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肿瘤坏死因子-α联合转化生长因子-β1作用于原代白血病细胞对Gli2表达的影响 被引量:2
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作者 李哲 孙圆圆 潘静 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第22期3678-3681,共4页
目的:证明肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可以促进转化生长因子-β(TGF-β)降低原代白血病细胞Gli2的表达。方法 :(1)Western blot检测白血病细胞Gli2蛋白的表达。(2)不同浓度TGF-β1和TNF-α分别作用于原代白血病细胞后,检测Gli2... 目的:证明肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可以促进转化生长因子-β(TGF-β)降低原代白血病细胞Gli2的表达。方法 :(1)Western blot检测白血病细胞Gli2蛋白的表达。(2)不同浓度TGF-β1和TNF-α分别作用于原代白血病细胞后,检测Gli2基因或蛋白以及TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ蛋白的表达。(3)TGF-β1、TNF-α及SIS3作用于原代白血病细胞24 h后,检测Gli2蛋白的表达。结果:(1)3株原代白血病细胞均有Gli2蛋白的表达。(2)1~10 ng/m L TGF-β1作用于原代白血病细胞12~24 h,与对照组相比Gli2基因m RNA表达降低明显;5 ng/m L TNF-α则没有显著变化。(3)5 ng/m L TNF-α作用于原代白血病细胞24 h后,与对照组相比TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ蛋白表达均有增高。(4)单独应用TGF-β以及联合应用TNF-α和TGF-β作用24 h后,与对照组相比Gli2基因的表达均降低明显,而且TNF-α+TGF-β组Gli2基因的表达较TGF-β组降低更明显。结论:联合应用TNF-α和TGF-β比单独应用TGF-β能进一步减少原代白血病细胞Gli2基因的表达。 展开更多
关键词 原代白血病细胞 TGF-Β1 TNF-Α GLI2
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原代白血病细胞存活蛋白(Survivin)基因表达与化疗敏感性 被引量:1
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作者 孟小莉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期266-268,共3页
为了研究存活蛋白(survivin)基因表达的原代急性白血病(AL)细胞时不同化疗药物的敏感性差异,采用 RT-PCR方法检测AL细胞survivin mRNA的表达,用MTT法检测AL细胞的杀伤率。结果表明:原代AL细胞体 外与不同药物共同孵育15小时后,survivin ... 为了研究存活蛋白(survivin)基因表达的原代急性白血病(AL)细胞时不同化疗药物的敏感性差异,采用 RT-PCR方法检测AL细胞survivin mRNA的表达,用MTT法检测AL细胞的杀伤率。结果表明:原代AL细胞体 外与不同药物共同孵育15小时后,survivin mRNA(+)AL细胞对DNR、HHT、Acla、AraC、DA(DNR+AraC)、HA (HHT+AraC)的敏感性与survivin mRNA(-)AL细胞无明显差异;survivin mRNA(+)的AL细胞对AA(Acla+ AraC)联合的敏感性显著高于survivin mRNA(-)者[(37.24±18.36)%vs(24.32±9.33)%,P=0.032]。结论: survivin基因阳性表达的AL细胞可能对某些化疗药物(如Acla+MaC)敏感。 展开更多
关键词 SURVIVIN基因 原代白血病细胞 化疗 基因表达 急性白血病 药物敏感性
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原代白血病细胞人端粒酶催化亚单位的表达
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作者 孟小莉 林茂芳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第6期961-963,共3页
目的 :研究原代白血病细胞人端粒酶催化亚单位 (hEST)的表达及其临床意义。方法 :应用RT -PCR方法检测 30例初发急性白血病 (AL)患者、1 2例AL获完全缓解 (CR)患者和 6例正常志愿者骨髓单个核细胞 (MNCs)hESTmRNA的表达。结果 :初发AL... 目的 :研究原代白血病细胞人端粒酶催化亚单位 (hEST)的表达及其临床意义。方法 :应用RT -PCR方法检测 30例初发急性白血病 (AL)患者、1 2例AL获完全缓解 (CR)患者和 6例正常志愿者骨髓单个核细胞 (MNCs)hESTmRNA的表达。结果 :初发AL患者骨髓MNCshESTmRNA表达量 (0 .71± 0 .34)明显高于CR患者 (0 .4 3± 0 .2 5 ,P <0 .0 5 )及正常志愿者 (0 .2 2± 0 .2 1 ,P <0 .0 1 )。初发AL患者骨髓常规涂片中原始细胞百分率与骨髓MNCs的hESTmRNA表达量呈正相关 (r =0 .4 5 7,P <0 .0 5 )。结论 :初发AL患者骨髓MNCs的hESTmRNA表达增高。 展开更多
关键词 原代白血病细胞 端粒酶催化亚单位 RT-PCR
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Bcl-2反义核酸联合化疗药对HL60细胞及原代白血病细胞的作用 被引量:2
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作者 林艳娟 吕联煌 +2 位作者 陈志哲 张臣青 林振兴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1007-1012,共6页
目的应用Bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(anti-sense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,AS-PS-ODNs,AS-PO)靶向诱导20例原代急性白血病细胞凋亡,并与多种常用化疗药联合,观察ASPO对原代急性白血病细胞及HL60细胞系的协同效应。方... 目的应用Bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(anti-sense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,AS-PS-ODNs,AS-PO)靶向诱导20例原代急性白血病细胞凋亡,并与多种常用化疗药联合,观察ASPO对原代急性白血病细胞及HL60细胞系的协同效应。方法①应用MTT比色法分析ASPO与常用化疗药物配伍协同作用特点;②细胞免疫化学染色检测P26 Bcl-2蛋白表达;③台盼蓝拒染试验检测白血病细胞倍增时间;④丫啶橙(AO)染色,流式DNA Content分析细胞凋亡率,电镜及DNA电泳观察凋亡细胞形态及分子水平的变化。结果①ASPO与除DNR,NVT外的7种(HHRT,VCR、MTX、Ara-c、VP16、ACR、DEX)化疗药物均有联合增强或相加作用。②12例Bcl-2蛋白抑制率大于0.4为A组,8例小于0.4为B组。A组的凋亡率和B组的凋亡率均高于空白对照组(P<0.05),且A组的凋亡率高于B组(P<0.05)。③原代急性白血病细胞ASPO组,Ara-c组和ASPO+Ara-c组,72 h细胞生长抑制检测发现ASPO+Ara-c组的细胞抑制率高于单用ASPO与单用Ara-c的细胞抑制率之和(P<0.01);④A组的ASPO对细胞的抑制与细胞生长的倍增时间102.89±37.97呈正相关γ=0.577(P<0.05)。结论Bcl-2 ASPO能特异抑制白血病细胞(系)的Bcl-2蛋白表达;Bcl-2 ASPO对倍增时间慢、BCL-2蛋白表达高的原代白血病细胞作用效果好;Bcl-2的ASPO与多种化疗药物联合有潜在临床应用前景。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 Bcl-2 原代急性白血病细胞 HL-60细胞 联合化疗 凋亡
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阿克拉霉素联合阿糖胞苷对survivin基因表达的原代急性白血病细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 孟小莉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第6期1145-1146,共2页
目的探讨survivin基因表达的原代急性白血病(AL)细胞对阿克拉霉素(Acla)联合阿糖胞苷(AraC)的敏感性。方法采用RT-PCR方法检测28例AL患者的原代AL细胞survivinmRNA的表达;用MTT法检测体外Acla4mg/L,AraC20mg/L及2者联用(AA)对AL细胞的... 目的探讨survivin基因表达的原代急性白血病(AL)细胞对阿克拉霉素(Acla)联合阿糖胞苷(AraC)的敏感性。方法采用RT-PCR方法检测28例AL患者的原代AL细胞survivinmRNA的表达;用MTT法检测体外Acla4mg/L,AraC20mg/L及2者联用(AA)对AL细胞的生长抑制率。结果28例中,survivinmRNA阳性表达22例。AA应用对survivinmRNA阳性者AL细胞的生长抑制率达(37.24±18.36)%,高于对survivinmRNA阴性者的(24.32±9.33)%(t=2.340,P=0.032)。结论survivin基因阳性表达的原代AL细胞对AA较敏感。 展开更多
关键词 原代白血病细胞 SURVIVIN 阿克拉霉素 阿糖胞苷
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hTERT基因反义核酸促进顺铂诱导原代急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 李文瑜 张洹 何冬梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1459-1462,共4页
目的 :利用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因的反义寡核苷酸 (ASPS -ODN)抑制人原代急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞hTERT基因表达后 ,观察顺铂对ALL细胞凋亡的影响。方法 :采用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达量的变... 目的 :利用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因的反义寡核苷酸 (ASPS -ODN)抑制人原代急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞hTERT基因表达后 ,观察顺铂对ALL细胞凋亡的影响。方法 :采用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达量的变化 ;以台盼蓝拒染法计数细胞数 ,确定细胞的增殖情况 ;Hoechst 332 5 8和PI双染色法观察凋亡细胞的形态变化 ;通过流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析。结果 :hTERT反义核酸作用于ALL细胞 72hhTERT蛋白表达阳性率为 (32 17± 3 0 0 ) % ,与空白对照组 (6 6 31± 2 84 ) %及正义核酸作用组 (6 2 5 6± 6 11) %比有显著差异 (P <0 0 5 ) ;而正义核酸作用组与空白对照组比无显著差异 (P >0 0 5 )。hTERT反义核酸作用于ALL细胞 2 4h加入顺铂 ,再共同作用 4 8h ,ALL活细胞均数为 1 75 0× 10 8cells/L ,与单用顺铂组 (2 0 90× 10 8cells/L)及hTERT正义核酸联用顺铂组 (1 990× 10 8cells/L)相比 ,对细胞抑制明显增强 (P <0 0 5 )。hTERTASPS -ODN作用于ALL细胞 2 4h再加入顺铂作用 4 8h ,细胞出现典型的凋亡形态学改变。hTERTASPS -ODN与 2 5 μmol/L顺铂联合作用于ALL细胞 4 8h的凋亡细胞百分率 (37 85± 2 4 4 ) %分别同SPS -ODN与顺铂联合作用组 (15 16±2 展开更多
关键词 HTERT基因 人类端粒酶逆转录酶基因 反义寡核甘酸类 原代急性淋巴细胞白血病 顺铂 细胞凋亡
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茅莓总皂苷和高三尖杉酯碱、阿糖胞苷体外协同诱导白血病细胞凋亡的机制研究 被引量:4
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作者 许晓峰 程汝滨 +2 位作者 杨波 高瑞兰 张学进 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第7期1659-1663,I0008,I0009,共7页
目的:探讨茅莓总皂苷(TSRP)抑制K562和人原代白血病细胞及分别与化疗药高三尖杉酯碱(Hom)、阿糖胞苷(Ara-c)的协同作用,并探讨其协同作用的可能机制。方法:MTT法和PHA-LCM液相-半固体二步培养法检测不同浓度的TSRP对K562和人原代白血病... 目的:探讨茅莓总皂苷(TSRP)抑制K562和人原代白血病细胞及分别与化疗药高三尖杉酯碱(Hom)、阿糖胞苷(Ara-c)的协同作用,并探讨其协同作用的可能机制。方法:MTT法和PHA-LCM液相-半固体二步培养法检测不同浓度的TSRP对K562和人原代白血病细胞增殖及其与化疗药联用后的影响;观察TSRP分别和Hom、Ara-c联用的抑制作用,用药物相互作用指数评价药物协同作用;DAPI染色法观察一定浓度下TSRP协同化疗药诱导K562细胞凋亡;Western blot检测促凋亡蛋白Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和Cleaved PARP以及抗凋亡蛋白Survivin的表达。结果:TSRP能够抑制K562和人原代白血病细胞的增殖,呈浓度依赖性,在一定浓度范围内TSRP和化疗药有显著的协同作用;DAPI染色法观察TSRP和化疗药协同较单用化疗药出现明显凋亡现象,诱导细胞发生凋亡;Western blot检测TSRP联合Hom较单用Hom显著提高了K562细胞内PARP、Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-9的活性;TSRP联合Ara-c较单用Ara-c显著提高了K562细胞内PARP和Cleaved caspase-3的活性,但是对Cleaved caspase-9的活性影响差别不大;TSRP联合Hom或Arac对Survivin的活性影响均未见明显差别。结论:TSRP分别和化疗药Hom或Ara-c联用对K562和人原代白血病细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用,且主要是通过线粒体途径增强凋亡效应,从而增加化疗药物的敏感性,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 茅莓总皂苷 K562 原代白血病细胞 协同 凋亡
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