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厚垣普可尼亚菌原生质体的制备、再生与遗传体系构建
1
作者
马园
郝陆瑶
+2 位作者
张艳妮
李倩楠
王瑞
《浙江农业学报》
北大核心
2025年第4期800-807,共8页
为建立厚垣普可尼亚菌高效原生质体制备体系和聚乙二醇(PEG)介导的遗传转化体系,选取厚垣普可尼亚菌菌丝作为实验对象,系统考察菌丝培养时间、裂解酶种类、酶解时间与温度、渗透压稳定剂类型和pH值等关键参数对原生质体形成的影响;采用...
为建立厚垣普可尼亚菌高效原生质体制备体系和聚乙二醇(PEG)介导的遗传转化体系,选取厚垣普可尼亚菌菌丝作为实验对象,系统考察菌丝培养时间、裂解酶种类、酶解时间与温度、渗透压稳定剂类型和pH值等关键参数对原生质体形成的影响;采用单因素试验优化原生质体制备工艺;通过PEG介导法进行质粒DNA转化,评价转化子的遗传稳定性。结果表明:厚垣普可尼亚菌原生质体的最佳制备条件为厚垣普可尼亚菌在马铃薯葡萄糖水(PDB)培养基中26℃培养24 h,使用0.7 mol·L^(-1)NaCl(pH值7.5)作为渗透压稳定剂,经20 mg·mL^(-1)崩溃酶在30℃酶解5 h,0.5 g菌丝的原生质体产量达3.05×10^(6)mL^(-1);获得的原生质体在再生培养基中的再生率为6.2%。PEG介导转化能够获得稳定遗传的转化子,转化率为45%,转化菌株的菌落形态、生长速率和分生孢子产量与野生菌株无显著差异。本研究成功建立了厚垣普可尼亚菌原生质体高效制备与遗传转化体系,为其生防功能解析和基因工程学改造提供了关键技术支撑。
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关键词
厚垣普可尼亚菌
原生质体
酶解条件
遗传转化
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职称材料
厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学
被引量:
4
2
作者
王曦茁
马建伟
+2 位作者
汪来发
李永
余明忠
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期75-81,共7页
厚垣普可尼亚菌是对植物线虫有防治潜力的生防菌。利用正交设计优化厚垣普可尼亚菌液体发酵条件,利用Grow/Sigmoidal模型中的非线性拟合方程Logistic函数和Boltzmann函数构建该菌液体发酵过程中的孢子增长、底物消耗和产物生成的液体发...
厚垣普可尼亚菌是对植物线虫有防治潜力的生防菌。利用正交设计优化厚垣普可尼亚菌液体发酵条件,利用Grow/Sigmoidal模型中的非线性拟合方程Logistic函数和Boltzmann函数构建该菌液体发酵过程中的孢子增长、底物消耗和产物生成的液体发酵动力学模型,并运用Origin Pro V8.6软件拟合求解出各模型参数。结果表明:在28℃条件下和500 mL摇瓶中,厚垣普可尼亚菌优化培养基及培养条件是葡萄糖15.0 g·L-1,玉米粉15.0g·L-1,大豆粉20.0 g·L-1,KH2PO40.25 g·L-1,MgSO4·7 H2O 0.25 g·L-1,接种量5%,初始pH 5.0,装量40%和转速190 r·min-1。厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学模型可描述发酵过程中孢子含量、还原糖和氨基氮浓度随时间的变化规律,并对碳氮代谢进行分析。模型能够较好地拟合发酵过程:孢子量比生长速率在88.1 h时达到最大,最大值为0.030 2 h-1;还原糖比消耗速率在86.8 h时达到最大,最大值为0.033 4 h-1;氨基氮比生成速率在110.8 h时达到最大,最大值为6.864×10-4h-1。模型拟合和试验数据具有良好的适应性,可反映普可尼亚菌液体发酵过程的动力学特征,为其大规模生产奠定基础。
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关键词
厚垣普可尼亚菌
液体发酵
动力学模型
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职称材料
厚垣普可尼亚菌航天诱变的生物学效应
被引量:
2
3
作者
孟繁丽
汪来发
+2 位作者
王曦茁
薛寒
苟大平
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期1037-1045,共9页
为探讨厚垣普可尼亚菌航天诱变的生物学效应,对筛选得到的29个厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株进行形态、色素、孢子形态、菌落生长速度、菌丝干重、产孢量和致病力等生物学特性检测,并测定各航天诱变菌株的耐盐性以及对苯菌灵的抗性。结果...
为探讨厚垣普可尼亚菌航天诱变的生物学效应,对筛选得到的29个厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株进行形态、色素、孢子形态、菌落生长速度、菌丝干重、产孢量和致病力等生物学特性检测,并测定各航天诱变菌株的耐盐性以及对苯菌灵的抗性。结果表明,厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株各项生物学特性与原始菌株存在差异。航天诱变后的菌株菌落形态和色素与原始菌株差异明显;菌落生长速度和菌丝干重的负突变率均高于正突变率;产孢量的正突变率高于负突变率;菌株Pc-m-4、Pc-m-6、Pc-m-10、Pcm-15和Pc-m-123对南方根结线虫卵的寄生率分别为92.33%、93.67%、91.67%、90.67%和90.33%,显著高于原始菌株的寄生率(81.00%),其中,菌株Pc-m-6具有较好的苯菌灵抗性,菌株Pc-m-10对盐具有较好的耐受性。航天诱变处理对厚垣普可尼亚菌影响显著,其诱变后的优良菌株具有防治南方根结线虫的潜力。
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关键词
厚垣普可尼亚菌
航天诱变
生物学特性
抗逆性
生物防治
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职称材料
芽孢杆菌B16对厚垣普可尼亚菌ZK7产孢能力的影响
被引量:
3
4
作者
李雨鑫
孔垂旭
+1 位作者
邹顺惺
刘亚君
《化学与生物工程》
CAS
2021年第10期16-20,共5页
利用生防菌生产菌剂是目前防治根结线虫的重要措施之一。单一菌剂的施用易受土壤中复杂生态因子的影响,各种生防菌相互作用可提高根结线虫防治效果的稳定性。研究了芽孢杆菌B16对根结线虫生防真菌厚垣普可尼亚菌ZK7产孢能力的影响,并初...
利用生防菌生产菌剂是目前防治根结线虫的重要措施之一。单一菌剂的施用易受土壤中复杂生态因子的影响,各种生防菌相互作用可提高根结线虫防治效果的稳定性。研究了芽孢杆菌B16对根结线虫生防真菌厚垣普可尼亚菌ZK7产孢能力的影响,并初步分析了相关信号物质。结果表明,芽孢杆菌B16能显著提高厚垣普可尼亚菌ZK7的产孢能力,B16发酵液与ZK7发酵液共培养产生的丁内酯能促进ZK7产孢,产生的甲苯对ZK7的产孢能力没有促进作用。
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关键词
芽孢杆
菌
厚垣普可尼亚菌
产孢能力
挥发性物质
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职称材料
题名
厚垣普可尼亚菌原生质体的制备、再生与遗传体系构建
1
作者
马园
郝陆瑶
张艳妮
李倩楠
王瑞
机构
内蒙古农业大学兽医学院
出处
《浙江农业学报》
北大核心
2025年第4期800-807,共8页
基金
国家自然科学基金(31960724,32160838,31460656)
内蒙古自治区重点研发和成果转化计划项目(2023YFDZ0048)
+1 种基金
内蒙古自然科学基金项目(2023LHMS03022,2023LHMS03005,2021MS03088,2019MS03017)
内蒙古自治区高等学校科学技术研究项目(NJZY21495)。
文摘
为建立厚垣普可尼亚菌高效原生质体制备体系和聚乙二醇(PEG)介导的遗传转化体系,选取厚垣普可尼亚菌菌丝作为实验对象,系统考察菌丝培养时间、裂解酶种类、酶解时间与温度、渗透压稳定剂类型和pH值等关键参数对原生质体形成的影响;采用单因素试验优化原生质体制备工艺;通过PEG介导法进行质粒DNA转化,评价转化子的遗传稳定性。结果表明:厚垣普可尼亚菌原生质体的最佳制备条件为厚垣普可尼亚菌在马铃薯葡萄糖水(PDB)培养基中26℃培养24 h,使用0.7 mol·L^(-1)NaCl(pH值7.5)作为渗透压稳定剂,经20 mg·mL^(-1)崩溃酶在30℃酶解5 h,0.5 g菌丝的原生质体产量达3.05×10^(6)mL^(-1);获得的原生质体在再生培养基中的再生率为6.2%。PEG介导转化能够获得稳定遗传的转化子,转化率为45%,转化菌株的菌落形态、生长速率和分生孢子产量与野生菌株无显著差异。本研究成功建立了厚垣普可尼亚菌原生质体高效制备与遗传转化体系,为其生防功能解析和基因工程学改造提供了关键技术支撑。
关键词
厚垣普可尼亚菌
原生质体
酶解条件
遗传转化
Keywords
Pochonia chlamydosporia
protoplast
enzymatic condition
genetic transformation
分类号
S855.9 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学
被引量:
4
2
作者
王曦茁
马建伟
汪来发
李永
余明忠
机构
中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室
四川省茂县林业局
出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期75-81,共7页
基金
科技部农业科技成果转化资金项目(2010GB24320615)
国家微生物资源平台项目(NIMR2013-7)
文摘
厚垣普可尼亚菌是对植物线虫有防治潜力的生防菌。利用正交设计优化厚垣普可尼亚菌液体发酵条件,利用Grow/Sigmoidal模型中的非线性拟合方程Logistic函数和Boltzmann函数构建该菌液体发酵过程中的孢子增长、底物消耗和产物生成的液体发酵动力学模型,并运用Origin Pro V8.6软件拟合求解出各模型参数。结果表明:在28℃条件下和500 mL摇瓶中,厚垣普可尼亚菌优化培养基及培养条件是葡萄糖15.0 g·L-1,玉米粉15.0g·L-1,大豆粉20.0 g·L-1,KH2PO40.25 g·L-1,MgSO4·7 H2O 0.25 g·L-1,接种量5%,初始pH 5.0,装量40%和转速190 r·min-1。厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学模型可描述发酵过程中孢子含量、还原糖和氨基氮浓度随时间的变化规律,并对碳氮代谢进行分析。模型能够较好地拟合发酵过程:孢子量比生长速率在88.1 h时达到最大,最大值为0.030 2 h-1;还原糖比消耗速率在86.8 h时达到最大,最大值为0.033 4 h-1;氨基氮比生成速率在110.8 h时达到最大,最大值为6.864×10-4h-1。模型拟合和试验数据具有良好的适应性,可反映普可尼亚菌液体发酵过程的动力学特征,为其大规模生产奠定基础。
关键词
厚垣普可尼亚菌
液体发酵
动力学模型
Keywords
Pochonia chlamydosporia
liquid fermentation
kinetic model
分类号
S763.18 [农业科学—森林保护学]
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职称材料
题名
厚垣普可尼亚菌航天诱变的生物学效应
被引量:
2
3
作者
孟繁丽
汪来发
王曦茁
薛寒
苟大平
机构
中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所/国家林业局森林保护学重点实验室
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期1037-1045,共9页
基金
国家林业局林业科学技术推广项目([2016]09)
国家微生物资源平台(NIMR2017-7)
文摘
为探讨厚垣普可尼亚菌航天诱变的生物学效应,对筛选得到的29个厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株进行形态、色素、孢子形态、菌落生长速度、菌丝干重、产孢量和致病力等生物学特性检测,并测定各航天诱变菌株的耐盐性以及对苯菌灵的抗性。结果表明,厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株各项生物学特性与原始菌株存在差异。航天诱变后的菌株菌落形态和色素与原始菌株差异明显;菌落生长速度和菌丝干重的负突变率均高于正突变率;产孢量的正突变率高于负突变率;菌株Pc-m-4、Pc-m-6、Pc-m-10、Pcm-15和Pc-m-123对南方根结线虫卵的寄生率分别为92.33%、93.67%、91.67%、90.67%和90.33%,显著高于原始菌株的寄生率(81.00%),其中,菌株Pc-m-6具有较好的苯菌灵抗性,菌株Pc-m-10对盐具有较好的耐受性。航天诱变处理对厚垣普可尼亚菌影响显著,其诱变后的优良菌株具有防治南方根结线虫的潜力。
关键词
厚垣普可尼亚菌
航天诱变
生物学特性
抗逆性
生物防治
Keywords
Pochonia chlamydosporia
space mutagenesis
biological characteristics
resistance
biological control
分类号
S476.12 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
芽孢杆菌B16对厚垣普可尼亚菌ZK7产孢能力的影响
被引量:
3
4
作者
李雨鑫
孔垂旭
邹顺惺
刘亚君
机构
云南大学省部共建云南生物资源保护与利用国家重点实验室
出处
《化学与生物工程》
CAS
2021年第10期16-20,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31260446)。
文摘
利用生防菌生产菌剂是目前防治根结线虫的重要措施之一。单一菌剂的施用易受土壤中复杂生态因子的影响,各种生防菌相互作用可提高根结线虫防治效果的稳定性。研究了芽孢杆菌B16对根结线虫生防真菌厚垣普可尼亚菌ZK7产孢能力的影响,并初步分析了相关信号物质。结果表明,芽孢杆菌B16能显著提高厚垣普可尼亚菌ZK7的产孢能力,B16发酵液与ZK7发酵液共培养产生的丁内酯能促进ZK7产孢,产生的甲苯对ZK7的产孢能力没有促进作用。
关键词
芽孢杆
菌
厚垣普可尼亚菌
产孢能力
挥发性物质
Keywords
Bacillus nematocida
Pochonia chlamydosporia
sporulation capacity
volatile substance
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
厚垣普可尼亚菌原生质体的制备、再生与遗传体系构建
马园
郝陆瑶
张艳妮
李倩楠
王瑞
《浙江农业学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学
王曦茁
马建伟
汪来发
李永
余明忠
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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职称材料
3
厚垣普可尼亚菌航天诱变的生物学效应
孟繁丽
汪来发
王曦茁
薛寒
苟大平
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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职称材料
4
芽孢杆菌B16对厚垣普可尼亚菌ZK7产孢能力的影响
李雨鑫
孔垂旭
邹顺惺
刘亚君
《化学与生物工程》
CAS
2021
3
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职称材料
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