目的:探讨抗阻运动通过刺激骨骼肌卵泡抑素样蛋白1(Follistatin-like protein 1,FSTL1)分泌,抑制心梗(Myocardial Infarction,MI)大鼠心肌细胞凋亡及其机制。方法:动物实验:结扎SD大鼠左冠状动脉前降支制备MI模型,术后随机分为5组,分别...目的:探讨抗阻运动通过刺激骨骼肌卵泡抑素样蛋白1(Follistatin-like protein 1,FSTL1)分泌,抑制心梗(Myocardial Infarction,MI)大鼠心肌细胞凋亡及其机制。方法:动物实验:结扎SD大鼠左冠状动脉前降支制备MI模型,术后随机分为5组,分别为假手术组(S)、心梗安静对照组(MI)、心梗+抗阻运动组(MR)、心梗+腺相关病毒空载体组(MV)、心梗+FSTL1腺相关病毒载体组(MF),每组10只,其中S组只穿线不结扎。术后1周,MR组进行为期4周的爬梯抗阻运动,MV组和MF组于左后肢胫骨前肌分别注射腺相关病毒空载体和FSTL1腺相关病毒载体。训练结束后次日,腹腔麻醉,测定心功能,摘取心脏和左后肢胫骨前肌。Masson染色观察并计算心肌胶原容积百分比(CVF%);TUNEL检测分析心肌细胞凋亡;Western Blotting实验测定骨骼肌和血清FSTL1蛋白含量,心肌FSTL1、DIP2A、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Bcl2/Bax蛋白表达。细胞实验:H9C2细胞分为8组,即H9C2对照组、H9C2+LPS(脂多糖:Lipopolysaccharide,LPS)组、H9C2+LPS+AICAR(AMPK激动剂AICAR)组、H9C2+LPS+LY294002(PI3K抑制剂LY294002)组、H9C2+LPS+AICAR+LY294002组、H9C2+LPS+rhFSTL1组、H9C2+LPS+rhFSTL1+AICAR组、H9C2+LPS+rhFSTL1+LY294002组。TUNEL检测H9C2细胞凋亡,CCK8检测H9C2细胞存活率,Western Blotting实验检测细胞FSTL1、DIP2A、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Bcl2/Bax蛋白表达。结果:MI后大鼠骨骼肌FSTL1基因和蛋白表达降低,心肌FSTL1基因表达无显著变化,心肌和血清FSTL1蛋白水平显著升高,心肌细胞凋亡和心肌纤维化显著增加,心功能下降。抗阻运动或胫骨前肌注射FSTL1腺相关病毒载体后,骨骼肌、血清和心肌FSTL1蛋白水平均显著升高,心肌FSTL1受体DIP2A、p-Akt、p-mTOR、Bcl2/Bax蛋白表达均显著上调,心肌细胞凋亡和心肌纤维化减少,心功能显著改善,且抗阻运动显著上调骨骼肌FSTL1基因表达,但心肌FSTL1基因表达无显著性差异。FSTL1和AICAR干预均显著抑制LPS诱导的H9C2细胞凋亡,增加FSTL1、DIP2A、p-Akt、p-mTOR、Bcl2/Bax蛋白表达水平和细胞存活率,LY294002干预与上述作用相反。结论:在抗阻运动上调MI大鼠心肌FSTL1表达抑制心肌细胞凋亡过程中,骨骼肌源性FSTL1发挥重要作用,骨骼肌源性FSTL1可通过血液循环到达心脏,与其受体DIP2A结合,激活下游Akt-mTOR信号通路,抑制心肌细胞凋亡,降低心肌纤维化,改善MI大鼠心功能。展开更多
目的:通过建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型和体外小鼠海马神经元系HT22细胞糖氧剥夺(OGD)模型,探讨淫羊藿苷(ICA)对新生小鼠脑组织以及HT22细胞卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)表达的影响.方法:将36只7 d C57BL/6小鼠随机分为对照组(con...目的:通过建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型和体外小鼠海马神经元系HT22细胞糖氧剥夺(OGD)模型,探讨淫羊藿苷(ICA)对新生小鼠脑组织以及HT22细胞卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)表达的影响.方法:将36只7 d C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、HIBD组(HIBD)和HIBD+ICA组(HIBD+ICA),每组12只,采用改良的Rice-Vannucci法建立新生小鼠HIBD模型;体外将HT22细胞分为对照组(control)、OGD组、OGD+ICA组,建立HT22细胞OGD模型,采用免疫荧光染色分别检测FSTL1在新生小鼠HIBD脑组织以及HT22细胞内的表达情况,Western Blot检测ICA对新生小鼠HIBD脑组织以及HT22细胞FSTL1表达的影响.结果:体内体外实验结果均显示,新生小鼠遭受HIBD或HT22细胞遭受OGD损伤后,新生小鼠脑组织以及HT22细胞FSTL1表达水平显著升高,HT22细胞形态结构不完整,而给予ICA预处理后这一情况得到逆转,且HT22细胞形态得到明显恢复.结论:ICA可能通过促进FSTL1表达对新生儿HIBD发挥神经保护作用.展开更多
文摘目的:通过建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型和体外小鼠海马神经元系HT22细胞糖氧剥夺(OGD)模型,探讨淫羊藿苷(ICA)对新生小鼠脑组织以及HT22细胞卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)表达的影响.方法:将36只7 d C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、HIBD组(HIBD)和HIBD+ICA组(HIBD+ICA),每组12只,采用改良的Rice-Vannucci法建立新生小鼠HIBD模型;体外将HT22细胞分为对照组(control)、OGD组、OGD+ICA组,建立HT22细胞OGD模型,采用免疫荧光染色分别检测FSTL1在新生小鼠HIBD脑组织以及HT22细胞内的表达情况,Western Blot检测ICA对新生小鼠HIBD脑组织以及HT22细胞FSTL1表达的影响.结果:体内体外实验结果均显示,新生小鼠遭受HIBD或HT22细胞遭受OGD损伤后,新生小鼠脑组织以及HT22细胞FSTL1表达水平显著升高,HT22细胞形态结构不完整,而给予ICA预处理后这一情况得到逆转,且HT22细胞形态得到明显恢复.结论:ICA可能通过促进FSTL1表达对新生儿HIBD发挥神经保护作用.
