对虾鳗弧菌卵黄抗体(IgY)的制备及其对人工感染的保护研究 被引量：8

1

作者 朱香萍 张再生 刘宗柱 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期25-28,共4页

以纯培养的鳗弧菌作为抗原，探讨对虾鳗弧菌（Vibrio anguillarum）卵黄抗体（IgY）的制备技术，以及IgY在对虾体内的代谢及对人工感染和自然感染弧菌病的保护作用。结果表明：鳗弧菌对蛋鸡有较好的免疫原性，产蛋鸡经免疫后，血清与卵... 以纯培养的鳗弧菌作为抗原，探讨对虾鳗弧菌（Vibrio anguillarum）卵黄抗体（IgY）的制备技术，以及IgY在对虾体内的代谢及对人工感染和自然感染弧菌病的保护作用。结果表明：鳗弧菌对蛋鸡有较好的免疫原性，产蛋鸡经免疫后，血清与卵黄中很快出现抗体，而且卵黄中的抗体水平要高于血清中的抗体水平。IgY对鳗弧菌的感染有可靠的保护作用，IgY经口服后很快到达直肠，继而血淋巴、肝胰脏中也出现抗体，并可持续 12-24h；投喂IgY的试验组对虾在7d内的死亡率为15％，极显著地低于对照组对虾的同期死亡率（为60％）。 展开更多

关键词 对虾 弧菌病 被动免疫 卵黄抗体(igy)

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体IgY的制备及间接血凝检测方法的建立 被引量：3

2

作者 高家登 剡根强 +3 位作者 王静梅 杨铭伟 王超丽 杨龙龙 《中国奶牛》 2014年第9期26-29,共4页

本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1:... 本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1:1024,高效价持续5周开始下降,测定提取的IgY浓度为8.258mg/mL,无菌检测及动物安全性实验表明制备的卵黄抗体安全可靠。本研究制备了抗牛多杀性巴氏杆菌卵黄抗体,为防治由荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致的犊牛肺炎提供了新的手段。 展开更多

关键词 牛多杀性巴氏杆菌 卵黄抗体(igy) 间接血凝试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

ND-IBD双价卵黄抗体(IgY)的精制与应用

3

作者 乔竹琴 王兴春 韩克光 《畜禽业》 2012年第2期50-50,共1页

对ND、IBD双价卵黄液通过海藻酸钠-辛酸两步法提取,平均获得卵黄抗体(IgY)9.95mg/mL,平均纯度为77.26%,IBD抗体活性回收率达68.33%,ND抗体活性回收率为42.33%。人工感染IBD、ND试验,治愈率为分别为86.6%和80%以上;临床治疗IBD试验,治愈... 对ND、IBD双价卵黄液通过海藻酸钠-辛酸两步法提取,平均获得卵黄抗体(IgY)9.95mg/mL,平均纯度为77.26%,IBD抗体活性回收率达68.33%,ND抗体活性回收率为42.33%。人工感染IBD、ND试验,治愈率为分别为86.6%和80%以上;临床治疗IBD试验,治愈率为97.2%。本法经济简便,快速,不损害抗体,回收率高,疗效好,也可用于其它IgY抗体的提纯精制,具有较高的推广价值。 展开更多

关键词 ND IBD 卵黄抗体(igy) 精制

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡ND-IBD卵黄抗体(IgY)的精制与应用

4

作者 杨勇 《畜禽业》 2011年第2期34-36,共3页

对ND、IBD双价卵黄液通过海藻酸钠-辛酸两步法提取,平均获得卵黄抗体(IgY)9.95mg/mL,平均纯度为77.26%,IBD抗体活性回收率达68.33%,ND抗体活性回收率为42.33%。人工感染IBD、ND试验,治愈率为分别为86.6%和80%以上;临床治疗IBD试验,治愈... 对ND、IBD双价卵黄液通过海藻酸钠-辛酸两步法提取,平均获得卵黄抗体(IgY)9.95mg/mL,平均纯度为77.26%,IBD抗体活性回收率达68.33%,ND抗体活性回收率为42.33%。人工感染IBD、ND试验,治愈率为分别为86.6%和80%以上;临床治疗IBD试验,治愈率为97.2%。本法经济简便,快速,不损害抗体,回收率高,疗效好,也可用于其它IgY抗体的提纯精制,具有较高的推广价值。 展开更多

关键词 ND IBD 卵黄抗体(igy) 精制

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵黄抗体用于蛇毒抗原检测的初步研究 被引量：5

5

作者 王桂平 余清声 +3 位作者 刘新艳 朱柳 覃媛 黄劭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1351-1354,共4页

目的在常规ELISA检测中,以卵黄抗体取代哺乳动物来源的IgG类抗体,以探讨卵黄抗体应用于蛇毒检测的可行性.方法以甲醛减毒的眼镜王蛇毒抗原免疫莱航母鸡,制备抗眼镜王蛇毒抗体;采用过碘酸钠法对特异卵黄抗体进行酶标;将卵黄抗体及相应酶... 目的在常规ELISA检测中,以卵黄抗体取代哺乳动物来源的IgG类抗体,以探讨卵黄抗体应用于蛇毒检测的可行性.方法以甲醛减毒的眼镜王蛇毒抗原免疫莱航母鸡,制备抗眼镜王蛇毒抗体;采用过碘酸钠法对特异卵黄抗体进行酶标;将卵黄抗体及相应酶标抗体应用于常规ELISA中,对国内常见蛇毒样品抗原(包括眼镜王蛇毒、眼镜蛇毒、金环蛇毒、银环蛇毒、五步蛇毒及广东园斑蝰蛇毒)进行检测,并进行灵敏度、精确度、特异性及交叉反应等分析.结果检测的灵敏度可达32 μg·L-1,并且眼镜王蛇毒抗原浓度在32～750 μg·L-1的范围内,线性关系较好(r=0.963);初步应用表明卵黄抗体对眼镜王蛇毒具有较高的特异性,与蝰蛇科的五步蛇毒、园斑蝰蛇毒无交叉反应,与眼镜蛇科的金环及银环蛇毒仅在高剂量(剂量大于500 μg·L-1)时存在轻度交叉反应,不干扰实验检测,但与眼镜蛇毒之间交叉反应明显,干扰实验检测;应用本方法对低(100 μg·L-1)、中(300 μg·L-1)、高(1 000 μg·L-1)不同浓度的眼镜王蛇毒样品检测,结果平均板内变异系数均在1%～3%之内,板间变异系数在8%以内.结论 特异的卵黄抗体应用于微量蛇毒检测研究是可行的,具有灵敏度高、特异性较强等优点.该研究将为蛇伤诊断试剂盒的研制提供相应的理论依据. 展开更多

关键词 眼镜王蛇毒 卵黄抗体(igy) 酶联免疫吸附试验(ELISA) IGG类抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体的制备 被引量：7

6

作者 王桂平 余清声 +1 位作者 覃媛 黄劭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1426-1429,共4页

目的　研制抗眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体 ,并研究该抗体在鸡卵黄中表达过程。方法　以甲醛减毒处理的眼镜王蛇粗毒免疫莱航母鸡 ,母鸡免疫应答后 ,在卵黄中产生抗眼镜王蛇毒抗体 ,应用嗜硫色谱柱HiTrapIgYPurificationHP从鸡卵黄中提取抗眼... 目的　研制抗眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体 ,并研究该抗体在鸡卵黄中表达过程。方法　以甲醛减毒处理的眼镜王蛇粗毒免疫莱航母鸡 ,母鸡免疫应答后 ,在卵黄中产生抗眼镜王蛇毒抗体 ,应用嗜硫色谱柱HiTrapIgYPurificationHP从鸡卵黄中提取抗眼镜王蛇毒抗体 ;以间接ELISA法及双向免疫抗散法测定抗体的效价、特异性及免疫活性 ;采用福林酚法测定蛋白含量 ;采用SDS PAGE法测定分子量及鉴定抗体纯度 ;抗体的特异性及交叉反应采用酶联免疫吸附法进行进行验证。结果　母鸡初次免疫第 9天即有抗体产生 ,初次免疫 6 0天后抗体效价超过 10 5;卵黄抗体经嗜硫色谱柱纯化后 ,经SDS PAGE检测为电泳纯 ,纯化后抗体效价较纯化前提高 4倍 ,每枚蛋中平均可获得较纯抗体 97 5mg ;所获取的抗体具有高度特异性 ,与蝰蛇科属的其它蛇毒无交叉反应 ,与眼镜蛇科蛇毒存在不同程度交叉反应 (蛇毒浓度大于5 0 0 μg·L-1时明显 )。结论　本研究首次研制并鉴定了抗眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体 ,开拓了我国蛇伤治疗的新领域 ,并分析抗体在产蛋期卵黄液中表达的进度 ,为今后该抗体的持续、高质量诱导奠定基础 ,同时也促进其它抗蛇毒鸡卵黄抗体的研究开发及蛇毒单克隆抗体的研制。 展开更多

关键词 眼镜王蛇毒 卵黄抗体(igy) 鸡

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗幽门螺杆菌粘附素HpaA卵黄抗体的制备 被引量：6

7

作者 张绍兰 杨致邦 毛小琴 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期265-267,共3页

目的研制高效价特异性的抗幽门螺杆菌黏附素鸡卵黄抗体免疫球蛋白抗体。方法用纯化重组幽门螺杆菌黏附素(Helicobacter pyloriadhesin A,rHpaA)抗原免疫22周龄罗曼鸡,母鸡免疫应答后,在卵黄中产生抗幽门螺杆菌黏附素抗体;经硫酸铵法初... 目的研制高效价特异性的抗幽门螺杆菌黏附素鸡卵黄抗体免疫球蛋白抗体。方法用纯化重组幽门螺杆菌黏附素(Helicobacter pyloriadhesin A,rHpaA)抗原免疫22周龄罗曼鸡,母鸡免疫应答后,在卵黄中产生抗幽门螺杆菌黏附素抗体;经硫酸铵法初步纯化浓缩后;以间接ELISA鉴定抗体效价及免疫学活性;采用Bradford法测定蛋白含量;并用SDS-PAGE法测定分子量及鉴定抗体纯度。结果母鸡初次免疫第10d即有抗体产生,初次免疫后75d左右抗体效价超过1∶10000;最高可达为1∶12800。卵黄抗体经硫酸铵法纯化后,用SDS-PAGE分析,出现两条蛋白带,纯度达95%以上。其含量为10.56mg/ml蛋黄。结论本研究首次研制并鉴定抗黏附素卵黄抗体,开拓了我国预防幽门螺杆菌感染的新领域,分析了抗体在产蛋期卵黄液中表达的进度,为今后该抗体的持续、高质量诱导奠定基础。有望获得高效价、高产量的抗黏附素的IgY抗体(IgY-HpaA),为制备口服制剂开辟了广阔前景。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌黏附素 卵黄抗体(igy) 罗曼鸡

在线阅读 下载PDF 职称材料

VP28蛋白鸡源抗WSSV卵黄抗体的制备及性能分析 被引量：1

8

作者 黎铭 谢达祥 +6 位作者 李咏梅 赵永贞 曾地刚 彭金霞 杨彦豪 韦嫔媛 陈晓汉 《广西农业科学》 CSCD 2010年第12期1343-1346,共4页

为了研制鸡源抗对虾白斑综合征病毒(WSSV)卵黄抗体(IgY),利用WSSV毒株及其衣壳蛋白VP28制备成2种不同的疫苗,并分别免疫接种健康蛋鸡群,使鸡群产生不同的IgY,经病毒中和试验证实,2种IgY均有明显的抗WSSV效果,其中WSSV粗提液1∶1000倍稀... 为了研制鸡源抗对虾白斑综合征病毒(WSSV)卵黄抗体(IgY),利用WSSV毒株及其衣壳蛋白VP28制备成2种不同的疫苗,并分别免疫接种健康蛋鸡群,使鸡群产生不同的IgY,经病毒中和试验证实,2种IgY均有明显的抗WSSV效果,其中WSSV粗提液1∶1000倍稀释时,WSSV灭活苗免疫蛋鸡产生的IgY对南美白对虾的保护率为61.7%,重组VP28疫苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为48.3%;而WSSV粗提液1∶10000倍稀释时,WSSV灭活苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为85.0%,重组VP28疫苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为75.0%。 展开更多

关键词 南美白对虾 白斑综合征病毒(WSSV) VP28蛋白 卵黄抗体(igy)

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联卵黄抗体的制备及初步临床应用观察 被引量：2

9

作者 高家登 杨铭伟 +3 位作者 剡根强 王静梅 王超丽 杨龙龙 《中国奶牛》 2014年第22期17-20,共4页

本研究将自制牛支原体和牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗分别免疫产蛋鸡,并检测效价,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取Ig Y,观察抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联高免卵黄抗体制剂在犊牛中应用的效果,并进行临床应用研究。结果显示... 本研究将自制牛支原体和牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗分别免疫产蛋鸡,并检测效价,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取Ig Y,观察抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联高免卵黄抗体制剂在犊牛中应用的效果,并进行临床应用研究。结果显示,牛支原体在首免后第60d抗体效价达到高峰,经ELISA检测效价为1:128000;牛多杀性巴氏杆菌首免后第50d抗体效价达到高峰,经IHA检测效价为1:1024。临床初步应用表明,二联卵黄抗体对犊牛肺炎的预防和治疗均有一定作用。 展开更多

关键词 牛支原体 牛多杀性巴氏杆菌 卵黄抗体(igy)

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵黄抗体提取方法及其在畜禽细菌性肠道疾病防治中的应用 被引量：11

10

作者 贺维朝 张会艳 +3 位作者 王浩 赵青余 汤超华 张军民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第2期640-649,共10页

细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病,易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题,严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗,但由于抗生素长期大量使用,特别是不合理使用,使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显... 细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病,易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题,严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗,但由于抗生素长期大量使用,特别是不合理使用,使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显。因此,发展安全可靠的抗生素替代品已然成为当今畜牧行业的研究热点。卵黄抗体(egg yolk immunoglobulins,IgY)是通过免疫接种产蛋鸡后,在蛋黄中表达的一种免疫球蛋白,可用于相应疾病的预防和治疗。IgY具有产量大、性质稳定、安全高效等诸多优点,目前IgY作为抗生素替代品已被广泛用于畜禽养殖过程中,并取得了显著的效果。文章介绍了IgY的分子结构、理化性质和作用机理,总结并比较了5种IgY提取方法的去脂率、抗体效价、总蛋白含量等指标,最后详细介绍了IgY在防治畜禽常见细菌性感染中的研究现状和应用前景,以期为IgY的高效生产及疾病防治提供研究依据和技术支持。 展开更多

关键词 卵黄抗体(igy) 理化性质 提取方法 畜禽细菌性肠道疾病 抗生素替代物

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪产肠毒素大肠杆菌_(987)P菌毛卵黄抗体的研究 被引量：2

11

作者 谢志恒 赛金 +2 位作者 张开宇 张卉 王士长 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第10期1284-1287,共4页

【目的】探索产肠毒素大肠杆菌(ETEC)987P菌株培养的最佳条件及987P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体(IgY)的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养987P菌株,抽提层析纯化987P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄... 【目的】探索产肠毒素大肠杆菌(ETEC)987P菌株培养的最佳条件及987P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体(IgY)的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养987P菌株,抽提层析纯化987P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄开产海兰蛋鸡,采用间接ELISA检测987P菌毛蛋白免疫IgY效价。【结果】987P菌株的最佳培养条件为37℃下Slanctz固体培养基培养24h;以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫20周龄开产蛋鸡,发现987P菌毛蛋白二免、三免IgY效价总体趋势基本一致,均在第3周达到峰值并维持1周,二免抗体峰值为213,三免抗体峰值是二免峰值的2倍(214),但第4周过后三免IgY效价仍保持在213,且持续时间长,一般维持2～3周。【结论】以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫蛋鸡,能获得较高效价的IgY,且适当增加免疫次数能有效提高抗体水平和延长持续时间。 展开更多

关键词 猪 产肠毒素大肠杆菌(ETEC) 987P菌株 菌毛蛋白 卵黄抗体(igy)

在线阅读 下载PDF 职称材料

酪蛋白和乳球蛋白的抗体及酶标物制备研究 被引量：6

12

作者 宋宏新 柏红梅 +2 位作者 薛海燕 马冬 刘静 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期486-489,共4页

选用牛乳中的β-酪蛋白(β-CN)和β-乳球蛋白(β-Lg)为抗原对鸡体免疫,从鸡卵黄中用水稀释法及亲和色谱(HiTrapTM IgY Purification HP)纯化特异性鸡卵黄抗体(IgY)。PAGE电泳分析IgY纯度高达90%,ELISA效价为1:4096。用过碘酸钠氧化法进... 选用牛乳中的β-酪蛋白(β-CN)和β-乳球蛋白(β-Lg)为抗原对鸡体免疫,从鸡卵黄中用水稀释法及亲和色谱(HiTrapTM IgY Purification HP)纯化特异性鸡卵黄抗体(IgY)。PAGE电泳分析IgY纯度高达90%,ELISA效价为1:4096。用过碘酸钠氧化法进行抗原的过氧化物酶(HRP)标记,HRP与β-CN和β-Lg的分子个数比分别为1:1和1.5:1的标记效果最好,β-CN-HRP和β-Lg-HRP的效价高达1:640,其ELISA工作浓度分别为1:80和1:40。特异性IgY和酶标抗原为特异检测牛乳蛋白的酶联免疫吸附(ELISA)分析提供必要条件。 展开更多

关键词 β-酪蛋白(β-CN) β-乳球蛋白(β-Lg) 鸡卵黄抗体(igy) 抗原酶标 酶联免疫吸附

在线阅读 下载PDF 职称材料

竞争ELISA法对牛乳β-酪蛋白的检测 被引量：3

13

作者 宋宏新 潘洁 +1 位作者 柏红梅 薛海燕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第22期450-452,共3页

通过确定包被抗体最佳稀释度(anti-β-CN IgY1:160)、封闭液及封闭时间(含1%明胶的PBST,封闭1h)、酶标抗原(1:20)和待测脱脂牛乳样品稀释液(1:80)抗体作用时间(60min)、底物最佳反应时间(20min)、温度(37℃)等对竞争ELISA效果有重要影... 通过确定包被抗体最佳稀释度(anti-β-CN IgY1:160)、封闭液及封闭时间(含1%明胶的PBST,封闭1h)、酶标抗原(1:20)和待测脱脂牛乳样品稀释液(1:80)抗体作用时间(60min)、底物最佳反应时间(20min)、温度(37℃)等对竞争ELISA效果有重要影响的因素,建立检测牛乳β-酪蛋白的竞争ELISA法。经敏感性实验和重复性实验证明本实验建立的竞争ELISA法最低检出量为5.1μg/mL,变异系数(CV)小于5%,可以开发应用于牛乳及其制品的蛋白质品质快速检测。 展开更多

关键词 竞争ELISA Β-酪蛋白 鸡卵黄抗体(igy)

在线阅读 下载PDF 职称材料