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兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
1
1
作者
周慧萍
杨凡
+2 位作者
袁露
牛长敏
郑英
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期456-462,共7页
目的制备兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体。方法构建pET⁃28a⁃Ccdc189原核表达质粒。将重组质粒转化入大肠杆菌E.coli BL21中,异丙基⁃β⁃D⁃硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导Ccdc189原核蛋白表达。将纯化的重组蛋白免疫成年...
目的制备兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体。方法构建pET⁃28a⁃Ccdc189原核表达质粒。将重组质粒转化入大肠杆菌E.coli BL21中,异丙基⁃β⁃D⁃硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导Ccdc189原核蛋白表达。将纯化的重组蛋白免疫成年雄性新西兰大白兔,获得兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体。Western blot法、间接ELISA及免疫荧光组织化学染色分析鉴定多克隆抗体特异性。结果成功构建pET⁃28a⁃Ccdc189重组质粒并诱导Ccdc189重组蛋白表达。ELISA检测多克隆抗体效价为1∶1000000,Western blot法及免疫荧光组织化学染色显示Ccdc189多克隆抗体能特异性识别Ccdc189原核蛋白及成年野生型小鼠睾丸组织中的Ccdc189蛋白。结论成功制备了特异性强的兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体。
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关键词
卷曲螺旋
结构域
蛋白
189
(
ccdc
189
)
原核表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
1
1
作者
周慧萍
杨凡
袁露
牛长敏
郑英
机构
扬州大学组织学与胚胎学教研室
江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期456-462,共7页
基金
国家自然科学基金(82071696)
江苏省研究生科研创新计划项目(KYCX21_3289)。
文摘
目的制备兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体。方法构建pET⁃28a⁃Ccdc189原核表达质粒。将重组质粒转化入大肠杆菌E.coli BL21中,异丙基⁃β⁃D⁃硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导Ccdc189原核蛋白表达。将纯化的重组蛋白免疫成年雄性新西兰大白兔,获得兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体。Western blot法、间接ELISA及免疫荧光组织化学染色分析鉴定多克隆抗体特异性。结果成功构建pET⁃28a⁃Ccdc189重组质粒并诱导Ccdc189重组蛋白表达。ELISA检测多克隆抗体效价为1∶1000000,Western blot法及免疫荧光组织化学染色显示Ccdc189多克隆抗体能特异性识别Ccdc189原核蛋白及成年野生型小鼠睾丸组织中的Ccdc189蛋白。结论成功制备了特异性强的兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体。
关键词
卷曲螺旋
结构域
蛋白
189
(
ccdc
189
)
原核表达
多克隆抗体
Keywords
coiled⁃coil domain containing
189
(
ccdc
189
)
prokaryotic expression
polyclonal antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
Q518.1 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体的制备与鉴定
周慧萍
杨凡
袁露
牛长敏
郑英
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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