FLI通过增加糖代谢途径促进牛卵母细胞体外成熟

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作者 韩僖彤 张楠 +1 位作者 张宁 张家新 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2778-2789,共12页

为了明确FGF2、LIF和IGF1(FLI)改善牛卵母细胞体外成熟的作用机制。本研究使用屠宰场收集的卵巢,将从卵巢中抽取的卵丘卵母细胞复合体(COCs)随机分为对照组和FLI组,进行体外成熟,每组30枚COCs,每个试验重复3次。体外成熟24 h后检测第一... 为了明确FGF2、LIF和IGF1(FLI)改善牛卵母细胞体外成熟的作用机制。本研究使用屠宰场收集的卵巢,将从卵巢中抽取的卵丘卵母细胞复合体(COCs)随机分为对照组和FLI组,进行体外成熟,每组30枚COCs,每个试验重复3次。体外成熟24 h后检测第一极体排出率、卵丘扩展情况、线粒体膜电位、皮质颗粒分布、培养基中葡萄糖消耗量和丙酮酸含量、卵母细胞氧化还原态、TZPs数量、活性氧含量、相关基因的表达;并统计后续胚胎发育的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数。结果表明,FLI组卵丘扩展指数显著高于对照组(分别为3.16±0.04和2.43±0.02,P<0.001)。与对照组相比,FLI组卵母细胞的卵丘扩展相关基因表达升高(P<0.05),皮质颗粒向卵周迁移增多(P<0.05),但是卵母细胞第一极体排出率、线粒体膜电位没有显著变化(P>0.05)。与对照组相比,FLI组的培养基中葡萄糖的消耗、丙酮酸的含量显著增加(P<0.05),卵母细胞内NADPH显著增加(P<0.001),并且糖代谢相关基因的表达显著上升(P<0.05)。添加FLI可以显著降低卵母细胞内氧化还原水平、FAD++和ROS水平(P<0.05)。IVM 8 h时,FLI组TZPs数量显著高于对照组(分别为106±6.91和78±8.76,P<0.001)。体外受精后,FLI组卵裂率和囊胚率显著高于对照组(分别为(86.49±0.80)%、(37.44±0.42)%和(74.08±0.91)%、(27.34±1.08)%,P<0.05)。结果显示,FLI通过增加糖代谢提高了卵母细胞体外成熟质量和胚胎发育。 展开更多

关键词 牛 卵母细胞体外成熟 FLI 糖代谢

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两种未成熟卵母细胞体外成熟培养液的运用效果比较 被引量：5

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作者 冯婷 王守林 +2 位作者 刘嘉茵 钱晓乔 蔡令波 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期121-127,共7页

目的:通过比较自行研配的培养液与商品化培养液在卵母细胞体外成熟中的运用效果,为进一步优化体外成熟培养体系提供依据。方法:分别选择使用自行配制培养液的(IVM-A组)110个周期和使用商品化(IVM-B组)培养液的99个周期,并以同期行ICSI... 目的:通过比较自行研配的培养液与商品化培养液在卵母细胞体外成熟中的运用效果,为进一步优化体外成熟培养体系提供依据。方法:分别选择使用自行配制培养液的(IVM-A组)110个周期和使用商品化(IVM-B组)培养液的99个周期,并以同期行ICSI的治疗周期为对照(ICSI-C1和ICSI-C2),比较两组在体外成熟、胚胎发育、胚胎种植、临床妊娠及结局等方面的差异。结果:在两对照ICSI-C1和ICSI-C2各项指标无差异的情况下,IVM-A组体外成熟和胚胎发育等方面均高于IVM-B组,且可移植胚胎率、优质胚胎率明显提高(P<0.05或P<0.01),可移植胚胎率已达到ICSI组水平。虽然表面上IVM-A组在胚胎种植率、妊娠率(临床妊娠率)、活产率等指标低于IVM-B组,但不同阶段的对照组其指标明显改变,ICSI-C2(2006年以后)明显好于ICSI-C1。这种差异可能与近年来的临床治疗方案的改善及宫腔镜的使用有关。值得注意的是,IVM-A的流产率只有10.53%,显著低于其他3组,而同期的对照(ICSI-C1)却明显高于ICSI-C2,提示使用自行配制培养液培养的胚胎可显著降低流产的发生。但由于样本量还不够大,结果尚待进一步验证。结论:自行配制的培养液具有较好的运用效果,可能与其中额外添加的mHFF及E2等有关。但系统尚需进一步优化,以保证其高效、安全、价廉。 展开更多

关键词 培养液 人成熟卵泡液 卵母细胞体外成熟(ivm) 胚胎发育 妊娠

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保存温度对卵母细胞体外成熟率的影响及牦牛卵母细胞体外成熟培养方式初探 被引量：4

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作者 庞礴 赵新全 +3 位作者 郭志林 屈雷 于鸿浩 郭松长 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1158-1164,共7页

【目的】探索不同卵巢保存温度对卵母细胞体外成熟的影响以及两种培养方式对牦牛卵母细胞体外成熟的影响。【方法】通过对绵羊、山羊、牦牛、蒙古牛和奶牛卵母细胞进行体外成熟培养,比较两种保存温度对5种卵母细胞成熟率的影响,并以牦... 【目的】探索不同卵巢保存温度对卵母细胞体外成熟的影响以及两种培养方式对牦牛卵母细胞体外成熟的影响。【方法】通过对绵羊、山羊、牦牛、蒙古牛和奶牛卵母细胞进行体外成熟培养,比较两种保存温度对5种卵母细胞成熟率的影响,并以牦牛卵母细胞为研究对象比较两种培养方式对牦牛卵母细胞成熟率的影响。【结果】卵巢保存温度为20～25℃时,山羊卵母细胞体外成熟率显著高于卵巢保存温度26～30℃(P=0.021)。蒙古牛卵巢保存于20～25℃时,其卵母细胞成熟率极显著高于卵巢保存在26～30℃(P=0.001)。保存温度为20～25℃时,绵羊、牦牛和奶牛的卵母细胞体外成熟率都较高于卵巢保存温度为26～30℃时的成熟率。另外,牦牛卵母细胞在四孔板中成熟培养的成熟率与在35 mm培养皿中成熟率并没有显著差异(P=0.65)。【结论】绵羊、山羊、牦牛、蒙古牛和奶牛的卵巢保存于20～25℃为宜,该卵巢保存温度可提高卵母细胞体外成熟率。牦牛卵母细胞在四孔板中培养的成熟率高于在35 mm培养皿中成熟率。 展开更多

关键词 牦牛 保存温度 培养方式 卵母细胞体外成熟 成熟率

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亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响 被引量：3

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作者 郑海英 杨春艳 +4 位作者 张秀芳 黄芬香 梁贤威 尚江华 郑威 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期165-170,共6页

收集屠宰场水牛卵巢卵母细胞,在卵子体外成熟和受精后胚胎体外发育过程中分别添加0(对照组),10,50,100和200μmol·L-1的亚麻酸,探究亚麻酸对水牛卵母细胞核成熟率、受精卵的分裂率和植入前胚胎体外发育的影响。结果显示:在水牛卵... 收集屠宰场水牛卵巢卵母细胞,在卵子体外成熟和受精后胚胎体外发育过程中分别添加0(对照组),10,50,100和200μmol·L-1的亚麻酸,探究亚麻酸对水牛卵母细胞核成熟率、受精卵的分裂率和植入前胚胎体外发育的影响。结果显示:在水牛卵母细胞体外成熟液中添加亚麻酸,添加浓度50μmol·L-1组的核成熟率(74.18%)显著高于对照组和其他实验组(P<0.05),囊胚率(33.24%)显著高于对照组和10μmol·L-1亚麻酸组(P<0.05)。在胚胎培养液中添加50μmol·L-1亚麻酸组的囊胚率(34.52%)显著高于对照组和100μmol·L-1亚麻酸组(P<0.05);同时在成熟液和胚胎培养液中添加亚麻酸,添加浓度200μmol·L-1组的分裂率显著高于对照组(P<0.05),而各组间的囊胚率和D7囊胚比率均差异不显著。结果表明,单独在水牛卵母细胞体外成熟液和胚胎培养液中添加50μmol·L-1亚麻酸能有效促进水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育。 展开更多

关键词 亚麻酸 卵母细胞体外成熟 卵母细胞 胚胎发育 水牛

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卵母细胞体外成熟技术在体外受精-胚胎移植中的补救应用 被引量：1

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作者 滕晓明 陈智勤 +6 位作者 李昆明 陈慧芬 王羽 朱丽萍 杨健之 杨帆 潘家坪 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期253-255,共3页

目的对未成熟卵的体外成熟(IVM)技术在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的补救性应用进行总结,探讨影响其治疗结果的因素。方法在IVF-ET治疗中,对卵巢反应不良、卵泡发育迟缓和卵泡过多生长有发生过度刺激可能需要取消治疗周期的患者,在B超... 目的对未成熟卵的体外成熟(IVM)技术在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的补救性应用进行总结,探讨影响其治疗结果的因素。方法在IVF-ET治疗中,对卵巢反应不良、卵泡发育迟缓和卵泡过多生长有发生过度刺激可能需要取消治疗周期的患者,在B超引导下经阴道卵泡穿刺术取卵后,对未成熟卵进行体外培养成熟后进行IVF或卵胞浆内单精子显微注射,良好胚胎进行移植。结果取卵周期33个,共获未成熟卵214个,进行体外培养后126个成熟;32个周期进行常规胚胎移植,8例临床妊娠,移植周期临床妊娠率为25.00%(8/32);7例分娩8个健康婴儿。结论未成熟卵IVM技术是IVF-ET治疗不孕不育中有效的补充方法,可以补救未成熟的卵,减少患者取消IVF-ET治疗周期的发生。 展开更多

关键词 卵母细胞体外成熟 体外受精 胚胎移植 卵胞浆内单精子显微注射

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季节对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响 被引量：2

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作者 郭延华 石国庆 +3 位作者 万鹏程 卢春霞 唐红 周平 《中国草食动物》 2010年第2期13-16,共4页

试验采用梯度LH与E2的作用浓度比较卵母细胞的体外成熟率,并采用添加7.0μg/mLLH、1.3μg/mLE2研究季节性对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响。结果表明:①LH与E2的作用浓度对非繁殖季节(5月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P&g... 试验采用梯度LH与E2的作用浓度比较卵母细胞的体外成熟率,并采用添加7.0μg/mLLH、1.3μg/mLE2研究季节性对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响。结果表明:①LH与E2的作用浓度对非繁殖季节(5月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P>0.05),但以添加LH7.0μg/mL、E21.3μg/mL组卵母细胞成熟率较好。②LH与E2的作用浓度对繁殖季节(12月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P>0.05),以LH10.0μg/mL与E21.3μg/mL时卵母细胞成熟率较好。③湖羊和其他季节性发情绵羊卵母细胞的成熟率在繁殖季节(72.08%vs69.82%)与非繁殖季节(67.89%vs65.79%)差异不显著(P>0.05),但以繁殖季节的成熟率较高。④湖羊的卵母细胞在非繁殖季节与繁殖季节胚胎卵裂率(72.28%vs75.43%)、桑葚胚率(36.14%vs34.97%)差异不显著(P>0.05),繁殖季节囊胚率比非繁殖季节囊胚率偏高(16.18%vs14.40%)。 展开更多

关键词 卵母细胞体外成熟 胚胎发育 绵羊 湖羊

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卵母细胞体外成熟时间对绵羊核移植胚胎发育的影响 被引量：1

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作者 王立虎 黄俊成 +2 位作者 王惠川 施巧婷 郭志勤 《草食家畜》 2004年第4期32-35,共4页

将体外成熟的卵母细胞按不同成熟时间进行分组处理,并进行克隆胚胎的生产,实验表明,成熟时间为20～22h并在23～25h完成融合及激活的重构胚其融合率,卵裂率及体外培养到达桑葚胚/囊胚的比例分别为76.2%(176/231)、51.1%(118/231)和21.7%(... 将体外成熟的卵母细胞按不同成熟时间进行分组处理,并进行克隆胚胎的生产,实验表明,成熟时间为20～22h并在23～25h完成融合及激活的重构胚其融合率,卵裂率及体外培养到达桑葚胚/囊胚的比例分别为76.2%(176/231)、51.1%(118/231)和21.7%(23/106).而成熟时间为16～18h及24h以上的卵母细胞进行核移植胚胎的生产,其重构胚各种相应的数据分别为44.9%(84/187)、20.9%(39/187)、10.8%(4/37)以及71.1%(263/367)、48.0%(176/367)、和8.5%(14/176)。 展开更多

关键词 成熟时间 绵羊 卵母细胞体外成熟 克隆胚胎 核移植 体外成熟 胚胎发育 体外培养 影响 激活

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LIF对小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精效果的影响 被引量：2

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作者 周敏敏 丁海雷 +2 位作者 钱红娟 赵振华 王杏龙 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第3期38-39,共2页

关键词 卵母细胞体外成熟 受精效果 LIF 小鼠 基因表达调控 卵母细胞成熟 优化培养条件 早期胚胎

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培养液中添加物对牛卵母细胞体外成熟、受精和胚胎早期发育的影响 被引量：2

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作者 丁丽艳 韩永胜 +2 位作者 丁得利 李同豹 何宝国 《畜牧兽医科技信息》 2015年第1期26-27,共2页

1951年Chang和Austin首次发现哺乳动物精子获能现象，开创了哺乳动物体外受精（IVF）研究的新时代。白Brackett于1982年获得世界上第一头试管犊牛以来，IVF技术得到迅速发展。但牛胚胎体外化生产技术是一个复杂的过程，不仅受各种人为... 1951年Chang和Austin首次发现哺乳动物精子获能现象，开创了哺乳动物体外受精（IVF）研究的新时代。白Brackett于1982年获得世界上第一头试管犊牛以来，IVF技术得到迅速发展。但牛胚胎体外化生产技术是一个复杂的过程，不仅受各种人为因素的影响，还受到培养液等环境条件的制约，使体外受精胚胎发育率较低。本文就培养液中添加不同物质研究其对牛卵母细胞体外成熟、受精的影响，及培养液中添加不同蛋白质对受精后胚胎继续发育至囊胚的影响，从而筛选出牛卵母细胞体外成熟、体外发育的培养液中最佳添加物质，对优化牛体外胚胎的生产提供参考。 展开更多

关键词 卵母细胞体外成熟 体外受精胚胎 添加物质 早期发育 培养液 牛胚胎 犊牛 哺乳动物

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EGCG用于小鼠卵母细胞体外成熟的试验 被引量：2

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作者 邹恒 谷亚轻 李拥军 《上海畜牧兽医通讯》 2009年第6期42-43,共2页

关键词 卵母细胞体外成熟 EGCG 试验 小鼠 卵母细胞成熟 体内环境 体外培养 培养模式

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影响卵母细胞体外成熟的因素 被引量：3

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作者 张伟 王利红 《黄牛杂志》 2005年第1期51-53,56,共4页

卵母细胞体外成熟培养技术是现代生物技术中的重要内容之一。多年来科研人员为了进一步提高卵母细胞体外培养成熟率以及更深入了解卵母细胞成熟机制,对影响卵母细胞体外成熟的因素进行了大量的研究。本文较全面的综述了影响卵母细胞体... 卵母细胞体外成熟培养技术是现代生物技术中的重要内容之一。多年来科研人员为了进一步提高卵母细胞体外培养成熟率以及更深入了解卵母细胞成熟机制,对影响卵母细胞体外成熟的因素进行了大量的研究。本文较全面的综述了影响卵母细胞体外成熟培养的有关因素及其机制。 展开更多

关键词 卵母细胞体外成熟 影响 因素 体外培养成熟 术中 机制 综述 内容 科研人员 现代生物技术

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生殖激素对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 被引量：2

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作者 毛晓霞 万双秀 《上海畜牧兽医通讯》 2009年第1期33-34,共2页

关键词 卵母细胞体外成熟 晋中绵羊 生殖激素 乏情季节 体外成熟培养 激素浓度 分泌水平 FSH

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早卵泡期FSH和LH水平预测未成熟卵母细胞体外成熟治疗结局

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作者 王玉蓉 曹云霞 +4 位作者 魏兆莲 周平 章志国 丛林 张文香 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第6期462-464,共3页

目的　通过部分影响未成熟卵母细胞体外成熟(IVM )治疗多囊卵巢综合征 (PCOS)的相关因素分析 ,预测IVM技术治疗PCOS的成功率。方法　 32个PCOS患者 35个周期 ,月经第 3天测性激素 ,设计促排卵方案 ,采用IVM技术治疗。结果　 35个周期共... 目的　通过部分影响未成熟卵母细胞体外成熟(IVM )治疗多囊卵巢综合征 (PCOS)的相关因素分析 ,预测IVM技术治疗PCOS的成功率。方法　 32个PCOS患者 35个周期 ,月经第 3天测性激素 ,设计促排卵方案 ,采用IVM技术治疗。结果　 35个周期共获未成熟卵母细胞 36 8个 ,每个患者平均 10 (1～ 31)个 ,卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率、移植后妊娠率分别是 75 %、6 8%、80 %、2 3% ,早卵泡期FSH水平与未成熟卵数的获得数显著相关 ,早卵泡期E2≥ 2 0 0 pmol/l可能预示高妊娠率。 结论　早卵泡期FSH和E2 水平能预测多囊卵巢综合征患者未成熟卵母细胞体外成熟治疗结局。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征/治疗 妊娠 未成熟卵母细胞体外成熟

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影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的主要因素 被引量：1

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作者 师如意 张拴林 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第6期58-59,共2页

关键词 卵母细胞体外成熟 哺乳动物 卵母细胞成熟 类固醇激素 促性腺激素 体外受精 培养技术 体外模拟

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牛卵母细胞体外成熟的培养体系及影响因素的研究 被引量：2

15

作者 曹亮 聂旭 《畜牧兽医科技信息》 2009年第4期63-64,共2页

目前牛卵母细胞体外成熟培养（IVM）技术体系已经建立起来，并在不断的探索与完善当中。国内外的研究热点主要集中在各种因素对体外生产步骤的影响上，尤其是对卵母细胞IVM和胚胎发育阻滞的研究，突破这些难点将有利弄清卵母细胞成熟的... 目前牛卵母细胞体外成熟培养（IVM）技术体系已经建立起来，并在不断的探索与完善当中。国内外的研究热点主要集中在各种因素对体外生产步骤的影响上，尤其是对卵母细胞IVM和胚胎发育阻滞的研究，突破这些难点将有利弄清卵母细胞成熟的机理，促进胚胎操作技术和商业化胚胎IVP快速发展，在奶牛与肉牛的扩繁与母畜资源利用方面发挥巨大作用。本文将就现阶段牛卵母细胞体外成熟培养体系及影响因素的研究情况加以综述。 展开更多

关键词 卵母细胞体外成熟 牛卵母细胞 影响因素 培养体系 体外成熟培养 卵母细胞成熟 操作技术 体外生产

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卵母细胞体外成熟与体细胞核移植 被引量：2

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作者 赵磊文 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第5期56-57,共2页

关键词 卵母细胞体外成熟 体细胞核移植 初级卵母细胞 早期发育 卵原细胞 成熟分裂 原生殖细胞 编程过程

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GDNF、LIF和SCF对山羊卵母细胞体外成熟的影响

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作者 赵振华 钱红娟 +3 位作者 周敏敏 丁海雷 熊伟 王杏龙 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第2期21-22,共2页

关键词 卵母细胞体外成熟 GDNF SCF LIF 山羊 胚胎体外生产 体细胞核移植 卵母细胞质量

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生物科学专业开设卵母细胞体外成熟实验

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作者 孙晓凤 李兰 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2023年第8期197-199,230,共4页

为了使学生更好地理解减数分裂和卵母细胞成熟过程,引入卵母细胞体外成熟实验。取青春期雌性小鼠卵巢,通过机械穿刺的方法,释放皮质区卵泡内的卵母细胞,收集生发泡期(Germinal Vesicle,GV)卵母细胞,进行成熟培养16~18 h后,观察并比较GV... 为了使学生更好地理解减数分裂和卵母细胞成熟过程,引入卵母细胞体外成熟实验。取青春期雌性小鼠卵巢,通过机械穿刺的方法,释放皮质区卵泡内的卵母细胞,收集生发泡期(Germinal Vesicle,GV)卵母细胞,进行成熟培养16~18 h后,观察并比较GV期、生发泡破裂期(GV Breakdown,GVBD)和MⅡ各时期卵母细胞的形态特征。收集MⅡ期卵母细胞,通过核染料Hoechst33342染核观察。荧光显微镜下排出第1极体的卵母细胞可见一大核(卵母细胞核)和一小核(极体核)。该实验项目的开设可以帮助学生更好地理解减数分裂的概念以及减数分裂Ⅰ的进程。 展开更多

关键词 减数分裂Ⅰ 卵母细胞体外成熟 生发泡期 生发泡破裂期

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激素及生长因子对牛卵母细胞体外成熟的影响

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作者 韦精卫 韦英明 +2 位作者 孟凡丽 杨素芳 石德顺 《广西畜牧兽医》 2006年第5期236-238,共3页

在卵母细胞体外成熟液(含FSH)中分别添加10,30,50ng/mL表皮生长因子(EGF),24h检查其成熟率。结果表明:添加EGF50ng/mL时牛卵母细胞第一极体排出率显著提高,达85.4%(P<0.01);同时发现在含FSH和EGF的成熟液中添加HMG(尿促性素)并不能... 在卵母细胞体外成熟液(含FSH)中分别添加10,30,50ng/mL表皮生长因子(EGF),24h检查其成熟率。结果表明:添加EGF50ng/mL时牛卵母细胞第一极体排出率显著提高,达85.4%(P<0.01);同时发现在含FSH和EGF的成熟液中添加HMG(尿促性素)并不能提高牛卵母细胞体外成熟效果(P>0.05);同时还发现单独添加HMG成熟效果显著好于FSH(P<0.05)。 展开更多

关键词 牛 卵母细胞体外成熟 表皮生长因子 尿促性素

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猪卵巢卵母细胞体外成熟体系研究进展

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作者 王自恒 林峰 陈玉霞 《畜牧兽医杂志》 2004年第6期14-18,共5页

猪卵母细胞体外成熟培养中存在的问题是如何进一步提高卵母细胞的采集效率、急待解决的问题是成熟率不高和成熟质量差的问题。综合论述了猪体外受精技术所包含的猪卵母细胞体外成熟(IVM)培养和受精卵的体外培养两项密切相关的技术与方法... 猪卵母细胞体外成熟培养中存在的问题是如何进一步提高卵母细胞的采集效率、急待解决的问题是成熟率不高和成熟质量差的问题。综合论述了猪体外受精技术所包含的猪卵母细胞体外成熟(IVM)培养和受精卵的体外培养两项密切相关的技术与方法,以及完善现有的成熟体系及成熟过程。 展开更多

关键词 卵母细胞体外成熟 卵巢 采集效率 体外培养 体外受精 技术与方法 质量差 猪体 体系研究 成熟过程

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