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黄芪总黄酮对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究 被引量:3
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作者 孔祥鹤 牛银波 +4 位作者 武祥龙 翟远坤 潘亚磊 李晨睿 梅其炳 《化学与生物工程》 CAS 2012年第6期26-30,45,共6页
在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)... 在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)及核心结合因子(Runx-2)的表达。结果表明,ATF能剂量依赖性地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2蛋白的表达。提示ATF可能通过上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2的表达来促进成骨细胞的成骨活性。 展开更多
关键词 黄芪总黄酮 大鼠原代成骨细胞 增殖 分化 矿化 BMP-2 Runx-2
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DyCl_3对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能表达的影响(英文)
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作者 张金超 杨康宁 +1 位作者 孙静 李亚平 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1856-1862,共7页
采用MTT法、碱性磷酸酶活性测定、油红O的染色和定量测定、矿化功能的测定以及qRT-PCR等手段在细胞和分子水平上研究了DyCl3对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响。研究结果表明,在测试浓度范围内,DyCl3均抑制成骨细胞增殖... 采用MTT法、碱性磷酸酶活性测定、油红O的染色和定量测定、矿化功能的测定以及qRT-PCR等手段在细胞和分子水平上研究了DyCl3对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响。研究结果表明,在测试浓度范围内,DyCl3均抑制成骨细胞增殖。浓度为1×10-8,1×10-6和1×10-5mol·L-1的DyCl3促进成骨细胞分化。在测试浓度范围内,DyCl3均抑制成骨细胞横向分化为脂肪细胞。浓度为1×10-5mol·L-1的DyCl3促进成骨细胞矿化结节的形成,而浓度为1×10-7mol·L-1和1×10-6mol·L-1的DyCl3抑制成骨细胞矿化结节的形成,进一步降低浓度为1×10-8mol·L-1,它则对成骨细胞矿化功能没有影响。浓度1×10-6mol·L-1的DyCl3显著降低PPAR-γmRNA表达水平,但相同浓度DyCl3则显著上调RUNX-2mRNA表达水平。实验结果提示,DyCl3对体外培养的成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响与浓度和作用时间有关,而且,它们是影响其生物效应从毒性到活性,从损伤到保护,从上调到下调转变的关键因素。这些结果对深入理解稀土离子对骨代谢的影响具有重要的价值。 展开更多
关键词 稀土离子 原代成骨细胞 增殖 分化 脂横向分化 矿化
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雌二醇下调铁对成骨细胞活性的抑制作用 被引量:1
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作者 王啸 刘禄林 +3 位作者 陈斌 费蓓蓓 柏林 徐又佳 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2014年第2期149-154,共6页
目的:了解雌二醇与铁对小鼠原代成骨细胞活性的影响及活性氧( ROS)的作用。方法提取新生小鼠颅骨原代成骨细胞,经差速贴壁法纯化后传代,选取3~4代进行实验,随机分为对照组,枸橼酸铁铵( FAC)组和FAC+17β-雌二醇( FAC +E2... 目的:了解雌二醇与铁对小鼠原代成骨细胞活性的影响及活性氧( ROS)的作用。方法提取新生小鼠颅骨原代成骨细胞,经差速贴壁法纯化后传代,选取3~4代进行实验,随机分为对照组,枸橼酸铁铵( FAC)组和FAC+17β-雌二醇( FAC +E2)组,分别用2.5μmol/L FAC和10 nmol/L E2干预7 d后收集细胞,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用碱性磷酸酶( ALP)活性试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶活性;荧光定量PCR ( Q-PCR)检测成骨相关基因( Runx2、 osterix、 Bglap、 IBSP)表达;荧光酶标仪检测各组ROS水平并在荧光显微镜下观察。结果细胞活性氧水平检测结果显示, FAC组活性氧水平明显高于其余各组, FAC+E2组与FAC组相比ROS水平降低( P<0.05); FAC干预后细胞增殖能力及ALP活性明显下降( P<0.05), FAC+E2组细胞增殖能力较FAC 组上升( P<0.05), ALP活性上升,但差异无统计学意义( P>0.05); Q-PCR结果显示,与对照组相比, FAC组Runx2、 osteorix表达水平明显下降( P<0.05), FAC+E2组与FAC组相比,各基因表达水平均显著升高(均P<0.05)。结论 FAC可能通过升高ROS水平抑制成骨细胞生物活性;雌二醇可能通过清除FAC诱导生成的ROS下调该抑制作用。 展开更多
关键词 铁蓄积 雌二醇 活性氧 原代成骨细胞
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MAPK-ERK1/2信号通路调控成骨性基因表达和细胞增殖 被引量:22
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作者 丁道芳 李玲慧 +3 位作者 宋奕 杜国庆 卫晓恩 曹月龙 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1432-1436,共5页
目的观察在不同浓度大鼠血清作用下,激活或抑制MAPK-ERK1/2信号通路对大鼠成骨细胞的成骨性基因表达和增殖的影响。方法原代培养大鼠成骨细胞,进行形态和碱性磷酸酶初步鉴定后,分别用1%和5%的大鼠血清进行培养24 h,WB检测MAPK-ERK1/2信... 目的观察在不同浓度大鼠血清作用下,激活或抑制MAPK-ERK1/2信号通路对大鼠成骨细胞的成骨性基因表达和增殖的影响。方法原代培养大鼠成骨细胞,进行形态和碱性磷酸酶初步鉴定后,分别用1%和5%的大鼠血清进行培养24 h,WB检测MAPK-ERK1/2信号通路蛋白p-ERK1/2和ERK1/2表达,同时检测成骨性基因(Runx2、Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶)和增殖蛋白PCNA的表达;MAPK-ERK1/2信号通路阻断剂PD0325901抑制P-ERK1/2的表达后观察对Runx2、Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶和增殖蛋白PCNA的表达。结果 5%大鼠血清激活p-ERK1/2水平明显高于1%大鼠血清(P<0.05),在MAPK-ERK1/2高水平激活状态下,成骨性基因如Runx2、Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶的表达水平出现显著的增加及促进PCNA的表达;当抑制MAPK-ERK1/2信号通路时,成骨性基因Runx2、Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶的表达水平也随之下调,且PCNA表达也受到抑制。结论激活MAPKERK1/2通路促进成骨基因表达和成骨细胞增殖,抑制此通路将抑制成骨性基因表达和细胞增殖,此通路可能作为治疗骨质疏松症的药物靶点。 展开更多
关键词 原代成骨细胞 骨性基因表达 大鼠血清 信号通路
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