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酶标记鸡卵黄抗E.coli O157∶H7抗体的制备与特性研究 被引量:8
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作者 宋宏新 刘晓阳 李宏 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期290-292,共3页
目的:研究制备特异性抗E.coli O157:H7鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)及酶标记抗体(IgY-HRP)的工艺条件。方法:分别用灭活菌体、脂多糖及O抗原多糖抗原免疫临产母鸡,水稀释法结合离子交换色谱分离提取IgY,再用过碘酸钠法和戊二醛法进行... 目的:研究制备特异性抗E.coli O157:H7鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)及酶标记抗体(IgY-HRP)的工艺条件。方法:分别用灭活菌体、脂多糖及O抗原多糖抗原免疫临产母鸡,水稀释法结合离子交换色谱分离提取IgY,再用过碘酸钠法和戊二醛法进行HRP标记,各种制品的分析用电泳及ELISA法。结果:可获得纯度为79.6%~85.3%的IgY,提取率74%~77%;过碘酸钠氧化法标记效果较好,IgY-HRP(1mg/ml)最高效价640。结论:免疫制备IgY方法可行,过碘酸钠法标记IgY-HRP取得良好效果。 展开更多
关键词 E.COLI O157:H7 卵黄抗体(igy) 酶标记抗体
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眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体的保护试验
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作者 黄月玲 丘剑峰 +2 位作者 刘寒英 余清声 王桂平 《中国医药导报》 CAS 2007年第07X期120-121,共2页
目的:制备特异性高的鸡眼镜王蛇毒卵黄抗体,并对其进行体外和体内保护试验。方法:用眼镜王蛇毒免疫母鸡,在卵黄中产生抗眼镜王蛇毒抗体IgY,用水溶解法提取IgY,进行小鼠体外中和试验和体内保护试验。结果:体外、体内保护试验显示,6mg/kg... 目的:制备特异性高的鸡眼镜王蛇毒卵黄抗体,并对其进行体外和体内保护试验。方法:用眼镜王蛇毒免疫母鸡,在卵黄中产生抗眼镜王蛇毒抗体IgY,用水溶解法提取IgY,进行小鼠体外中和试验和体内保护试验。结果:体外、体内保护试验显示,6mg/kg的IgY可有效中和小鼠体内低剂量(≤3LD50)的蛇毒,对致死剂量蛇毒有很好的保护效应。结论:从卵黄中制备的抗眼镜王蛇毒IgY可有效地中和眼镜王蛇毒。 展开更多
关键词 卵黄抗体(igy) 体内保护作用 体外中和试验
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卵黄抗体提取方法及其在畜禽细菌性肠道疾病防治中的应用 被引量:11
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作者 贺维朝 张会艳 +3 位作者 王浩 赵青余 汤超华 张军民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第2期640-649,共10页
细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病,易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题,严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗,但由于抗生素长期大量使用,特别是不合理使用,使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显... 细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病,易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题,严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗,但由于抗生素长期大量使用,特别是不合理使用,使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显。因此,发展安全可靠的抗生素替代品已然成为当今畜牧行业的研究热点。卵黄抗体(egg yolk immunoglobulins,IgY)是通过免疫接种产蛋鸡后,在蛋黄中表达的一种免疫球蛋白,可用于相应疾病的预防和治疗。IgY具有产量大、性质稳定、安全高效等诸多优点,目前IgY作为抗生素替代品已被广泛用于畜禽养殖过程中,并取得了显著的效果。文章介绍了IgY的分子结构、理化性质和作用机理,总结并比较了5种IgY提取方法的去脂率、抗体效价、总蛋白含量等指标,最后详细介绍了IgY在防治畜禽常见细菌性感染中的研究现状和应用前景,以期为IgY的高效生产及疾病防治提供研究依据和技术支持。 展开更多
关键词 卵黄抗体(igy) 理化性质 提取方法 畜禽细菌性肠道疾病 抗生素替代物
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酪蛋白和乳球蛋白的抗体及酶标物制备研究 被引量:6
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作者 宋宏新 柏红梅 +2 位作者 薛海燕 马冬 刘静 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期486-489,共4页
选用牛乳中的β-酪蛋白(β-CN)和β-乳球蛋白(β-Lg)为抗原对鸡体免疫,从鸡卵黄中用水稀释法及亲和色谱(HiTrapTM IgY Purification HP)纯化特异性鸡卵黄抗体(IgY)。PAGE电泳分析IgY纯度高达90%,ELISA效价为1:4096。用过碘酸钠氧化法进... 选用牛乳中的β-酪蛋白(β-CN)和β-乳球蛋白(β-Lg)为抗原对鸡体免疫,从鸡卵黄中用水稀释法及亲和色谱(HiTrapTM IgY Purification HP)纯化特异性鸡卵黄抗体(IgY)。PAGE电泳分析IgY纯度高达90%,ELISA效价为1:4096。用过碘酸钠氧化法进行抗原的过氧化物酶(HRP)标记,HRP与β-CN和β-Lg的分子个数比分别为1:1和1.5:1的标记效果最好,β-CN-HRP和β-Lg-HRP的效价高达1:640,其ELISA工作浓度分别为1:80和1:40。特异性IgY和酶标抗原为特异检测牛乳蛋白的酶联免疫吸附(ELISA)分析提供必要条件。 展开更多
关键词 β-酪蛋白(β-CN) β-乳球蛋白(β-Lg) 卵黄抗体(igy) 抗原酶标 酶联免疫吸附
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竞争ELISA法对牛乳β-酪蛋白的检测 被引量:3
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作者 宋宏新 潘洁 +1 位作者 柏红梅 薛海燕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第22期450-452,共3页
通过确定包被抗体最佳稀释度(anti-β-CN IgY1:160)、封闭液及封闭时间(含1%明胶的PBST,封闭1h)、酶标抗原(1:20)和待测脱脂牛乳样品稀释液(1:80)抗体作用时间(60min)、底物最佳反应时间(20min)、温度(37℃)等对竞争ELISA效果有重要影... 通过确定包被抗体最佳稀释度(anti-β-CN IgY1:160)、封闭液及封闭时间(含1%明胶的PBST,封闭1h)、酶标抗原(1:20)和待测脱脂牛乳样品稀释液(1:80)抗体作用时间(60min)、底物最佳反应时间(20min)、温度(37℃)等对竞争ELISA效果有重要影响的因素,建立检测牛乳β-酪蛋白的竞争ELISA法。经敏感性实验和重复性实验证明本实验建立的竞争ELISA法最低检出量为5.1μg/mL,变异系数(CV)小于5%,可以开发应用于牛乳及其制品的蛋白质品质快速检测。 展开更多
关键词 竞争ELISA Β-酪蛋白 卵黄抗体(igy)
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