模型的实验研究
被引量：
4
3
作者
周瑾
张进禄
+3 位作者
徐群渊
赵春礼
蔡青
孙晓红
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第1期29-34,T006,共7页
为了探讨微囊化转酪氨酸羟化酶基因的细胞在帕金森病大鼠模型脑内存活、组织反应及对异常行为的治疗效果。本研究将带有酪氨酸羟化酶基因的载体—质粒 p CMV-TH在体外通过脂质体转染技术转入原代培养的人胚骨骼肌细胞内。将转染后的肌...
为了探讨微囊化转酪氨酸羟化酶基因的细胞在帕金森病大鼠模型脑内存活、组织反应及对异常行为的治疗效果。本研究将带有酪氨酸羟化酶基因的载体—质粒 p CMV-TH在体外通过脂质体转染技术转入原代培养的人胚骨骼肌细胞内。将转染后的肌细胞包裹在藻酸盐 -多聚赖氨酸 -藻酸盐构成的半透膜微囊中 ,然后将这些微囊化的能表达酪氨酸羟化酶的骨骼肌细胞植入模型大鼠脑的纹状体内。结果表明 ,微囊化的转基因细胞在脑内可存活至实验结束 (16周 ) ,可表达酪氨酸羟化酶。微囊化细胞周围无显著免疫排斥反应及炎症反应。本研究结果表明
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关键词
微囊
基因治疗
原代骨骼肌细胞
异种移植
帕金森病
大鼠模型
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职称材料
题名
阳离子脂质体转染人类骨骼肌原代细胞的初步研究
被引量：
2
1
作者
李华玲
周晓霞
机构
扬州大学医学院生化教研室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第6期8-10,共3页
基金
国家留学基金委(CSC)资助项目
扬州大学科研资助项目(2005-52)
文摘
探讨不同脂质体介导基因转染人类骨骼肌原代细胞的转染效率和基因的表达。将含有β-半乳糖苷酶LacZ结构基因的质粒,用三种不同的阳离子脂质体导入人类骨骼肌原代细胞中,通过X-Gal染色观察不同的转染效率。结果发现,Fugene 6转染效率最高,蓝染细胞达10%,其脂质体与DNA的最佳比例为3∶2。Fugene 6可有效地将外源基因导入骨骼肌原代细胞,而且外源基因可以长效高效地表达,有望用来作为基因治疗的载体。
关键词
脂质体
转染
人
骨骼肌
原代
细胞
LACZ基因
Keywords
cationic liposome
transfection
primary human skeletal muscle cells
LacZ gene
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化
被引量：
4
2
作者
陈明明
李燕
张晓娟
张林林
李新
丁向彬
刘新峰
郭宏
机构
天津农学院动物科学与动物医学学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019年第1期62-71,共10页
基金
国家自然科学基金(31501938
31572380)
文摘
为了选择适合牛原代骨骼肌卫星细胞的转染试剂与条件,本研究以带有绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3.1-EGFP和pEGFP-C1作为外源基因,分别用Lipofectamine 3000、X-tremeGENE HP和FuGENE HD转染牛原代骨骼肌卫星细胞,通过荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR及Hoechst 33342染色评价转染效率。结果表明,对于同一时期、同一转染试剂,pcDNA3.1-EGFP转染效果优于pEGFP-C1;不同转染试剂之间,Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染效果优于FuGENE HD。Lipofectamine 3000转染后分化72h肌管最明显,FuGENE HD次之,X-tremeGENE HP转染后细胞死亡较多。采用1.0μL Lipofectamine 3000、1.5μL Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染细胞后EGFP表达量极显著高于FuGENE HD (P<0.01),但这三者之间差异不显著(P>0.05)。细胞转染效率与EGFP定量结果基本一致,1.0、1.5μL Lipofectamine 3000转染效率较高,分别达26.07%和24.77%,极显著高于FuGENE HD(5.59%)和X-tremeGENE HP(10.87%)的转染效率(P<0.01),但二者之间无显著差异(P>0.05);X-tremeGENE HP的转染效率极显著高于FuGENE HD (P<0.01)。综合考虑转染试剂的用量、细胞毒性及经济效益,本试验初步认为牛原代骨骼肌卫星细胞转染宜采用Lipofectamine 3000,其与质粒DNA的比例为1∶1时转染效率最高。本试验结果可为原代细胞的转染提供重要的参考价值。
关键词
牛
原代
骨骼肌
卫星
细胞
转染
LIPOFECTAMINE
3000
X-tremeGENE
HP
FuGENE
HD
Keywords
primary bovine skeletal muscle satellite cells
transfection
Lipofectamine 3000
X-tremeGENE HP
FuGENE HD
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
微囊化转基因肌细胞治疗帕金森病大鼠模型的实验研究
被引量：
4
3
作者
周瑾
张进禄
徐群渊
赵春礼
蔡青
孙晓红
机构
首都医科大学北京神经科学研究所
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第1期29-34,T006,共7页
基金
国家重点基础研究发展规划项目!<脑功能和脑重大疾病的基础研究>(G19990 5 40 0 8)
国家自然科学基金国际合作研究项目 ! (199
文摘
为了探讨微囊化转酪氨酸羟化酶基因的细胞在帕金森病大鼠模型脑内存活、组织反应及对异常行为的治疗效果。本研究将带有酪氨酸羟化酶基因的载体—质粒 p CMV-TH在体外通过脂质体转染技术转入原代培养的人胚骨骼肌细胞内。将转染后的肌细胞包裹在藻酸盐 -多聚赖氨酸 -藻酸盐构成的半透膜微囊中 ,然后将这些微囊化的能表达酪氨酸羟化酶的骨骼肌细胞植入模型大鼠脑的纹状体内。结果表明 ,微囊化的转基因细胞在脑内可存活至实验结束 (16周 ) ,可表达酪氨酸羟化酶。微囊化细胞周围无显著免疫排斥反应及炎症反应。本研究结果表明
关键词
微囊
基因治疗
原代骨骼肌细胞
异种移植
帕金森病
大鼠模型
Keywords
microcapsulation, Gene therapy, primary muscle cells, xenografting, Parkinson's disease, rat
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
阳离子脂质体转染人类骨骼肌原代细胞的初步研究
李华玲
周晓霞
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006
2
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职称材料
2
3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化
陈明明
李燕
张晓娟
张林林
李新
丁向彬
刘新峰
郭宏
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019
4
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职称材料
3
微囊化转基因肌细胞治疗帕金森病大鼠模型的实验研究
周瑾
张进禄
徐群渊
赵春礼
蔡青
孙晓红
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
4
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