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利用单细胞转录组揭示牛窦卵泡发育微环境异质性及动态调控网络
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作者 田甜 徐鸿 +6 位作者 贾海涛 王琛 刘莹 梁婧虹 张雨晴 袁宝 姜昊 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第5期722-733,共12页
窦卵泡发育调控涉及多层机制,其研究受制于对卵泡真实的微环境及关键分子事件的低效捕捉。本研究利用单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术,绘制了常用牛体外胚胎生产的3~8 mm卵泡单细胞图谱,并探讨了卵泡细胞异质... 窦卵泡发育调控涉及多层机制,其研究受制于对卵泡真实的微环境及关键分子事件的低效捕捉。本研究利用单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术,绘制了常用牛体外胚胎生产的3~8 mm卵泡单细胞图谱,并探讨了卵泡细胞异质性、差异表达基因、细胞发育分化轨迹及细胞通信等分子特征。结果表明:颗粒细胞、基质细胞、卵泡膜细胞、平滑肌细胞、内皮细胞和免疫细胞6种细胞[细胞标志物分别为抗米勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)、核心蛋白聚糖(decorin,DCN)、类固醇生成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,STAR)、ACTA2(actin alpha 2,smooth muscle)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,VWF)、CD14]参与构成牛窦卵泡微环境,其中颗粒细胞是驱动窦卵泡发育的关键细胞类群。颗粒细胞的4个亚群[细胞标志物分别为细胞色素P450家族19亚家族A成员1(cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1,CYP19A1)、POU类5同源框1(POU class 5 homeobox 1,POU5F1)、着丝粒蛋白F(centromere protein F,CENPF)、成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor 10,FGF10)]高度异质,并呈现出“信号转导→转录调控→增殖分裂→功能成熟”的分化轨迹,协同抑制素/抑制素βA(inhibin/inhibin beta A,INH/INHBA)及其他免疫调节通路的激活,重塑牛卵泡发育微环境并驱动卵泡选择程序的开启。此外,在单细胞水平上提供了卵泡膜细胞内外层结构分化路径和淋巴内皮细胞存在的分子证据。本研究结果为深入解析牛窦卵泡发育调控机制及优化牛体内外胚胎生产技术体系提供了新视角。 展开更多
关键词 卵泡发育 单细胞转录组学 细胞异质性 颗粒细胞 卵泡微环境
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槲皮素对蒙古羊卵泡发育、卵泡液微环境及卵巢类固醇生成相关基因表达的影响
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作者 王泳 那日苏 +5 位作者 梁建勇 刘洋 李九月 高源 田丰 薛树媛 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1150-1158,共9页
【目的】探索槲皮素对母羊卵泡发育、免疫及抗氧化功能、卵泡液生殖激素分泌和卵巢类固醇生成相关基因的影响。【方法】本试验选取体重相近、经产蒙古羊母羊30只,随机分为2组:对照组和槲皮素组,对照组饲喂基础饲粮,槲皮素组每只羊在基... 【目的】探索槲皮素对母羊卵泡发育、免疫及抗氧化功能、卵泡液生殖激素分泌和卵巢类固醇生成相关基因的影响。【方法】本试验选取体重相近、经产蒙古羊母羊30只,随机分为2组:对照组和槲皮素组,对照组饲喂基础饲粮,槲皮素组每只羊在基础饲粮中添加槲皮素7 g/d,每组3个重复,每个重复5只羊单独一栏饲养。试验采用同期发情处理,在第2个情期第13天采集血液用于抗氧化指标和生殖激素指标检测,采集母羊卵巢组织用于类固醇激素生成相关基因表达的检测。【结果】①相比于对照组,槲皮素组母羊的大卵泡和中卵泡数显著增加(P<0.05),血清中白细胞介素-6、肿瘤坏死因子、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A的水平极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),同时血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活力极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。②相比于对照组,槲皮素组母羊大卵泡内雌二醇、孕酮、促卵泡生成素和促性腺激素释放激素水平极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),中等卵泡内雌二醇和促卵泡生成素水平极显著升高(P<0.01);各级卵泡内促黄体生成素浓度均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。③相比于对照组,饲粮添加槲皮素极显著上调了母羊卵巢类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,STAR)和细胞色素P450家族19A成员1(cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1,CYP19A1)的mRNA表达(P<0.01)。【结论】饲粮添加7 g/d槲皮素可有效提高母羊抗炎症和抗氧化功能,并通过调控卵泡液生殖激素分泌和卵巢类固醇生成相关基因表达,进而影响母羊卵泡发育。 展开更多
关键词 槲皮素 卵泡发育 卵泡环境 类固醇激素 基因表达
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轻微型和控制型卵巢刺激对卵巢低反应患者卵泡液微环境的不同影响 被引量:3
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作者 李婷婷 张晓莉 黄睿 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期736-741,共6页
【目的】比较卵巢低反应患者进行卵巢轻微刺激和控制性卵巢刺激体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵泡液内激素水平、细胞因子的差异及其与获卵数、胚胎数等的关系。【方法】本研究为观察性研究。招募符合博洛尼亚标准的卵巢低反应患者,... 【目的】比较卵巢低反应患者进行卵巢轻微刺激和控制性卵巢刺激体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵泡液内激素水平、细胞因子的差异及其与获卵数、胚胎数等的关系。【方法】本研究为观察性研究。招募符合博洛尼亚标准的卵巢低反应患者,随机分为实验组(组2)和对照组(组1)。实验组采用来曲唑及低剂量外源性促卵泡生成素(Gn)进行卵巢轻微刺激,对照组采用常规控制性卵巢刺激(黄体期GnRH激动剂修饰长方案)进行卵巢刺激。于取卵日收集成熟卵泡(>16 mm)的卵泡液,其中实验组共23例,对照组共28例,测量卵泡液中促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、孕激素(P)、睾酮(T)和抗苗勒管激素(AMH)水平,以及抑制素(inhibin)、生长分化因子9(GDF9)和骨形成蛋白家族(BMP)水平。统计分析卵泡液中各激素、因子水平与获卵数、可利用胚胎数及优质胚胎数的相关性。【结果】实验组和对照组患者基本情况各指标之间:年龄、不孕年限、基础FSH、和窦卵泡数(AFC)差异均无显著性意义(P>0.05)。与对照组相比,实验组Gn用量更少,但两组的获卵数,可利用胚胎数及优质胚胎数差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,实验组卵泡液中LH水平、睾酮水平和inhibin B水平明显增高,而FSH水平、inhibin A水平、BMP8B和GDF9水平明显降低。其他几种激素水平,包括E2、P、AMH和BMP2、6、8B、15水平,两组间差异无显著性意义(P>0.05)。相关分析显示,卵泡液中各激素和细胞因子水平均与获卵数、可移植胚胎数及优质胚胎数无相关性。【结论】POR患者使用不同的轻微刺激和常规控制性卵巢刺激,卵泡微环境不同。但未发现这些变化与获卵数、可利用胚胎数、优质胚胎数存在相关性。 展开更多
关键词 卵巢轻刺激 卵巢低反应 卵泡环境
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