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兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
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作者 周慧萍 杨凡 +2 位作者 袁露 牛长敏 郑英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期456-462,共7页
目的制备兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体。方法构建pET⁃28a⁃Ccdc189原核表达质粒。将重组质粒转化入大肠杆菌E.coli BL21中,异丙基⁃β⁃D⁃硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导Ccdc189原核蛋白表达。将纯化的重组蛋白免疫成年... 目的制备兔抗小鼠卷曲螺旋结构域蛋白189(Ccdc189)多克隆抗体。方法构建pET⁃28a⁃Ccdc189原核表达质粒。将重组质粒转化入大肠杆菌E.coli BL21中,异丙基⁃β⁃D⁃硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导Ccdc189原核蛋白表达。将纯化的重组蛋白免疫成年雄性新西兰大白兔,获得兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体。Western blot法、间接ELISA及免疫荧光组织化学染色分析鉴定多克隆抗体特异性。结果成功构建pET⁃28a⁃Ccdc189重组质粒并诱导Ccdc189重组蛋白表达。ELISA检测多克隆抗体效价为1∶1000000,Western blot法及免疫荧光组织化学染色显示Ccdc189多克隆抗体能特异性识别Ccdc189原核蛋白及成年野生型小鼠睾丸组织中的Ccdc189蛋白。结论成功制备了特异性强的兔抗小鼠Ccdc189多克隆抗体。 展开更多
关键词 卷曲螺旋结构域蛋白189(ccdc189) 原核表达 多克隆抗体
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