郁金香种球传带南芥菜花叶病毒的检测 被引量：7

1

作者 高崇省 郭京泽 +1 位作者 刘鹏 王金成 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期98-99,171,共3页

对从荷兰进口的郁金香种球进行检疫,应用培育长出的叶片作为检测材料,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定方法(DAS-ELISA)和RNA逆转录PCR扩增法(RT-RCR)进行南芥菜花叶病毒的检测。从这些种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物—... 对从荷兰进口的郁金香种球进行检疫,应用培育长出的叶片作为检测材料,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定方法(DAS-ELISA)和RNA逆转录PCR扩增法(RT-RCR)进行南芥菜花叶病毒的检测。从这些种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物—南芥菜花叶病毒。 展开更多

关键词 郁金香种球 南芥菜花叶病毒

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南芥菜花叶病毒分子生物学快速检测方法的研究 被引量：3

2

作者 吴兴海 邵秀玲 +3 位作者 张凤娟 王英超 陈长法 肖西志 《江西农业学报》 CAS 2007年第7期34-35,共2页

根据南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic Nepovirus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR检测引物,对南芥菜花叶病毒和非南芥菜花叶病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应。结果,南芥菜花叶病毒的感病植物组织的PCR产物均出现364bp的特异性... 根据南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic Nepovirus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR检测引物,对南芥菜花叶病毒和非南芥菜花叶病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应。结果,南芥菜花叶病毒的感病植物组织的PCR产物均出现364bp的特异性扩增条带,而非南芥菜花叶病毒均未出现扩增条带,证明这对引物具有南芥菜花叶病毒鉴定特异性。将提取的南芥菜花叶病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果表明,此体系最低可检出南芥菜花叶病毒提取的RNA模板浓度为150pg/μL。 展开更多

关键词 分子生物学 南芥菜花叶病毒 快速检测

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逆转录环介导等温扩增技术检测南芥菜花叶病毒 被引量：2

3

作者 郭立新 谭毅 +3 位作者 刘永丰 邓丛良 段维军 许邹亮 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期91-95,95,共5页

根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了2组RT-LAMP引物,通过筛选试验,最终确定Ar4组引物为最佳引物,建立了南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测方法。同时,通过实时浊度仪和钙黄绿素分别对检测结果进行了判断。特异性和灵敏度试验结... 根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了2组RT-LAMP引物,通过筛选试验,最终确定Ar4组引物为最佳引物,建立了南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测方法。同时,通过实时浊度仪和钙黄绿素分别对检测结果进行了判断。特异性和灵敏度试验结果显示,RT-LAMP方法快速、特异且灵敏,其灵敏度与普通RT-PCR法一致。 展开更多

关键词 南芥菜花叶病毒 逆转录环介导等温扩增 检测

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南芥菜花叶病毒外壳蛋白的克隆表达及抗血清的制备 被引量：2

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作者 薛杨 安德荣 +1 位作者 全鑫 李明福 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期217-220,共4页

依据报道的ArMV外壳蛋白基因(coat protein,cp)序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到长约990bp的ArMV cp基因亲水基团部分片段,将目的片断克隆到原核表达载体pEGX-6p-1中,构建ArMV cp基因与GST蛋白融合表达载体pEGX-cp,重组载体化大肠杆菌BL... 依据报道的ArMV外壳蛋白基因(coat protein,cp)序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到长约990bp的ArMV cp基因亲水基团部分片段,将目的片断克隆到原核表达载体pEGX-6p-1中,构建ArMV cp基因与GST蛋白融合表达载体pEGX-cp,重组载体化大肠杆菌BL21,经IPITG诱导后,融合蛋白GST-cp得到了特异表达。用12%的SDS-PAGE分析结果表明,表达产物大小为63.2 kDa主要以包含体的形式存在。用冰冷的KCl显色,分离表达的蛋白质特异条带制备抗体,免疫家兔后得到特异性较强的抗血清,经酶联免疫法检测效价为1∶100 000。 展开更多

关键词 南芥菜花叶病毒 外壳蛋白 融合蛋白 抗血清

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南芥菜花叶病毒高灵敏度检测方法的建立及应用 被引量：2

5

作者 吴东妮 陈舜胜 +1 位作者 杨翠云 于翠 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期74-78,共5页

以感染ArMV的百合种球制备粗提液,分别用聚乙二醇(PEG-6000)和免疫磁珠(Immuno-magnetic beads,IMB)进行富集处理,以富集处理后的样品进行ELISA、RT-PCR和SYBR Green I实时荧光RT-PCR检测。结果表明:富集处理能显著提高这些方法从百合... 以感染ArMV的百合种球制备粗提液,分别用聚乙二醇(PEG-6000)和免疫磁珠(Immuno-magnetic beads,IMB)进行富集处理,以富集处理后的样品进行ELISA、RT-PCR和SYBR Green I实时荧光RT-PCR检测。结果表明:富集处理能显著提高这些方法从百合种球样品中检测ArMV的灵敏度。PEG-RT-PCR可检测稀释至10^(-5)的样品,IMB-RT-PCR可检测稀释至10^(-3)的样品。实时荧光RT-PCR检测也表明,PEG对百合种球中ArMV的富集效果优于IMB处理。对19批进境百合种球进行ArMV的RT-PCR检测,发现PEG或IMB富集处理提高了阳性样品的检出率。 展开更多

关键词 南芥菜花叶病毒 检测 RT—PCR 聚乙二醇 免疫磁珠 敏感度

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进境唐菖蒲种球携带南芥菜花叶病毒的检测 被引量：4

6

作者 丁元明 秦绍钊 +2 位作者 王云月 曹云华 杜宇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期46-48,共3页

利用DAS-ELISA对荷兰进境的唐菖蒲培育叶片进行南芥菜花叶病毒检疫,再对血清呈阳性的种球进行培育,以长出的叶片作为检测材料,采用RT-PCR方法进行南芥菜花叶病毒的检测,并对PCR产物进行克隆与测序。结果表明,从唐菖蒲种球上发现了我国... 利用DAS-ELISA对荷兰进境的唐菖蒲培育叶片进行南芥菜花叶病毒检疫,再对血清呈阳性的种球进行培育,以长出的叶片作为检测材料,采用RT-PCR方法进行南芥菜花叶病毒的检测,并对PCR产物进行克隆与测序。结果表明,从唐菖蒲种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物南芥菜花叶病毒(Arabismosaic virus,ArMV)。 展开更多

关键词 唐菖蒲 DAS-ELISA RT-PCR 南芥菜花叶病毒

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半巢式RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒 被引量：3

7

作者 粟智平 杨益娥 +3 位作者 邓丛良 李金庆 王颖 段效辉 《现代农业科技》 2015年第18期145-147,共3页

根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime ... 根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Realtime PCR等方法高。结果表明:该方法检测灵敏度可达0.06 fg/μL植物总RNA。 展开更多

关键词 南芥菜花叶病毒(ArMV) 半巢式RT—ReMtimePCR 检测

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南芥菜花叶病毒衣壳蛋白的克隆、原核表达和多克隆抗体制备 被引量：2

8

作者 苏学思 张玉宝 +3 位作者 王亚军 郭志鸿 邱阳 唐国亮 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期894-900,共7页

为开发百合中南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)的血清学检测技术及研究ArMV的致病机理,原核表达ArMV衣壳蛋白(coat protein,CP),纯化并制备其多克隆抗体。以侵染东方百合杂交品种‘木门’(‘Conca D’or’)的ArMV基因组为模板... 为开发百合中南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)的血清学检测技术及研究ArMV的致病机理,原核表达ArMV衣壳蛋白(coat protein,CP),纯化并制备其多克隆抗体。以侵染东方百合杂交品种‘木门’(‘Conca D’or’)的ArMV基因组为模板,克隆ArMV CP基因全长,构建ArMV CP基因原核表达载体,转化E.coli BL21(DE3)原核表达ArMV CP蛋白,并以纯化ArMV CP蛋白为抗原制备兔抗多克隆抗体,Western blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果表明:克隆获得百合ArMV CP序列(GenBank登录号:MT323117)全长,其长度为1515 bp,与已知的ArMV CP基因核苷酸序列相似性最高达到93.6%,氨基酸序列相似性最高达到98.2%;SDS-PAGE表明CP蛋白在E.coli BL21(DE3)中大量表达,蛋白相对分子质量为56 ku;Western blot结果显示抗体能够特异性结合ArMV CP蛋白,具有良好的特异性。 展开更多

关键词 百合 南芥菜花叶病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体

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三抗体夹心酶联试剂盒中南芥菜花叶病毒阳性对照替代物研制

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作者 赵世恒 高润蕾 +2 位作者 张光 李雪娇 云晓鹏 《北方农业学报》 2018年第4期87-89,共3页

在研制的南芥菜花叶病毒三抗体夹心酶联(TAS-ELISA)检测试剂盒中,山羊抗鼠多克隆抗体能够起到很好的阳性对照作用,具有替代侵染性的南芥菜花叶病毒的功能,可以监控整个酶联反应体系是否正常工作,避免了检疫性南芥菜花叶病毒扩散到环境中... 在研制的南芥菜花叶病毒三抗体夹心酶联(TAS-ELISA)检测试剂盒中,山羊抗鼠多克隆抗体能够起到很好的阳性对照作用,具有替代侵染性的南芥菜花叶病毒的功能,可以监控整个酶联反应体系是否正常工作,避免了检疫性南芥菜花叶病毒扩散到环境中去,通过分子生物学手段验证了研究的可行性。 展开更多

关键词 南芥菜花叶病毒 阳性对照 酶联免疫吸附 试剂盒

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检验出国家一类病毒云南及时销毁进口花种

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《农业工程技术（温室园艺）》 2008年第12期65-65,共1页

记者12月5日从云南检验检疫局获悉，云南检验检疫局日前集中销毁4批、8个品种带有番茄环斑病毒和南芥菜花叶病毒的进口百合花种球，确保了云南花卉的产业安全。据了解，由昆明星光卉欣园艺有限公司、昆明芊卉种苗有限公司和云南工艺品... 记者12月5日从云南检验检疫局获悉，云南检验检疫局日前集中销毁4批、8个品种带有番茄环斑病毒和南芥菜花叶病毒的进口百合花种球，确保了云南花卉的产业安全。据了解，由昆明星光卉欣园艺有限公司、昆明芊卉种苗有限公司和云南工艺品进出口有限公司分别从荷兰、新西兰、智利进口的价值15万元人民币的百合花种球， 展开更多

关键词 检验检疫局 云南 进口 销毁 类病毒 南芥菜花叶病毒 花种 番茄环斑病毒

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多重RT-PCR方法检测3种检疫性病毒的研究 被引量：2

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作者 崔学慧 陈舜胜 +1 位作者 于翠 杨翠云 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期25-29,共5页

根据番茄环斑病毒(ToRSV)、南芥菜花叶病毒(ArMV)和草莓潜隐环斑病毒(SLRSV)3种检疫性病毒的外壳蛋白基因保守序列设计特异性引物,在建立各种病毒单个RT-PCR技术的基础上,通过优化多重RT-PCR反应条件,初步建立了同步检测这3种病毒的多重... 根据番茄环斑病毒(ToRSV)、南芥菜花叶病毒(ArMV)和草莓潜隐环斑病毒(SLRSV)3种检疫性病毒的外壳蛋白基因保守序列设计特异性引物,在建立各种病毒单个RT-PCR技术的基础上,通过优化多重RT-PCR反应条件,初步建立了同步检测这3种病毒的多重RT-PCR检测体系。结果表明:3对引物特异性较强,分别可以扩增出580、438、298bp的目的片断;该方法快速、灵敏、准确,为同时检测进境百合中多种病毒提供了参考。 展开更多

关键词 病毒检测 番茄环斑病毒 南芥菜花叶病毒 草莓潜隐环斑病毒 多重RT-PCR

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葡萄传毒线虫及其防治

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作者 于春池 《河北果树》 1990年第4期25-26,共2页

线虫是动物界种类和数量仅次于昆虫的第二大类群,在自然界分布相当广泛,有的寄生于人或动物,有的寄生于植物体,有的自由生活在土壤和水中。在植物体上寄生的线虫叫植物寄生性线虫,多为肉眼看不到的多细胞无环节圆体蠕虫,长0.3—5 mm,宽0... 线虫是动物界种类和数量仅次于昆虫的第二大类群,在自然界分布相当广泛,有的寄生于人或动物,有的寄生于植物体,有的自由生活在土壤和水中。在植物体上寄生的线虫叫植物寄生性线虫,多为肉眼看不到的多细胞无环节圆体蠕虫,长0.3—5 mm,宽0.015—0.01mm。通常生活在土壤中,靠吻针刺入植物根部吸取营养,为害植物而引起线虫病害。植物寄生线虫的部分种类可以传染病毒,引起植物的病毒病害,现已发现的能够传染植物病毒的线虫有剑线虫属(Xiphinema sp.)、长针线虫属(Longido- 展开更多

关键词 传毒 植物病毒 剑线虫属 长针线虫属 病毒病害 吻针 悬钩子环斑病毒 番茄黑环病毒 南芥菜花叶病毒 植物根部

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