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枸杞糖肽激活CAMKK2/AMPK/MCU信号通路改善大鼠卵巢颗粒细胞衰老: 1; 作者刘晓丹凌晨 +5 位作者刘璐蒲静马海滨马会明张文萍陈冬梅《中国药理学通报》北大核心 2025年第6期1116-1125,共10页; 目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光... 展开更多; 关键词枸杞糖肽衰老 CAMKK2/AMPK信号通路线粒体钙稳态能量代谢大鼠原代卵巢颗粒细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

携带人bcl-2基因的慢病毒表达载体的构建及其在人原代卵巢颗粒细胞中的表达被引量：4: 2; 作者王雪峰何援利《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1856-1859,1863,共5页; 目的构建及鉴定bcl-2基因慢病毒表达载体,并观察在体外人卵巢原代颗粒细胞中的表达。方法采用PCR技术从含有人bcl-2基因的质粒克隆模板pCMV-SPORT6钓取bcl-2基因,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒pGC-FU(含EGFP基因)中,构建慢病毒载体... 展开更多; 关键词 BCL-2 慢病毒载体基因转移人卵巢原代颗粒细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

慢病毒介导的Bcl-2基因对磷酰胺氮芥诱导人原代卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用被引量：5: 3; 作者王雪峰何援利 +1 位作者付霞霏彭冬先《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期932-936,共5页; 目的探讨携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥诱导体外培养的原代人卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用。方法利用分子生物学技术,成功构建携带Bcl-2基因慢病毒载体,包装成高滴度慢病毒,将重组慢病毒体外感染人卵巢原代颗粒细胞,再加入浓度30μm... 展开更多; 关键词 BCL-2基因慢病毒化疗药物细胞凋亡原代卵巢颗粒细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成及增殖的影响被引量：7: 4; 作者宋丹吴国云 +3 位作者丁威邢军魏全伟石放雄《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期357-363,共7页; [目的]本试验旨在探究甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成功能以及增殖的影响。[方法]首先采用免疫组化法鉴定甲状腺素受体(TRα/β)在猪卵巢组织的表达情况,随后体外培养猪卵巢原代颗粒细胞,选取低(10-8mol·L^(-1))、中(... 展开更多; 关键词猪卵巢原代颗粒细胞甲状腺素类固醇合成增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥抑制卵巢颗粒细胞体外分泌功能的影响: 5; 作者王雪峰何援利 +1 位作者蔡慧华朱洪磊《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第15期2490-2492,共3页; 目的:探讨携带Bcl-2基因的慢病毒抑制磷酰胺氮芥(PM)对体外培养的人原代卵巢颗粒细胞(GCs)的凋亡情况及其分泌功能的影响。方法:实验分4组:实验组,pGC-FU-Bcl-2+PM;空载对照组,pGC-FU-EGFP+PM;实验对照组,只加PM;正常对照组,不加PM及病... 展开更多; 关键词基因 BCL-2 慢病毒化疗分泌功能原代卵巢颗粒细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枸杞糖肽激活CAMKK2/AMPK/MCU信号通路改善大鼠卵巢颗粒细胞衰老: 1; 作者刘晓丹凌晨刘璐蒲静马海滨马会明张文萍陈冬梅; 机构宁夏医科大学总医院宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏医科大学总医院; 出处《中国药理学通报》北大核心 2025年第6期1116-1125,共10页; 基金国家自然科学基金地区项目(No 82360968) 宁夏回族自治区重点研发计划项目(No 2022BEG03148)。; 文摘目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光法、蛋白免疫印迹法检测衰老标志和线粒体功能相关因子。结果CCK-8、EDU、Ki67与DOX组相比,经LbGP治疗可明显提高细胞活力(P<0.05),促进增殖(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后细胞中β-半乳糖苷酶阳性面明显减少(P<0.05);免疫荧光结果显示:与DOX组相比,LbGP治疗后p21、γH2A.X下降(P<0.05)、pRB升高(P<0.05);Western blot结果显示,与DOX组相比,LbGP治疗组衰老表型蛋白p21、p53明显减少(P<0.05),pRB升高(P<0.05);线粒体释放到胞质中的cyt C和活化的caspase-9明显减少(P<0.05);CAMKK2、pAMPK和线粒体钙稳态调节蛋白MCU水平升高(P<0.05);细胞核中能量代谢相关蛋白SIRT1、PGC1α/β和ATP5A1明显升高(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后ROS水平明显下降(P<0.05)。结论LbGP可改善DOX诱导的大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老,其机制可能是通过上调CAMKK2/AMPK信号通路,进而改善线粒体钙稳态,提高细胞能量代谢相关调节蛋白的表达水平实现的。为LbGP能够辅助改善卵巢功能提供了实验基础。; 关键词枸杞糖肽衰老 CAMKK2/AMPK信号通路线粒体钙稳态能量代谢大鼠原代卵巢颗粒细胞; Keywords Lycium barbarum glycopeptide aging CAMKKβ/AMPK signaling pathway mitochondrial cacium homeostasis energy metabolism rat primary ovarian granulosa cells; 分类号 R-332 [医药卫生] R284.1 [医药卫生—中药学] R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R345.57 [医药卫生—基础医学] R348.2 [医药卫生—基础医学] R339.38 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名携带人bcl-2基因的慢病毒表达载体的构建及其在人原代卵巢颗粒细胞中的表达被引量：4: 2; 作者王雪峰何援利; 机构南方医科大学珠江医院妇产科; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1856-1859,1863,共5页; 基金 2008年广东省医学科研基金(B2008116); 文摘目的构建及鉴定bcl-2基因慢病毒表达载体,并观察在体外人卵巢原代颗粒细胞中的表达。方法采用PCR技术从含有人bcl-2基因的质粒克隆模板pCMV-SPORT6钓取bcl-2基因,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒pGC-FU(含EGFP基因)中,构建慢病毒载体表达质粒pGC-FU-bcl-2,通过酶切、测序验证bcl-2基因后,将pGC-FU-bcl-2质粒和包装质粒pHelper1.0、pHelp-er2.0共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带bcl-2基因和EGFP基因的重组慢病毒GC-FU-bcl-2,并转染靶细胞人卵巢原代颗粒细胞。通过检测标志蛋白增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和目的蛋白bcl-2进一步验证pGC-FU-bcl-2在靶细胞中的表达。结果(1)pGC-FU-bcl-2中携有正确的bcl-2基因,并能在人类细胞中表达;pGC-FU-bcl-2共转染包装细胞293T能产生重组病毒GC-FU-bcl-2;(2)目的基因bcl-2能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞人卵巢原代颗粒细胞,并达到稳定的表达,荧光显微镜下能直接观察到GFP,Westernblotting能检测到bcl-2蛋白在靶细胞中的表达。结论成功构建了携带bcl-2基因的重组慢病毒载体,转染人卵巢原代颗粒细胞后能够稳定表达bcl-2基因,为进一步研究bcl-2的功能和细胞凋亡相关疾病的治疗奠定基础。; 关键词 BCL-2 慢病毒载体基因转移人卵巢原代颗粒细胞; Keywords bcl-2 lentiviral vector gene transfer human ovarian granulosa cells; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢病毒介导的Bcl-2基因对磷酰胺氮芥诱导人原代卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用被引量：5: 3; 作者王雪峰何援利付霞霏彭冬先; 机构南方医科大学珠江医院妇产科; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期932-936,共5页; 基金国家自然科学基金(81041101) 广东省自然科学基金(10451051501004704)~~; 文摘目的探讨携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥诱导体外培养的原代人卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用。方法利用分子生物学技术,成功构建携带Bcl-2基因慢病毒载体,包装成高滴度慢病毒,将重组慢病毒体外感染人卵巢原代颗粒细胞,再加入浓度30μmol/L的磷酰胺氮芥诱导细胞凋亡。分为4组进行实验:(a)实验组:pGC-FU-Bcl-2+磷酰胺氮芥(PM);(b)空载对照组:pGC-FU-EGFP+PM;(c)实验对照组:只加PM;(d)空白对照组:不加PM及病毒。采用流式细胞仪、Hoechst 33258染色检测卵巢颗粒细胞凋亡情况;利用Western blot检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果空白对照组(GCs),凋亡峰不明显,颗粒细胞凋亡率为(1.93±0.28)%,实验组(GCs+PM+pGC-FU-Bcl-2)出现微弱的凋亡峰,颗粒细胞凋亡率为(6.99±0.55)%,比实验对照组(GCs+PM)及空载对照组(GCs+PM+pGC-FU-EGFP)显著低,但显著高于空白对照组(P<0.05)。实验组Bcl-2蛋白的表达明显增高,显著高于其余各对照组(P<0.05)。结论携带Bcl-2基因的慢病毒感染靶细胞后可以过度分泌Bcl-2蛋白,显著抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,保护PM对颗粒细胞的理化损伤。; 关键词 BCL-2基因慢病毒化疗药物细胞凋亡原代卵巢颗粒细胞; Keywords apoptosis chemotherapeutic agents ovarian granulose ceils Bcl-2 gene lentivirus vector; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成及增殖的影响被引量：7: 4; 作者宋丹吴国云丁威邢军魏全伟石放雄; 机构南京农业大学动物科技学院江苏农林职业技术学院; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期357-363,共7页; 基金国家自然科学基金项目(31432075 31572403) +1 种基金江苏省农林职业技术学院科技项目(2016kj001); 文摘 [目的]本试验旨在探究甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成功能以及增殖的影响。[方法]首先采用免疫组化法鉴定甲状腺素受体(TRα/β)在猪卵巢组织的表达情况,随后体外培养猪卵巢原代颗粒细胞,选取低(10-8mol·L^(-1))、中(10-7mol·L^(-1))、高(10-6mol·L^(-1))3种浓度的甲状腺素(T4)孵育24 h,采用酶联免疫法检测细胞培养液中孕酮(P4)和雌二醇(E2)水平,并采用蛋白印迹法检测颗粒细胞内激素合成相关酶蛋白(3β-HSD、CYP19)的表达情况。采用MTT法检测各浓度甲状腺素对细胞活力的影响,利用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光染色验证不同浓度甲状腺素对颗粒细胞增殖的影响。[结果]免疫组化结果显示:TRα/β在猪卵巢不同发育阶段卵泡的颗粒细胞、膜细胞中有广泛表达,在卵母细胞的胞质中也有分布,在闭锁卵泡中也见明显表达。猪卵巢原代颗粒细胞经甲状腺素处理后,细胞培养液中的孕酮和雌激素水平都显著低于空白对照组(P<0.05),并且各剂量处理组间孕酮呈现出剂量依赖性降低趋势;雌激素在低浓度和高浓度甲状腺素处理组较中浓度处理组高。蛋白免疫印迹结果显示:与对照组相比,3β-HSD和CYP19蛋白在较高浓度甲状腺素(10-7和10-6mol·L^(-1))处理组的表达量均显著降低(P<0.05);而在低浓度甲状腺素(10-8mol·L^(-1))处理组,CYP19蛋白表达量显著降低(P<0.05),但3β-HSD蛋白表达无显著差异。此外,MTT细胞毒性和增殖试剂盒检测结果显示:不同浓度甲状腺素处理并不影响细胞活力,这与PCNA免疫荧光强度统计结果一致,进一步证实了甲状腺素对原代颗粒细胞增殖没有影响。[结论]甲状腺素能够作用于卵巢颗粒细胞,干扰类固醇激素的合成,其作用机制可能是通过改变激素合成相关蛋白3β-HSD和CYP19的表达来完成的。而甲状腺素对颗粒细胞激素合成的干扰效应并不影响细胞增殖状态。; 关键词猪卵巢原代颗粒细胞甲状腺素类固醇合成增殖; Keywords porcine ovary primary granulosa cells thyroid hormone steroidogenesis proliferation; 分类号 S852.21 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥抑制卵巢颗粒细胞体外分泌功能的影响: 5; 作者王雪峰何援利蔡慧华朱洪磊; 机构南方医科大学珠江医院妇产科; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第15期2490-2492,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:81041101) 广东省自然科学基金资助项目(编号:10451051501004704); 文摘目的:探讨携带Bcl-2基因的慢病毒抑制磷酰胺氮芥(PM)对体外培养的人原代卵巢颗粒细胞(GCs)的凋亡情况及其分泌功能的影响。方法:实验分4组:实验组,pGC-FU-Bcl-2+PM;空载对照组,pGC-FU-EGFP+PM;实验对照组,只加PM;正常对照组,不加PM及病毒。采用DNA ladder检测GCs凋亡情况,利用放射免疫法检测细胞培养上清液中雌二醇及孕酮的浓度。结果:实验对照组及空载对照组的DNA ladder表现为明显的梯状带形,正常对照组及实验组DNA ladder无明显的梯状带形。各组之间雌二醇及孕酮的基础浓度经统计学分析表明差异无显著性,实验组与相应时间点实验对照组及空载对照组相比差异均存在显著性(P<0.01),实验对照组与空载对照组相比差异无显著性(P=0.990,P=0.523)。结论:携带Bcl-2基因的慢病毒感染人原代卵巢GCs后,显著降低了PM诱导的细胞凋亡,改善了GCs在体外分泌雌二醇及孕酮的功能。; 关键词基因 BCL-2 慢病毒化疗分泌功能原代卵巢颗粒细胞; Keywords Genes, bcl-2 Lentivirus vector Drug therapy Secretion function Ovarian granulosecells; 分类号 R737.31 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	枸杞糖肽激活CAMKK2/AMPK/MCU信号通路改善大鼠卵巢颗粒细胞衰老	刘晓丹凌晨刘璐蒲静马海滨马会明张文萍陈冬梅	《中国药理学通报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	携带人bcl-2基因的慢病毒表达载体的构建及其在人原代卵巢颗粒细胞中的表达	王雪峰何援利	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	慢病毒介导的Bcl-2基因对磷酰胺氮芥诱导人原代卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用	王雪峰何援利付霞霏彭冬先	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成及增殖的影响	宋丹吴国云丁威邢军魏全伟石放雄	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥抑制卵巢颗粒细胞体外分泌功能的影响	王雪峰何援利蔡慧华朱洪磊	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料