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卵泡抑制素通过伤害性神经元中的IGF1R信号通路促进神经病理性疼痛
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作者 凌月娟(译) 朱冰(译) 高永静(校) 《中国疼痛医学杂志》 北大核心 2025年第2期81-84,共4页
神经病理性疼痛是一种难治性慢性疾病。细胞因子和趋化因子介导的神经炎症在其发病机制中的作用已得到充分证明。卵泡抑制素(follistatin, FST)是一种分泌性糖蛋白,既往的研究证明FST通过拮抗转化生长因子-β (transforming growth fact... 神经病理性疼痛是一种难治性慢性疾病。细胞因子和趋化因子介导的神经炎症在其发病机制中的作用已得到充分证明。卵泡抑制素(follistatin, FST)是一种分泌性糖蛋白,既往的研究证明FST通过拮抗转化生长因子-β (transforming growth factor-β, TGF-β)超家族中细胞因子的作用发挥生物学效应。但FST在神经病理性疼痛中的作用及机制尚不清楚。本研究采用小鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation, SNL)模型对FST在神经病理性疼痛中的作用进行了研究。结果发现,SNL诱导FST在背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)大直径Aβ神经元中大幅度上调。抑制或敲除FST减轻了SNL诱导的神经病理性疼痛,并降低了伤害性神经元过度兴奋。相反,鞘内或足底注射FST重组蛋白或在DRG神经元中过表达FST,诱导疼痛过敏反应。此外,FST孵育增加了DRG神经元的兴奋性。分子互作研究显示FST与胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor, IGF1R)直接结合。抑制IGF1R降低了FST诱导的DRG神经元中ERK和AKT的激活以及神经元的过度兴奋。进一步结果证明,FST的N末端对IGF1R表现出高亲和力,而且靶向FST的N末端的短肽减弱了离子通道Nav1.7介导的神经元过度兴奋和SNL诱导的神经病理性疼痛。此外,FST通过IGF1R增强了人DRG神经元的兴奋性。因此,本研究揭示了FST在神经病理性疼痛中的作用以及一种新的作用机制,即外周神经损伤诱导FST在DRG的大直径神经元表达增加并释放,其通过与IGF1R结合激活ERK和AKT激酶,进而增强Nav1.7介导的伤害性神经元的过度兴奋,促进神经病理性疼痛。本研究提示FST有可能成为治疗神经病理性疼痛的潜在靶点。 展开更多
关键词 IGF1R 神经病理性疼痛 卵泡抑制素 神经炎症 外周神经损伤 背根神经节 细胞因子
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卵泡抑制素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒的构建及表达 被引量:28
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作者 茆达干 杨利国 +2 位作者 曹少先 张志杰 何晓红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期775-778,共4页
目的 :构建高免疫原性的抑制素真核表达载体。方法 :通过PCR扩增pCMV S基因中的S基因片段 ,然后将抑制素α(1 32 )片段与S的融合基因克隆到真核表达质粒pcDNA13.1( ) :酶切、测序鉴定后 ,采用脂质体包裹法将重组质粒转染Hela细胞 ,用SDS... 目的 :构建高免疫原性的抑制素真核表达载体。方法 :通过PCR扩增pCMV S基因中的S基因片段 ,然后将抑制素α(1 32 )片段与S的融合基因克隆到真核表达质粒pcDNA13.1( ) :酶切、测序鉴定后 ,采用脂质体包裹法将重组质粒转染Hela细胞 ,用SDS PAGE和ELISA对其表达产物进行检测。用抑制素融合表达质粒免疫大白鼠 ,ELISA检测血中抗抑制素抗体水平。结果 :酶切鉴定和序列分析表明 ,融合基因的表达质粒pClS构建成功。表达质粒在HeLa细胞中获得了表达 ,融合蛋白的分子量约为 2 9kD ,融合蛋白具有抑制素免疫原性。重组质粒免疫使大白鼠产生了抗抑制素抗体。结论 :高免疫原性的抑制素表达质粒的构建为利用抑制素基因免疫技术诱导单胎动物生多胎奠定了基础。 展开更多
关键词 卵泡抑制素 乙肝表面抗原 基因克隆 基因表达 表达质粒 真核表达载体
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猪卵泡抑制素主动免疫对山羊生殖的影响 被引量:4
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作者 刘桂琼 姜勋平 +1 位作者 丁家桐 杨利国 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期37-39,共3页
Inhibin was purified from swine ovarian fluid by deposition and column deposition.The purified inhibin was diluted with ureasodiumacetate,and then was mixed with Freund adjuvant with same volume.Each of the twenty... Inhibin was purified from swine ovarian fluid by deposition and column deposition.The purified inhibin was diluted with ureasodiumacetate,and then was mixed with Freund adjuvant with same volume.Each of the twenty goats was given subcutaneous injections of the purified inhibin 2 mg at neck.The goats were given boosterinjections of the inhibin 1 mg that was mixed with ureasodiumacetate and Freund incomplete adjuvant after 30 and 50 days.Five goats in control group were given admixture of urea and sodium acetate and adjuvant at the same time.The goats were injected with prostaglandin F2a 005 mg at 21 d and 31 d after the last immunization.The blood samples were collected at 30 d,51 d and 60 d after the first immunization and before immunization.The plasma FSH concentrates was assayed with RIA and the inhibin antibody titer was assayed with agar plate diffusion method.The plasma antibody titer was 1∶16256 at 60 d after first immunization.The plasma FSH concentrates of the immunized goats was higher than those of the control group(202 vs.12 mIU/ml,PZ<005).The number of follicle and the number of corpora lutea of the immunized group were as twice as those of the control(1931 vs.1223 and 225 vs.110,respectively).It indicated that inhibin purified from swine ovarian fluid could induce goat produce high ovulation rate and it can improve reproductive traits of goat. 展开更多
关键词 卵泡抑制素 主动免疫 山羊 生殖
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卵泡抑制素与GFP融合基因疫苗pEGISI的构建及表达 被引量:4
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作者 曹少先 茆达干 +4 位作者 舒邓群 程宝 王进荣 刘铁铮 杨利国 《家畜生态学报》 2007年第2期9-12,共4页
为构建卵泡抑制素与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因疫苗pEGISI,将pcISI中的乙肝表面抗原(HBsAg)S基因及插入S基因中的抑制素(INH)基因片段酶切回收;PCR扩增pcISI中INH基因片段,调整阅读框,一起融合到pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,构建ISI-E... 为构建卵泡抑制素与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因疫苗pEGISI,将pcISI中的乙肝表面抗原(HBsAg)S基因及插入S基因中的抑制素(INH)基因片段酶切回收;PCR扩增pcISI中INH基因片段,调整阅读框,一起融合到pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,构建ISI-EGFP融合表达质粒pEGISI。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pEGISI构建成功。将pEGISI转染293T细胞,16h后检测到绿色荧光,48h检测到强烈荧光,说明融合基因在293T细胞获得高表达;ELISA检测证实,表达产物ISI-EGFP融合蛋白具有INH的抗原抗体反应原性。质粒pEGISI的成功构建及表达为抑制素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 卵泡抑制素 EGFP 基因克隆 基因表达
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卵泡抑制素在家禽养殖中的研究应用
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作者 唐胜球 董小英 邹晓庭 《中国家禽》 北大核心 2003年第8期33-35,共3页
关键词 卵泡抑制素 结构 特性 代谢转运 免疫调节功能 基因免疫 内分泌 家禽 应用
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鹅卵泡抑制素α亚基的克隆及原核表达研究
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作者 王润霞 吕文发 《黑龙江动物繁殖》 2007年第2期8-9,17,共3页
利用RT-PCR技术从鹅的卵泡颗粒细胞中得到抑制素的总RNA,根据Genbank中家禽的抑制素基因的序列设计引物,扩增克隆抑制素α亚基片段,构建出克隆和表达载体,将鉴定为阳性的原核表达载体质粒(IB-pET28a-BL21,)经IPTG诱导4.5h后收集菌体,经... 利用RT-PCR技术从鹅的卵泡颗粒细胞中得到抑制素的总RNA,根据Genbank中家禽的抑制素基因的序列设计引物,扩增克隆抑制素α亚基片段,构建出克隆和表达载体,将鉴定为阳性的原核表达载体质粒(IB-pET28a-BL21,)经IPTG诱导4.5h后收集菌体,经电泳可见约1.4kD的蛋白带。 展开更多
关键词 卵泡抑制素 基因克隆 原核表达
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牛卵泡抑制素抗体对小白鼠和大白鼠卵巢与子宫的作用 被引量:7
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作者 刘曙光 杨利国 《黑龙江动物繁殖》 1998年第1期1-3,共3页
从用牛卵泡抑制素α-亚基片段免疫过的健康鸡所产蛋的卵黄液中提取抗体,得粗提物;然后用不同剂量的粗提物被动免疫20只性成熟小白鼠和20只发情周期大白鼠,并以生理盐水处理作为对照。结果发现,小白鼠用03ml抗体处理后,... 从用牛卵泡抑制素α-亚基片段免疫过的健康鸡所产蛋的卵黄液中提取抗体,得粗提物;然后用不同剂量的粗提物被动免疫20只性成熟小白鼠和20只发情周期大白鼠,并以生理盐水处理作为对照。结果发现,小白鼠用03ml抗体处理后,卵巢与子宫增重显著高于对照组(P<005)。大白鼠用06ml抗体处理后,卵泡平均数显著高于对照组(P<005)。这些结果表明,牛卵泡抑制素抗体被动免疫对小白鼠和大白鼠的子宫和卵泡发育有促进作用。因此,可用小白鼠或大白鼠对卵泡抑制素抗体活性进行生物学测定。 展开更多
关键词 抑制 抗体 卵泡抑制素 卵巢 子宫
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卵泡抑制素基因对绵羊卵巢颗粒细胞的影响及机制研究
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作者 戴可可 李尚来 +5 位作者 蔡玉 陈培勇 徐辉 吕文莉 赵冰茹 张艳丽 《南京农业大学学报》 2025年第5期1141-1150,共10页
[目的]本试验旨在研究卵泡抑制素(follistatin,FST)基因对湖羊卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GC)增殖及凋亡的影响,为揭示卵泡抑制素对湖羊繁殖调控机制的影响提供理论基础。[方法]利用免疫组织化学方法检测FST在卵巢组织中的表达特征... [目的]本试验旨在研究卵泡抑制素(follistatin,FST)基因对湖羊卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GC)增殖及凋亡的影响,为揭示卵泡抑制素对湖羊繁殖调控机制的影响提供理论基础。[方法]利用免疫组织化学方法检测FST在卵巢组织中的表达特征。利用RT-qPCR、Western blot、流式细胞术等方法,分析FST基因过表达和干扰对湖羊卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。通过RNA-seq分析FST基因干扰前后湖羊卵巢颗粒细胞的转录组表达差异变化。[结果]FST在湖羊卵巢颗粒细胞内高表达,干扰FST能抑制湖羊卵巢颗粒细胞增殖,降低颗粒细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白水平,过表达FST则表现出相反的趋势;RNA-seq结果显示,干扰FST后颗粒细胞中细胞周期调控、卵母细胞减数分裂、孕激素分泌等相关功能及通路发生显著变化。[结论]FST可以促进湖羊GC增殖,抑制GC凋亡,通过影响卵母细胞分裂和生殖激素分泌相关基因的表达,参与湖羊卵泡发育进程。 展开更多
关键词 卵泡抑制素 湖羊 颗粒细胞 增殖 凋亡
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也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达 被引量:1
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作者 黄增文 木尔扎提 吾热力哈孜.哈孜汗 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1340-1347,共8页
为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,... 为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。 展开更多
关键词 也木勒白羊 卵泡抑制素 真核表达 同源性分析
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构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞 被引量:1
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作者 王玮 袁建龙 +6 位作者 金永 朱兵 岳群华 梁浩 郭旭东 刘东军 仓明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期140-145,共6页
旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特... 旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS。脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况。结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊 卵泡抑制素 骨骼肌特异表达载体 转基因细胞系
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奶牛繁殖研究进展
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作者 杨利国 《中国奶牛》 1993年第3期21-23,共3页
1992年第12届国际动物繁殖学术讨论会共收到研究论文700余篇,其中624篇选入《论文集》。在入选的论文中,256篇与牛的繁殖有关(占41%),表明国际上对牛的繁殖研究仍然十分活跃。此外,在大会的全体会议和分组专题报告会议上,一些特邀专家... 1992年第12届国际动物繁殖学术讨论会共收到研究论文700余篇,其中624篇选入《论文集》。在入选的论文中,256篇与牛的繁殖有关(占41%),表明国际上对牛的繁殖研究仍然十分活跃。此外,在大会的全体会议和分组专题报告会议上,一些特邀专家根据近期文献作了综述报告,其中大部分内容也与牛的繁殖有关。本文综合与奶牛繁殖研究有关的研究论文,旨在介绍国内外奶牛繁殖的研究现状和进展,供进一步研究、开发和推广应用奶牛繁殖新技术参考。 展开更多
关键词 奶牛繁殖 卵泡抑制素 发情鉴定 动物繁殖 繁殖研究 性别控制 奶牛发情 牛人工授精 孕体 学术讨论会
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多囊卵巢综合征卵巢局部调节因子与中医药研究进展 被引量:3
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作者 朱珊珊 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第2期142-144,共3页
近年来的研究发现卵巢局部调节因子系统在PCOS的发病中起着一定作用并逐渐成为国内外学者研究的热点。就卵巢局部调节因子与多囊卵巢综合征的关系及其在多囊卵巢综合征发病中的作用和中医药相关方面的研究进展进行了综述。
关键词 多囊卵巢综合征 胰岛样生长因子系统 转化生长因子Β 抑制-激活-卵泡系统 表皮生长因子/转化生长因子-α 肿瘤坏死因子α 中医药 综述
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