【目的】获取鸡小黄卵泡颗粒细胞(granulosa cells of small yellow follicle,SYFG)全长转录组数据,为深入挖掘鸡卵泡发育内在分子调控信息提供参考。【方法】采用PacBio高通量测序平台,对海兰褐壳蛋鸡SYFG进行测序、过滤、聚类和矫正...【目的】获取鸡小黄卵泡颗粒细胞(granulosa cells of small yellow follicle,SYFG)全长转录组数据,为深入挖掘鸡卵泡发育内在分子调控信息提供参考。【方法】采用PacBio高通量测序平台,对海兰褐壳蛋鸡SYFG进行测序、过滤、聚类和矫正原始数据,获取全长转录本序列。通过生物信息学软件对全长转录本数据进行功能注释、转录因子注释、编码区序列(coding sequence,CDS)预测、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)预测筛选、简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)检测及可变剪接(alternative splicing,AS)和选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)分析。【结果】通过测序共获得52311条海兰褐壳蛋鸡SYFG全长转录本,长度主要分布于1~3500 bp。通过与GO、KEGG、COG、NR、Swiss-Prot和Pfam数据库比对,对转录本序列进行注释,其中GO数据库注释了26525条转录本,KEGG数据库注释了25233条转录本,COG数据库注释了31303条转录本,NR数据库注释了34284条转录本,Swiss-Prot数据库注释了30701条转录本,Pfam数据库注释了24622条转录本。此外,经鉴定或预测,还获得了559个转录因子、40944个CDS、14699个lncRNAs、7种类型的SSR、28423个AS和2747个APA事件。【结论】本研究获得了鸡SYFG全长转录组测序数据,提升了转录本的数量和长度,完善了转录本的功能注释,分析了AS和APA事件的类型,揭示了转录本的复杂性,为进一步从转录组水平解析鸡卵泡发育的分子调节机制提供数据支持。展开更多
试验旨在探寻具有生物活性的维生素D(1α,25-(OH)2D3)对体外培养的牛卵巢卵泡颗粒细胞的活力、增殖及雌激素分泌的影响。在体外培养的牛卵巢卵泡颗粒细胞中加入不同梯度的1α,25-(OH)2D3(0,1,10,100 n M),用CCK-8检测细胞活力,细胞计数...试验旨在探寻具有生物活性的维生素D(1α,25-(OH)2D3)对体外培养的牛卵巢卵泡颗粒细胞的活力、增殖及雌激素分泌的影响。在体外培养的牛卵巢卵泡颗粒细胞中加入不同梯度的1α,25-(OH)2D3(0,1,10,100 n M),用CCK-8检测细胞活力,细胞计数检测增殖,ELISA法检测雌二醇浓度。结果表明:1、10、100 n M的1α,25-(OH)2D3均能提高卵泡颗粒细胞的活性,1α,25-(OH)2D3为100 n M时其刺激作用最强;10、100 n M的1α,25-(OH)2D3能刺激卵泡颗粒细胞增殖与雌二醇分泌,100 n M的1α,25-(OH)2D3刺激增殖作用最强,10 n M的1α,25-(OH)2D3刺激雌二醇分泌的能力最强。展开更多
文摘试验旨在探寻具有生物活性的维生素D(1α,25-(OH)2D3)对体外培养的牛卵巢卵泡颗粒细胞的活力、增殖及雌激素分泌的影响。在体外培养的牛卵巢卵泡颗粒细胞中加入不同梯度的1α,25-(OH)2D3(0,1,10,100 n M),用CCK-8检测细胞活力,细胞计数检测增殖,ELISA法检测雌二醇浓度。结果表明:1、10、100 n M的1α,25-(OH)2D3均能提高卵泡颗粒细胞的活性,1α,25-(OH)2D3为100 n M时其刺激作用最强;10、100 n M的1α,25-(OH)2D3能刺激卵泡颗粒细胞增殖与雌二醇分泌,100 n M的1α,25-(OH)2D3刺激增殖作用最强,10 n M的1α,25-(OH)2D3刺激雌二醇分泌的能力最强。