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题名牛卵泡抑素基因克隆及真核表达载体构建
被引量:1
- 1
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作者
康峰
苏广华
苏建国
段彪
王子东
李光鹏
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机构
内蒙古大学生殖生物学及生物技术教育部重点实验室
西北农林科技大学动物科技学院
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出处
《中国牛业科学》
2011年第5期9-12,共4页
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基金
高产转基因肉牛新品种培育(编号:2008ZX08007-002)
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文摘
[目的]克隆牛的卵泡抑素基因(Follistatin,FSTN)基因,构建真核表达载体。[方法]用Trizol法从牛的卵巢中提取总RNA,反转录成cDNA,用带有酶切位点牛FSTN的特异性引物扩增其完整编码区序列,连接到T载体、测序,序列无误后亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP1中,酶切及PCR鉴定载体。[结果]经酶切及PCR鉴定表明成功构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP1-FSTN。[结论]成功构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP1-FSTN,为促进肌肉生长的转基因优质肉牛品种培育奠定了基础。
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关键词
牛卵泡抑素基因
基因克隆
真核表达载体构建
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Keywords
Bovine Follistatin
Gene Cloning
Eukaryotic Expression Vector Construction
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分类号
S823.2
[农业科学—畜牧学]
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题名猪成纤维细胞敲减卵泡抑素基因后的生物信息学分析
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作者
张冬杰
孙亚蒙
汪亮
李忠秋
杨国伟
刘娣
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机构
黑龙江省农业科学院畜牧研究所
农业农村部种养结合重点实验室
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出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第3期801-809,共9页
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基金
黑龙江省杰出青年基金项目(JQ2020C005)
黑龙江省农科院培育项目(2020FJZX007)。
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文摘
在哺乳动物中,卵泡抑素(follistatin,FST)不仅参与生殖调控,还与肌肉生长、脂肪沉积等显著相关。为了探究该基因在成纤维细胞中的生物学功能,本研究利用二代测序技术对敲减FST基因的猪成纤维细胞进行转录组测序,筛选差异表达基因,并利用在线生物学软件对差异基因进行GO功能注释及生物学通路富集分析。结果发现,敲减FST基因后共有370个基因显著上调,287个基因显著下调。与细胞增殖、凋亡相关的HOXA6、PARP14、ZBP1、NDUFB9、RAB13、FAM83D、THBS1和BTF3基因以及与疾病相关的ZNF354C、RNF213、IFIT1、CCL5和VPS13C基因均发生了显著变化。这些差异基因共得到51个GO功能注释,生物过程分类下的生物调节、细胞过程、代谢过程、单一生物过程和细胞组分分类下的细胞器、细胞区域、细胞及分子功能分类下的黏合条目下聚集的差异基因数量最多,均>200个。共发现12条显著富集的通路,包括3条与细胞增殖相关的通路(p53信号通路、细胞周期和真核生物中核糖体的生物发生),4条与疾病相关的通路(阿尔茨海默氏病、沙门氏菌感染、亨廷顿病和非小细胞肺癌),2条与肌肉收缩相关的通路(血管平滑肌收缩和心肌收缩)以及泛素介导的蛋白水解作用、肌动蛋白细胞骨架的调节和缝隙连接通路。以上研究结果表明,在成纤维细胞中敲减FST基因后,与细胞增殖分化和部分疾病相关的基因和生物学通路被显著富集,暗示FST基因在成纤维细胞的创伤修复过程中发挥重要的作用。
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关键词
猪
成纤维细胞
卵泡抑素基因
基因敲减
二代测序
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Keywords
pig
fibroblast
follistatin gene
gene knock-down
second genetration sequencing
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分类号
S828.8
[农业科学—畜牧学]
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题名猪卵泡抑素基因特异表达载体的构建及鉴定
- 3
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作者
刘娣
尹雪
张冬杰
汪亮
孙亚蒙
张晓卉
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机构
东北农业大学动物科学技术学院
黑龙江省农业科学院畜牧研究所
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出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期83-86,共4页
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基金
转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08006-003)
国家生猪产业体系岗位科学家项目(CARS-36)
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文摘
采用RT-PCR方法扩增猪的FST基因完整编码区,采用双酶切和连接方法构建可在肌肉细胞中特异表达的真核载体,并转染C2C12细胞系进行验证。结果表明,猪FST基因全长1 032 bp,与网上已提交序列相似度为99.13%,成功构建可在肌肉细胞中特异表达的真核载体pEGFP-C1-α-actin-FST,转染C2C12细胞后,通过实时定量PCR检测,表明FST基因过表达可抑制MSTN基因表达。
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关键词
猪
卵泡抑素基因
特异表达载体
实时定量PCR
过表达
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Keywords
pig
FST
specific expression vector
Real-time PCR
overexpression
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分类号
S828
[农业科学—畜牧学]
Q782
[生物学—分子生物学]
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题名卵泡抑素样蛋白5基因在鹅肥肝形成中表达调控的研究
被引量:2
- 4
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作者
刘立东
温康
顾旺
刘龙
赵敏孟
耿拓宇
龚道清
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机构
扬州大学动物科学与技术学院
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出处
《中国家禽》
北大核心
2019年第13期6-10,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(31672405)
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文摘
试验旨在探讨卵泡抑素样蛋白5(FSTL5)基因与鹅(Anser Cygnoides)肥肝形成的关系。试验选取30只健康、体重基本一致的70日龄朗德鹅,随机分为填饲组(15只)和对照组(15只)。在填饲到82日龄(填饲12 d)和94日龄(填饲24 d)时屠宰取样。此外,分离培养鹅原代肝细胞,并用葡萄糖、胰岛素和不同脂肪酸进行处理。结果显示:填饲后期肝脏和腹脂中FSTL5基因的表达量显著低于对照组(P<0.05),而胸肌中的表达量显著高于对照组(P<0.05)。在鹅原代肝细胞中,100 nmol/L胰岛素或0.25 mmol/L亚油酸能诱导FSTL5的表达(P<0.05)。综上所述,肝脏、脂肪与肌肉组织中的FSTL5表达在鹅肥肝形成后期受到显著影响,脂肪肝形成相关因子特别是胰岛素和亚油酸可诱导FSTL5的表达。研究结果为进一步研究FSTL5基因在鹅肥肝形成过程中的作用奠定了基础。
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关键词
鹅
脂肪肝
填饲
卵泡抑素样蛋白5基因
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Keywords
goose
fatty liver
overfeeding
follistatin-like protein 5(FSTL5)
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分类号
S835.2
[农业科学—畜牧学]
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