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DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究被引量：16: 1; 作者陈建军 2刘崇怀 +2 位作者古勤生潘兴曹孜义《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-177,共5页; 在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA... 展开更多; 关键词 DAS-ELISA RT-PCR IC-RT-PCR 葡萄卷叶病毒ⅲ 比较研究检测检出率; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究被引量：11: 2; 作者刘三军郭卫东 +3 位作者张秋叶何水涛周厚成张亚冰《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期15-18,共4页; 利用ＲＴ－ＰＣＲ技术,对葡萄卷叶病毒株系Ⅲ进行了检测。采用的技术流程为:通过提取葡萄叶片或韧皮部总ＲＮＡ,获得病毒的ＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增,获得病毒ｃＤＮＡ的特征片段,并进行了序列分析。对提取的总ＲＮＡ进... 展开更多; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR 检测克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究被引量：3: 3; 作者陈建军曹香林 +2 位作者古勤生张亚冰刘崇怀《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第8期109-112,共4页; 结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。... 展开更多; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ 检测 IC-RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究: 4; 作者牛建新陈萍 +2 位作者李西平马兵钢鲁晓燕《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期100-103,共4页; 以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法.建立了GLRaVⅢRT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaV RT-PCR的优化体系.; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达被引量：1: 5; 作者赵冬兰朱水芳 +2 位作者张满良张成良黄文胜《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期88-90,共3页; 将葡萄卷叶伴随病毒的 CP基因克隆到表达载体 p ET- 30 a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1,筛选得到阳性克隆 GB- 1,用 IPTG诱导使其表达。SDS- PAGE电泳分析表明 ,该 CP基因在大肠杆菌 BL2 1中得到大量表达。用该病毒的 CP抗血清通过间接 EL; 关键词葡萄卷叶伴随病毒ⅲ CP基因基因表达基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究被引量：9: 6; 作者牛建新陈萍 +2 位作者李西平马兵钢鲁晓燕《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第1期28-32,共5页; 以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法。建立了GLRaV RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaVRT-PCR的优化体系。; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶伴随病毒基因的克隆及序列分析被引量：5: 7; 作者张满良朱水芳赵冬兰《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期70-75,共6页; 根据葡萄卷叶伴随病毒美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆... 展开更多; 关键词 CP基因克隆序列分析葡萄卷叶伴随病毒ⅲ 葡萄卷叶病; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄病毒病多重RT-PCR检测技术体系优化分析被引量：16: 8; 作者牛建新陈萍马兵钢《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期120-123,共4页; 在确立葡萄卷叶病毒Ⅲ和扇叶病毒RT-PCR优化体系基础上,研究了多重PCR的主要成分:dNTPS、TaqDNA聚合酶、MgCl2对PCR反应的影响,从而确立了GLRaVⅢ、GFLV的多重RT-PCR检测体系。研究结果表明,多重PCR反应体系中TaqDNA聚合酶的用量较单重... 展开更多; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ(GLRaV ⅲ) 葡萄扇叶病毒(GFLV) 多重RT-PCR检测体系; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究被引量：16: 1; 作者陈建军 2刘崇怀古勤生潘兴曹孜义; 机构中国农业科学院郑州果树研究所甘肃农业大学农学院; 出处《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-177,共5页; 基金科技基础性工作专项资金项目资助。; 文摘在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA的检出率明显低于RT-PCR和IC-RT-PCR方法。RT-PCR可以检测出RNA提取液为1:10-4的GLRaV-3病毒,但它受到了提取RNA难以及其它物质(如蛋白质、DNA等)干扰的影响,检测难度增加。从检测的灵敏度来看,RT-PCR和IC-RT-PCR比DAS-ELISA灵敏;并且,IC-RT-PCR比其它两种方法较快,整个过程仅需8h。; 关键词 DAS-ELISA RT-PCR IC-RT-PCR 葡萄卷叶病毒ⅲ 比较研究检测检出率; Keywords DAS-ELISA RT-PCR IC-RT-PCR Detection GLRaVs; 分类号 S436.631.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究被引量：11: 2; 作者刘三军郭卫东张秋叶何水涛周厚成张亚冰; 机构中国农业科学院郑州果树研究所西北农林科技大学; 出处《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期15-18,共4页; 基金中国农业科学院院长基金资助项目(编号9921-9)及河南省重大科技攻关项目"苹果葡萄草莓脱毒快繁及产业化应用"资助项目; 文摘利用ＲＴ－ＰＣＲ技术,对葡萄卷叶病毒株系Ⅲ进行了检测。采用的技术流程为:通过提取葡萄叶片或韧皮部总ＲＮＡ,获得病毒的ＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增,获得病毒ｃＤＮＡ的特征片段,并进行了序列分析。对提取的总ＲＮＡ进行了完整性和纯度检测,确定了良好的ＲＮＡ获得方法。结果表明,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增的片段序列与病毒源序列的同源性高达９９．３%,说明采用本研究确定的方法检测葡萄卷叶病毒株系Ⅲ结果可靠。; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR 检测克隆序列分析; Keywords Grapevine leafroll-associated virus type ⅲ RT-PCR Detection Clone Sequence analysis; 分类号 S436.631.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治] S432.41 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究被引量：3: 3; 作者陈建军曹香林古勤生张亚冰刘崇怀; 机构河南师范大学生命科学学院中国农业科学院郑州果树研究所河南科技大学农学院; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第8期109-112,共4页; 基金科技基础性工作专项资金资助项目; 文摘结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coliJM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒。由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠。最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法。; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ 检测 IC-RT-PCR; Keywords Grapevine GLRaV-3 Detecting IC-RT-PCR; 分类号 S436.631.19 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究: 4; 作者牛建新陈萍李西平马兵钢鲁晓燕; 出处《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期100-103,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30060053)和兵团科委项目(NKB02SDXNKO1SW)资助项目; 文摘以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法.建立了GLRaVⅢRT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaV RT-PCR的优化体系.; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR检测; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学] Q798 [生物学—分子生物学] S436.631 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达被引量：1: 5; 作者赵冬兰朱水芳张满良张成良黄文胜; 机构西北农林科技大学植保学院农业部植物检疫实验所; 出处《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期88-90,共3页; 基金国家"九五"科技攻关项目! (96 -0 0 4-0 5 -0 8); 文摘将葡萄卷叶伴随病毒的 CP基因克隆到表达载体 p ET- 30 a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1,筛选得到阳性克隆 GB- 1,用 IPTG诱导使其表达。SDS- PAGE电泳分析表明 ,该 CP基因在大肠杆菌 BL2 1中得到大量表达。用该病毒的 CP抗血清通过间接 EL; 关键词葡萄卷叶伴随病毒ⅲ CP基因基因表达基因克隆; Keywords grapevine leafroll associated Virus 3 CP gene expression clone; 分类号 S436.631.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究被引量：9: 6; 作者牛建新陈萍李西平马兵钢鲁晓燕; 机构石河子大学农学院园艺系; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第1期28-32,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30060053) 兵团科委项目(NKB02SDXNKO1SW)。; 文摘以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法。建立了GLRaV RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaVRT-PCR的优化体系。; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR检测; Keywords Grapevine leafroll virus ⅲ(GLRaV ⅲ) RT-PCR detection; 分类号 S436.63 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶伴随病毒基因的克隆及序列分析被引量：5: 7; 作者张满良朱水芳赵冬兰; 机构西北农林科技大学植物保护学院农业部植物检疫研究所; 出处《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期70-75,共6页; 基金国家"九五"重点科技攻关项目 !( 96-0 0 4 -0 5-0 8); 文摘根据葡萄卷叶伴随病毒美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆。通过双酶切以及序列分析表明 ,扩增样品与美国分离物的同源性为 94.1 %。; 关键词 CP基因克隆序列分析葡萄卷叶伴随病毒ⅲ 葡萄卷叶病; Keywords GLRaV-3 CP gene clone and sequence analysis; 分类号 S436.631.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄病毒病多重RT-PCR检测技术体系优化分析被引量：16: 8; 作者牛建新陈萍马兵钢; 机构石河子大学农学院园艺系; 出处《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期120-123,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30060053) 新疆建设兵团科委项目(NKB02SDXNK01SW); 文摘在确立葡萄卷叶病毒Ⅲ和扇叶病毒RT-PCR优化体系基础上,研究了多重PCR的主要成分:dNTPS、TaqDNA聚合酶、MgCl2对PCR反应的影响,从而确立了GLRaVⅢ、GFLV的多重RT-PCR检测体系。研究结果表明,多重PCR反应体系中TaqDNA聚合酶的用量较单重PCR反应体系要低,而且可降低成本和缩短检测时间。; 关键词葡萄卷叶病毒ⅲ(GLRaV ⅲ) 葡萄扇叶病毒(GFLV) 多重RT-PCR检测体系; Keywords Grapevine leafroll-associated virusⅲ(GLRaVⅲ) Gra pevine fan leaf virus(GFLV) Multiple RT-PCR detec-tion system; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究	陈建军 2刘崇怀古勤生潘兴曹孜义	《果树学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	16	在线阅读下载PDF 职称材料
2	葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究	刘三军郭卫东张秋叶何水涛周厚成张亚冰	《果树学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	11	在线阅读下载PDF 职称材料
3	IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究	陈建军曹香林古勤生张亚冰刘崇怀	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究	牛建新陈萍李西平马兵钢鲁晓燕	《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达	赵冬兰朱水芳张满良张成良黄文胜	《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究	牛建新陈萍李西平马兵钢鲁晓燕	《西北农业学报》 CAS CSCD	2004	9	在线阅读下载PDF 职称材料
7	葡萄卷叶伴随病毒基因的克隆及序列分析	张满良朱水芳赵冬兰	《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心	2000	5	在线阅读下载PDF 职称材料
8	葡萄病毒病多重RT-PCR检测技术体系优化分析	牛建新陈萍马兵钢	《果树学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	16	在线阅读下载PDF 职称材料