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人卵巢组织冻融过程对卵巢组织的影响
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作者 李扬璐 阮祥燕 +5 位作者 杜娟 程姣姣 金凤羽 谷牧青 李妍秋 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 北大核心 2025年第4期594-600,共7页
目的采用慢速冷冻方法,以首都医科大学附属北京妇产医院生育力保护中心标准冻融方案,评估人卵巢组织冻融过程对卵巢组织的影响。方法将12例患者的卵巢组织分为新鲜卵巢组织组和冻融卵巢组织组,冻融方案为本中心标准方案,通过苏木精-伊红... 目的采用慢速冷冻方法,以首都医科大学附属北京妇产医院生育力保护中心标准冻融方案,评估人卵巢组织冻融过程对卵巢组织的影响。方法将12例患者的卵巢组织分为新鲜卵巢组织组和冻融卵巢组织组,冻融方案为本中心标准方案,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和钙黄绿素AM(calcein acetoxymethylester,calcein-AM)染色进行卵泡计数并评估卵泡活性,免疫组织化学法标记Ki-67和caspase-3的阳性率,评估细胞增殖和凋亡情况,Western blotting法比较两组在caspase-3、bax、FasL等凋亡相关蛋白的表达。结果采用本中心标准冻融方案,卵巢组织冻融前后在卵泡计数和卵泡活性方面差异无统计学意义(P>0.05);卵巢组织冻融后细胞Ki-67阳性率低于新鲜卵巢组织(P<0.05),差异有统计学意义;两组caspase-3阳性率差异无统计学意义(P>0.05);冻融后caspase-3蛋白表达量高于新鲜卵巢组织,差异有统计学意义(P<0.05);而bax和FasL等凋亡相关蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用本中心标准冻融方案,能够很好地保持卵巢组织内的卵泡数目、形态和活性,冻融后细胞增殖水平降低,不增加冻融后bax和FasL等凋亡相关蛋白的表达,caspase-3的表达量相对增加,是较好的人卵巢组织冻融方案。 展开更多
关键词 卵巢组织 冻融方案 卵泡活性 凋亡相关蛋白 生育力保护 卵泡损伤
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中国首个卵巢组织冻存库冻存患者特征及冻存效果分析 被引量:3
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作者 金凤羽 阮祥燕 +8 位作者 杜娟 程姣姣 李扬璐 王虎生 谷牧青 鞠蕊 杨瑜 王月姣 许新 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第4期521-525,共5页
目的评估中国首个卵巢组织冻存库进行卵巢组织冻存患者的特征及冻存效果。方法对首都医科大学附属北京妇产医院(中国首个卵巢组织冻存库)卵巢组织冻存患者数据库里面的217例女性患者的数据进行统计学分析,初步了解这部分人群所患疾病类... 目的评估中国首个卵巢组织冻存库进行卵巢组织冻存患者的特征及冻存效果。方法对首都医科大学附属北京妇产医院(中国首个卵巢组织冻存库)卵巢组织冻存患者数据库里面的217例女性患者的数据进行统计学分析,初步了解这部分人群所患疾病类型、年龄分布、所在城市、冻存前是否接受了放射治疗及化学药物治疗等情况。对其中的46位患者,每位患者取直径2 mm的标本共4个,采用数字表法随机选取其中2个用于新鲜卵巢组织的卵泡计数,剩余2个标本进行程序化冷冻/复苏,对比两组之间卵泡活性计数的差异。结果进行卵巢组织冻存患者的疾病类型以宫颈癌患者为主,占49.31%;年龄段主要在31~35岁,占总人数的36.4%,其次是26~30岁,占总人数的25.3%。新鲜卵巢组织组与冻存/复苏后卵巢组织组间卵泡活性计数差异无统计学意义(P>0.05)。结论首都医科大学附属北京妇产医院(中国首个卵巢组织冻存库)进行卵巢组织冻存患者的主要疾病类型是宫颈癌,人卵巢组织冻存/复苏技术能够有效保存患者生殖力。 展开更多
关键词 程序化冻存/复苏 卵巢组织 卵泡活性计数 生殖力保存 子宫颈癌
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抗氧化剂联合应用优化人卵巢组织冻融效果的研究 被引量:2
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作者 李扬璐 阮祥燕 +4 位作者 程姣姣 周琦 杜娟 金凤羽 谷牧青 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第4期526-532,共7页
目的以首都医科大学附属北京妇产医院生育力保护中心现有人卵巢组织冻存复苏方案为基础,研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)和T(taurine,T)对卵巢组织的保护效果,以最大限度保护卵泡和基质细胞活性,提高复苏后卵泡发... 目的以首都医科大学附属北京妇产医院生育力保护中心现有人卵巢组织冻存复苏方案为基础,研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)和T(taurine,T)对卵巢组织的保护效果,以最大限度保护卵泡和基质细胞活性,提高复苏后卵泡发育潜能。方法以本中心现有冻存复苏方案为对照组(C组),在此基础上加入5 mmol/L NAC(N组)或0.5 mmol/L牛磺酸(T组),或同时加入上述浓度的NAC和T(N+T组)。将16名患者的卵巢组织采用随机数字表法分配入以上4组,按照本中心标准化程序完成卵巢组织的处理和冻存。复苏后进行HE染色、钙黄绿素染色,进行形态学观察和卵泡活性检测,卵巢组织培养4 d后测定培养液中17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)、抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH),取培养后的卵巢组织测定细胞内活性氧类物质浓度(reactive oxygen species,ROS)。结果各组卵泡结构和活性均良好,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);各组卵巢组织经培养4 d后分泌E2浓度差异无统计学意义(P>0.05);N+T组卵巢组织中卵泡分泌AMH浓度高于C组,差异有统计学意义(P<0.05);N组和N+T组细胞内ROS浓度低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本中心现有冻存方案和在此基础上单独加入NAC或T的改良方案均可有效保护卵泡结构和卵泡活性,同时加入NAC和T可产生协同作用,在保存卵泡结构和活性的同时,提高复苏后卵泡分泌E2和AMH浓度,提高卵巢组织活性,减少细胞内ROS产生,降低氧化应激水平,提高复苏后的卵泡发育潜能。 展开更多
关键词 抗氧化剂 卵泡活性 卵泡形态 卵泡发育 氧化应激
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玻璃化冷冻和程序化冷冻人卵巢组织的效果 被引量:2
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作者 刘艳丽 申峻涵 +4 位作者 杜姗姗 刘景 申春艳 肖小帅 管一春 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第24期3202-3207,共6页
目的探讨玻璃化冷冻和程序化冷冻两种方法冻存人卵巢皮质的效果。方法收集因卵巢疾病患者需手术切除的卵巢组织标本,并随机分成玻璃化冷冻组、程序化冷冻组和新鲜对照组,分别进行组织学分析、窦前卵泡的分类计数和卵巢皮质的培养,比较3... 目的探讨玻璃化冷冻和程序化冷冻两种方法冻存人卵巢皮质的效果。方法收集因卵巢疾病患者需手术切除的卵巢组织标本,并随机分成玻璃化冷冻组、程序化冷冻组和新鲜对照组,分别进行组织学分析、窦前卵泡的分类计数和卵巢皮质的培养,比较3组卵巢组织内卵泡形态学、卵巢组织混悬液中卵泡计数和卵巢皮质培养上清液的雌二醇(E_(2))水平。结果(1)组织学分析:两冷冻组卵巢皮质中始基卵泡完整率明显低于新鲜对照组(84.62%、80.21%vs.97.93%,P<0.001),但两冷冻组之间差异均无统计学意义(P>0.05);程序化冷冻组次级卵泡完整率明显低于新鲜对照组(37.5%vs.88.24%,P<0.05);(2)窦前卵泡的计数:玻璃化冷冻组和程序化冷冻组单位体积卵巢组织混悬液中始基卵泡计数均明显低于新鲜对照组[(76.50±8.91)&(79.67±10.40)vs.(91.50±8.70),P=0.001];程序化冷冻组每100μL卵巢组织混悬液中初级卵泡和次级卵泡计数均明显低于新鲜对照组[(22.83±3.74)vs.(27.33±3.02),(9.50±3.46)vs.(12.55±3.25),P<0.05];(3)卵巢组织培养液中的E_(2)水平:体外培养的初期阶段(D2⁃D6),冻融卵巢组织分泌的E_(2)水平低于新鲜组织(P<0.05),之后阶段各组间上清液E_(2)水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻和程序化冷冻均能有效地保存人卵巢组织的活性;玻璃化冷冻方法简单易行,对于次级卵泡的保存效果优于程序化冷冻组,更适合人卵巢组织的冷冻保存。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 程序化冷冻 卵巢皮质 卵泡活性
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